Orientador : Benedito Oliveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:32:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arita_MariaSumiko_M.pdf: 4935325 bytes, checksum: fc8877fe537576a558710e9741a9b68d (MD5) Previous issue date: 1978 / Resumo: 1. A resposta imune de Tayassu tajacu (L.), segundo o esquema descrito, leva a uma síntese preferencial de imunoglobulinas tipo IgGl. 2. por cromatografia em troca iônica e filtração em gel foram separadas três populações de anticorpos designadas, frações A, C e IgG-RC, com mobilidade eletroforética característica das imunoglobulinas IgG2C e IgGl de cobaia. 3. A precipitação específica em gel de agar, imunoeletroforese e hemaglutinação passiva, mostraram ser estas proteínas capazes de reconhecimento específico do antígeno. 4. Em função de seu comportamento em cromatografia de troca iônica, sua mobilidade eletroforética, precipitação específica, coeficiente de sedimentação, peso molecular e análise global de amino ácidos, estas três populações moleculares podem ser qualificadas de anticorpos IgG2A 7S, IgG2C 7S e IgGl. 5. os anticorpos específicos de Tayassu tajacu (L.), isolados do soro imune por meio de cromatografia de afinidade, mostraram-se resistentes ao tratamento ácido, utilizado para eluição da coluna de imunoadsorvente. 6. A técnica de hemaglutinação passiva, demonstrou título maior de anticorpos hemaglutinantes na região de IgGl, o que corrobora os resultados da análise eletroforética da resposta imune de Tayassu tajacu (L.). 7. A degradação proteolítica dos anticorpos tipo IgG2 de Tayassu tajacu (L.), apresentou os fragmentos Fab, Fc e Fc' característicos da digestão pela papaína de imunoglobulinas extensamente estudadas do ponto de vista estrutural tais como a IgG2 de cobaia e a IgG de coelho; os fragmentos Fab foram separados por cromatografia de troca iônica... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Benedito de Oliveira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T19:05:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marangoni_Sergio_D.pdf: 3995575 bytes, checksum: 388ae640ac8a953933cbb8c0647c8dae (MD5) Previous issue date: 1983 / Resumo: De paciente (JJO) da Faculdade de Medicina da Unicamp com quadro clínico característico de mieloma múltiplo foi obtido plasma com alta concentração de paraproteina M. A presença uma banda compacta indicativa de homogeneidade molecular característica de plasma patológico mielomatoso e de mobilidade eletroforetica tipo gamaglobulina lenta, foi detectada através de análise eletroforetica seguida de densitometria. O fracionamento do plasma JJO em DEAE celulose, levou a obtenção da fração A, cujo controle eletroforético evidenciou a purificação do componente M mielomatoso, livre de contaminações de outras proteinas plasmáticas. A fração A foi tipificada sorologicamente como uma imunoglobulina IgG do tipo IgGl com cadeias leves do isotipo lambda. O grau de pureza da proteina (JJO) (fração A) foi confirmado em eletroforese em gel de poliacrilamida na presença de SDS. A amostra, analisada na forma reduzida, mostrou a presença de bandas eletroforéticas com peso molecular em torno de 50000 e 25000 daltons em relação aos marcadores e que correspondem as cadeias pesada (H) e leve (L) respectivamente. A proteina M(JJO) foi caracterizada quimicamente como uma imunoglobulina IgGl com cadeias leves do isotipo lambda,através de autoradiografia da eletroforese em pH 3.5 do digesto péptico-tríptico da proteina JJO,reduzida e carboximetilada.Deste tratamento químico foram obtidas as bandas radioativas Jl, J2 e J3 de mobilidade eletroforética dos peptideos H-L, H-H e L respectivamente, e que caracterizam o padrão IgGl lambda / Abstract: Plasma from a patient (JJO) with multiple myeloma showing high levels of M paraprotein was obtained from the faculdade de Medicina, Universidade Estadual de Campinas.The results of electrophoretic analysis followed by densitometry showed a compact band indicative of molecular homogeneity characteristic of patient presenting monoclonal gamopathy. Fraction A containing myeloma protein was isolated from the pathologyc serum JJO by ion exchange chomatografy in DEAE celulose. Electrophoretic control of this fraction indicates the purification of the M component, without contamination with other plasma proteins. Fraction A was typed serologicaly as an IgGl immunoglobulin with lambda light chains. The purity of JJO protein (fraction A) was confirmed in SDS-polyacrylamide gel electroforesis. The reduced JJO protein showed two bands of 50 and 25K corresponding to heavy and light chains respectively. The M (JJO) paraprotein in was chemically typed as an IgGl protein with lambda light chains by autoradiography of high voltage electrophoresis of a pepsin-trypsin digests of myeloma protein partially reduced and alkylated with iodoacetate-C14. This material produces a consistent autoradiographic pattern. Which shows radioactives bands Jl, J2 andJ3 of electrophoretic mobility characteristic the H-L, H-H and L. peptides respectively / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Maria Heloisa Souza Lima Blotta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T01:46:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mamoni_RoneiLuciano_M.pdf: 2683040 bytes, checksum: acc6036324a8a945cb8ab134ec3c5f40 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: A paracoccidioidomicose (pCM) é uma doença sistêmica, crônica e progressiva, causada pelo fungo Paracoccidioides brasiliensis, que apresenta-se sob duas formas clínicas principais: a forma Adulta ou Crônica (F A) e a forma Juvenil ou Aguda (FI). O presente trabalho teve por objetivo estudar a correlação entre as formas clínicas e o padrão da resposta imunológica apresentada pelo hospedeiro na infecção humana pelo P. brasiliensis ¿Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Paracoccidioidomycosis (pCM) is a systemic, chronic disease caused by the dimorphic fungus ParacoccidioÜks brasiliensis, which may be classified in two polar forms: acute or juvenile (JF) and chronic or adult form (AF) ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Benedito de Oliveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T15:18:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Novello_JoseCamillo_M.pdf: 2523038 bytes, checksum: 89617109190ae943c0206453619e00a1 (MD5) Previous issue date: 1987 / Resumo: De soro de Tayassu tajacu imunizado com gama globulina Bovina (BGG) foram isoladas duas populações de imunoglobulinas IgGl e IgG2. Seu grau de pureza foi avaliado através de imunoeletroforese em agar e eletroforese em gel de poliacrilamida na presença de SUS. A composição global de aminoácidos das proteínas IgGl e IgG2 mostrou: a) presença de 39 meia cistinas para ambas moléculas b) o número total de resíduos (excluindo o triptofano) igual a 1314 para IgGl e 1308 para IgG2. c) um padrão de resíduos compatível com as IgG. Os resultados do número de resíduos de meia cistinas sugerem um número de cinco meia cistinas na região da dobradiça. O pentapeptídeo PTl de seqüência de aminoácidos Asp ¿ Glu ¿ Cys ¿ Gln - Ala isolado do digesto péptico-tríptico da proteína IgG2 típica quimicamente a proteína IgG2 como uma proteína do isso tipo Kappa / Abstract: Not informed. / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Sonia Maria Alves Bueno / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-25T23:25:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vancan_Sandra_M.pdf: 6213983 bytes, checksum: 026f117cf0c98455d786a9868057d851 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Atualmente, a purificação de proteínas do plasma utilizando métodos seletivos (cromatográficos) tem sido visto pela indústria farmacêutica como uma operação necessária, uma vez que proteínas altamente purificadas limitam os riscos de efeitos colaterais em pacientes. Por isso, o desenvolvimento de métodos seletivos de purificação em larga escala são hoje indispensáveis para aumentar a diversidade, melhorar o rendimento e o grau de pureza das proteínas terapêuticas extraídas do plasma. No presente trabalho estuda-se a viabilidade de separar imunoglobulina G (IgG) a partir do plasma humano utilizando cromatografia de afinidade com íons metálicos imobilizados, IMAC. Esta técnica explora a afinidade de proteínas por íons metálicos imobilizados e tem sido utilizada para purificar várias proteínas e peptídeos. Experimentos cromatográficos foram realizados com IgG humana pura para selecionar o íon metálico entre Cu2+, Ni2+, Zn2+ e Co2+, a ser imobilizado no agente quelante (IDA) e vários tampões foram testados na etapa de adsorção. As proteínas adsorvidas no suporte foram eluídas pela protonação dos grupos doadores de elétrons da proteína reduzindo-se o pH do meio ou por competição com outra espécie doadora de elétrons (gradiente crescente da concentração de imidazol). Estes íons metálicos imobilizados no agente quelante EDA apresentaram diferentes forças de retenção da proteína (IgG humana pura). Selecionado o íon metálico Ni2+, a seletividade do suporte em adsorver IgG foi determinada empregando plasma humano de indivíduos sadios. Como IgG não foi purificada em IDA-Ni2" a níveis expressivos, utilizou-se uma segunda coluna em série com a primeira, a fim de obter maior pureza de IgG. Análises nefelométricas da fiação retida em colunas IDA-Zn em série com IDA-Ni2" e eluída a pH 5,0 mostraram a presença de 41,90% de IgG, 1,34% de IgM, 2,10% de IgA e 54,69% de transferrina. As proteínas contaminantes, transferrina e IgM, podem ser removidas da amostra por cromatografia de filtração em gel. A análise realizada por focalização isoelétrica das frações de lavagem e de eluição dos experimentos conduzidos com IgG humana Sigma, mostrou que a distribuição de pontos isoelétricos nas frações de lavagem e eluição não dependeu do íon metálico imobilizado (dentre os estudados), nem do sistema tamponante utilizado. Observou-se que as frações não retidas (lavagem) apresentaram IgG de baixo pi (entre 5,0 e 6,0). Não obteve-se seletividade na eluição de IgG por decréscimo de pH (íons Ni2^ imobilizado) ou incrementos na concentração de imidazol (íons Ni2+ e Zn2+ imobilizados), todas as frações apresentaram pi de 6,0 a 8,65, não sendo observado a separação / Abstract: Purification of plasma proteins through selective methods, such as cromatography, has been recognised in nowadays as an important operation by pharmaceutical industry as the highly purified proteins reduce side effects. Therefore, the development of purificaton selective methods for large scale operations are extremely important to broad diversity, improve the yield and purity of therapeutic proteins extracted from plasma. In this work a flexibility study on the separation of immunoglobulin G (IgG) from human plasma through immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC) is carried out. This technique exploit the protein affinity for immobilized metal ion and has been used to purity several proteins and peptides. Chromatography were carried out with pure human IgG in order to select the metal ion amongst Cu2+, Ni2+, Zn2+ e Co2", to be immobilized on IDA. Several buffers were tested in the adsorption stage as well. The proteins adsorbed on the support were eluted by the protonation of the electron-donating species on the protein using a decreasing pH step gradient or increasing imidazole concentration. The metal ion bonding chelating agents (IDA) showed distinct interactions with protein (pure human IgG). Since Ni2+ was selected, the support selectivity to adsorb IgG was determined with human plasma from healthy people. As IgG has not been completely purified on IDA-Ni2^, a second column (containing immobilized Ni2") has been used in series with the first one (containing immobilized Zn2") in order to achieve a ligher purity degree of IgG. Nephelometric analysis of the retained fraction on ID A-Zn2" columns in series with IDA-Ni2+, and eluted at pH 5.0 determinated 41.90% of IgG, 1.34% of IgM, 2.10% of IgA and 54.69% of transferrin. The contaminant proteins (transferrin and IgM) could be removed using gel filtration. The analysis carried out by isoelectric focusing of wash e elution fractions using human IgG (Sigma), showed that the isoelectric point distribution in the wash and elution fractions were not dependent neither on the immobilized metal ion or the buffer used. It could be observed that the non-retained fractions (wash) contained IgG with low pi (between 5.0 e 6.0). Selectivity in IgG elution by decreasing pH step gradient (immobilized Ni2+) or increasing imidazole concentration (immobilized Ni2r and Zn2+) was not reached, all retained fractions contained IgG with pi between 6.0 and 8.65, and separation was not observed / Mestrado / Desenvolvimento de Processos Biotecnologicos / Mestre em Engenharia Química

Orientadores: Aureo Tatsumi Yamada, Wirla Maria da Silva Cunha Tamashiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T21:05:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bizinotto-Assuncao_MarciaCristina_M.pdf: 6104041 bytes, checksum: 3ffb92d94cec782124d560cb2a5a0ffb (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Durante a gestação de roedores é observado, na região mesometria! de cada sítio de desenvolvimento embrionário, um acúmulo transitório de células linfocitárias da Hnhagem natural killer (NK). Estas células Natural Ki!ler de ambiente uterino (NK-u) apesar de expressarem antígenos de superfície semelhante as demais Nk, não desencadeiam a atividade cito!ítica como as Nk de sangue circulante. Este comportamento peculiar não foi ainda explicado o que vem dificultando a compreensão das possíveis participações destas células na imunoiogia da reprodução. A citoquímica de lectina OSA (Dofichos bíflorus aggfutin), tem sido utilizada para a marcação se!etiva das células NK-u de camundongos. Uma vez que esta lectina não reage com outros linfócitos, os glicoconjugados reativos a [ectina OBA, localizados na superfície das NK-u, poderiam ser moléculas especificas desta Hnhagem celular. Porém estes glicoconjugados não foram ainda isolados ou caracterizados. Neste trabalho, propôs-se a obtenção de anticorpos específicos para o reconhecimento de céiulas Nku de camundongos além de procurar identificar moléculas de expressão específica destas células. Para tanto as cé!ulas NK-u, isoladas de úteros de camundongos prenhes foram utilizadas como inócu!o antigênico em machos da mesma espécie. Apenas um dentre os seis camundongos imunizados produziu anticorpos que reagiram com as células NK_u, por meio de testes imunocitoquímícos. Do animal receptor que apresentou resposta imune, produzindo anticorpos reativos às células NK-u, foram obtidos os linfócitos espJênicos empregados na obtenção de hibridomas através da fusão com céluJas tumorais. Quatro hibridomas foram selecionados para a obtenção de líquido ascítico contendo anticorpos monoclonais. A especifiddade dos antícorpos obtidos foi avaliada por métodos imunocitoquímicos e imunoquímicos (westem b/otting). Entre os quatro clones selecionados (2C6.289, 2C6.2E4 2C4.1C10 e 2C4.5A10), dois apresentaram marcação tanto na superfície quanto no conteúdo citoplasmátíco das NK-u (2C4.1C10. 2C4.5A10), enquanto os outros dois marcaram apenas o conteúdo citoplasmático (2C6.2S9, 2C6.2E4). Pelos testes imunoquímícos realizados, os antícorpos produzidos pelos dones 2C4.1C10 e 2C4.5A 10 identificaram bandas de 52,0 KDa e 53,8 KOa e os anticorpos dos dones 2C6.289 e 2C6.2E4 identificaram uma banda de 41,4 KDa, que apresentam correspondência com bandas positivas à lectina DBA. o fato da imunização intraespécíe, com o uso de células NK-u inteiras ter resultado na produção de anticorpos contra estas células, toma-se a primeira evidência direta de que as células NK-u fazem parte de uma linhagem específica da gestação, as quais expressam moléculas exclusivas, reconhecidas como "non-self' pelos machos da mesma espécie. Dentre os c!ones de hibridomas produtores de anticorpos monoclonais aqueles que reconhecem estruturas de superfície das células NK-u podem ser utilizados como potenciais marca dores dessas células em camundongos, uma vez que reconhecem giicoconjugados também reativos à Jectina DBA, que seriam expressos exclusivamente por estas células / Abstract: During the pregnancy in the rodents a transient accumulation of natural killer (NK) cells 1s seen In the uterus. These cells found in the uterine environment express the surface antigen common to drculating NK (cNK) cells, but they do not show some cytokine receptors and do not trigger the cytoJytíc activity during normal pregnancy. Such a peculiar behavior of uNK ceH has not beeo fuUy explained aod their role io the immunoiogy of reproduction 1s stH! unc!ear. It has been reported the use of OBA (Dofichos bifJorus) lectin cytochernistry for selective staining of mouse uNK cel!. Since thís lectin does not react with othar !ymphocytes, the g!ycoconjugates reactive to OBA iectin localized on uNK cel! surface could be specific mo!ecules of such a cal! lineage. However, the glycoconjugates reactive to OBA lectin have no! been isolated ar characterized yet. The present work was proposed to obtain antibodies specific agaínst mouse uNK cel! and iooking identify mo!ecules of specific expression for. In this aim, the whole uNK ce!ls isolated from pregnant mice uterus were used as antigen and male mice of sarne strain, as host. From the animal producing antibodies against mouse uNK cell were collected the spleen and further processed to isolate the Iymphoeytes dones producing the monoclonal antibody (mAb) and the hybridomas of four clones were producad the ascites. The specificities of antibodies were evaluated by immunocytochemistry and immunoblotting. Only one among six immunized miee produced antibody against mouse uNK eells evaluated by immunocytochemistry. Four dones showing two different JabeJing pattern by immunocytochemistry were chosen to obtain ascites. The two (2C6.2B9, 2C6.2E4) clones producing mAS against uNK ceU cytop!asm eontents showed one positive band (41,4 KDa) in the westem blot matched to the DBA lectin positive bands. The other two ciones (2C4.1C10 e 2C4.5A 10) producJng mAb reacting on ceil surface and cytoplasm contents showed two positive bands (52,0 KDa and 53,8 KDa) corresponding to OBA lectin positive bands. Therefore, the antibody production against uNK cells afier intra-specie inoculation is the first direct evidence showíng uNK cells as being a cel! !ineage specific of pregnancy, which express specific molecules recognízed as non-self by male of the sarne strains. Among the mAb obtained, those reactive to antigen localized on call surface could be used as specific ceH marker of uNK once recognize the same glycoconjugates reactive to DBA lectin tha! seems to be expressed only by this cell / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Julia Prado Franceschi, Stephen Hyslo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-23T06:36:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_MauraAntoniada_M.pdf: 1221291 bytes, checksum: 0f6f3631d0431cb70417e37cbdc6bc88 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: O objetivo deste estudo foi verificar a distribuição de proteínas imunológicamente semelhantes à crotoxina venenos botrópicos, e isolar e caracterizar, a partir do veneno de Bothrops jararacussu, a(s) proteína(s) com esta imunoreatividade. Utilizando um anticorpo anti¬crotoxina, verificamos através dos métodos de ELISA e "immunoblotting" que, de modo geral, os venenos botrópicos possuem um baixo conteúdo de proteínas imunológicamente relacionadas à crotoxina. O teste ELISA foi dez vezes mais sensível que o immunoblotting para demonstrar a relação imunológica destes veneno. Através de cromatografia por imunoafinidade, purificamos uma proteína do veneno de B. jararacussu que foi reconhecida pelo anticorpo anti-crotoxina. A eletroforese na presença de SDS mostrou que essa proteína possue uma massa molecular em tomo de 100 kDa e que, na presença de p-mercaptoetanol esse peso cai para a faixa de 30 kDa (região da crotoxina), sugerindo que a proteína normalmente ocorre em forma multimérica. A proteína purificada não possui atividade fosfolipásica, não causa bloqueio neuromuscular na preparação biventer-cervicis de pintainho e não corresponde à bothropstoxina I (BthTx) ou à lectina presentes neste mesmo veneno, uma vez que estas duas proteínas não reagiram com o anticorpo anti-crotoxina / Abstract: This thesis examines the distribution in Bothrops venoms of proteins immunologieally related to erotoxin and deseribes the purifieation and partia! eharaeterizatin of one sueh protein ftom the venom of Bothrops jararacussu. An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and immunoblotting showed that Bothrops venoms generally possess few proteins that interaet with anti-erotoxin antibodies. The ELISA was generally more useful than immunoblotting for investigating these relationships beeause of its greater sensitivity. Immunoaflinity ehromatography of B. jararacussu venom on Sepharose 4B eoupled to anti-erotoxin antibodies yielded a protein with a of 100,000 by SDS-PAGE. Sinee in the presence of mercaptoetanol this MW decreased to 30 kDa (approx. MW of crotoxin), it seems likely that the protein normally exists in a multimeric formo The purified protein had no phospholipase aetivity nor did it produce neuromuscular blockade in the chick biventer cervicis preparation. This protein does not correspond to either bothropstoxin I or to a lectin isolated ftom this same venom sinee neither of the latter reacted with the anti-crotoxin antibody in the ELISA / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências Médicas

GONDIM, D. R. Quitosana/Alginato epoxilado com corantes imobilizados como potencial fase estacionária para purificação de IgG do soro humano. 2012. 100 f. Dissertação (Mestrado em Engenharia Química) - Centro de Tecnologia, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by Marlene Sousa (mmarlene@ufc.br) on 2013-06-12T17:31:11Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_drgondim.pdf: 1175183 bytes, checksum: 1278c231c2ae3ebf81390678403ecbb4 (MD5) / Approved for entry into archive by Marlene Sousa(mmarlene@ufc.br) on 2013-06-13T17:28:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_drgondim.pdf: 1175183 bytes, checksum: 1278c231c2ae3ebf81390678403ecbb4 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-13T17:28:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_drgondim.pdf: 1175183 bytes, checksum: 1278c231c2ae3ebf81390678403ecbb4 (MD5) Previous issue date: 2012-07-27 / As imunoglobulinas são proteínas do soro humano que despertam maior interesse em sua utilização devido às inúmeras funções diagnósticas e terapêuticas. Pesquisas nessa área contemplam assuntos de âmbito técnico científico, beneficiando setores carentes no nosso país no quesito da saúde humana. Nesse contexto, o presente trabalho teve por finalidade avaliar o potencial da matriz quitosana/alginato epoxilado (QAE) com corantes reativos imobilizados, na purificação de IgG humana utilizando a técnica por cromatografia de afinidade. Os corantes Cibacron Blue F3GA, Reativo Verde 5 (Procion HE-4G) e o Reativo Azul 4 (Procion Blue MX-R) foram imobilizados nas partículas de quitosana/alginato epoxilada e não foi observado desprendimentos desses corantes nos ensaios cromatográficos. A matriz de QAE com e sem corantes imobilizados foram caracterizados por Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR) visando verificar os grupos específicos dos corantes na superfície da matriz. Foi investigado a influência do tipo de tampão e pH na adsorção de IgG de alta pureza. Os materiais apresentaram elevada capacidade de adsorção para diferentes sistemas tamponantes: MOPS (ácido morfolinopropanosulfônico), HEPES (ácido N-2-hidroxietilpiperazino-N’-2-etanosulfônico), MES (4 – ácido morfolinoetanosulfônico) e FS (Fosfato de Sódio). As isotermas de adsorção foram obtidas em sistemas em batelada e os dados experimentais foram bem correlacionados pelos modelos de Langmuir e Langmuir-Freundlich. O adsorvente quitosana/alginato epoxilado com corante Reativo Azul 4 imobilizado apresentou quantidade máxima de adsorção de IgG superior a 180 mg/g, superando os outros materiais. Os três adsorventes apresentaram constantes de dissociação (KD e KDLF) entre 10-5 e 10-6 mol/L. Os ensaios cromatográficos foram realizados com IgG de alta pureza e soro humano diluído 10 vezes e realizaram-se balanços de massas, análises de eletroforeses e quantificação de proteínas totais pelo método de Bradford. Nos ensaios em leito fixo com soro humano necessitou-se de 15,0 mL de soro diluído para a saturação do leito e as amostras coletadas das frações cromatográficas indicaram a purificação de IgG do soro humano através da eletroforese. Entre os três ligantes pseudobiespecíficos (corantes) estudados no presente trabalho, o corante Cibacron Blue F3GA apresentou maior potencial para purificar IgG do soro humano em todos os três tampões analisados, devido a maior seletividade deste por IgG comparado aos demais corantes imobilizados. / As imunoglobulinas são proteínas do soro humano que despertam maior interesse em sua utilização devido às inúmeras funções diagnósticas e terapêuticas. Pesquisas nessa área contemplam assuntos de âmbito técnico científico, beneficiando setores carentes no nosso país no quesito da saúde humana. Nesse contexto, o presente trabalho teve por finalidade avaliar o potencial da matriz quitosana/alginato epoxilado (QAE) com corantes reativos imobilizados, na purificação de IgG humana utilizando a técnica por cromatografia de afinidade. Os corantes Cibacron Blue F3GA, Reativo Verde 5 (Procion HE-4G) e o Reativo Azul 4 (Procion Blue MX-R) foram imobilizados nas partículas de quitosana/alginato epoxilada e não foi observado desprendimentos desses corantes nos ensaios cromatográficos. A matriz de QAE com e sem corantes imobilizados foram caracterizados por Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR) visando verificar os grupos específicos dos corantes na superfície da matriz. Foi investigado a influência do tipo de tampão e pH na adsorção de IgG de alta pureza. Os materiais apresentaram elevada capacidade de adsorção para diferentes sistemas tamponantes: MOPS (ácido morfolinopropanosulfônico), HEPES (ácido N-2-hidroxietilpiperazino-N’-2-etanosulfônico), MES (4 – ácido morfolinoetanosulfônico) e FS (Fosfato de Sódio). As isotermas de adsorção foram obtidas em sistemas em batelada e os dados experimentais foram bem correlacionados pelos modelos de Langmuir e Langmuir-Freundlich. O adsorvente quitosana/alginato epoxilado com corante Reativo Azul 4 imobilizado apresentou quantidade máxima de adsorção de IgG superior a 180 mg/g, superando os outros materiais. Os três adsorventes apresentaram constantes de dissociação (KD e KDLF) entre 10-5 e 10-6 mol/L. Os ensaios cromatográficos foram realizados com IgG de alta pureza e soro humano diluído 10 vezes e realizaram-se balanços de massas, análises de eletroforeses e quantificação de proteínas totais pelo método de Bradford. Nos ensaios em leito fixo com soro humano necessitou-se de 15,0 mL de soro diluído para a saturação do leito e as amostras coletadas das frações cromatográficas indicaram a purificação de IgG do soro humano através da eletroforese. Entre os três ligantes pseudobiespecíficos (corantes) estudados no presente trabalho, o corante Cibacron Blue F3GA apresentou maior potencial para purificar IgG do soro humano em todos os três tampões analisados, devido a maior seletividade deste por IgG comparado aos demais corantes imobilizados.

Made available in DSpace on 2012-05-07T14:44:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000060.pdf: 4321176 bytes, checksum: 106896ad862afe35cefeb3bd6e718a49 (MD5) Previous issue date: 2008 / Esquistossomose mansônica e desnutrição são importantes problemas de saúde pública no Brasil e em outros países do mundo. Embora a má nutrição associada à esquistossomose venha sendo estudada, a literatura é escassa a respeito da resposta imune no hospedeiro desnutrido e infectado pelo Schistosoma mansoni. O objetivo do presente trabalho foi investigar o perfil da resposta imune humoral e a patologia hepática em camundongos C57BL/6 desnutridos e infectados pelo S. mansoni, comparando-os com camundongos eutróficos submetidos à mesma infecção. Foram estudadas, também, a morfologia hepática, a carga parasitária (parasitos e ovos) e a produção de tecido fibroso hepático. Os estudos histopatológicos e morfológicos revelaram granulomas pequenos e esparsos no parênquima hepático, com ausência de fibrose periportal no grupo desnutrido. Camundongos eutróficos apresentaram uma tendência a desenvolver granulomas maiores, como também desenvolver fibrose hepática periportal (40por cento). No grupo eutrófico, o peso médio do fígado foi maior, resultado este atribuído ao teor protéico do fígado desses animais, associado à inflamação granulomatosa provocada pela esquistossomose. A esplenomegalia foi relacionada à infecção. O grupo desnutrido apresentou menor quantidade de parasitos que o eutrófico. As curvas ponderais dos grupos desnutridos foram inferiores e estatisticamente significativas em comparação com os grupos eutróficos, guardando relação, sobretudo, com o tipo de dieta consumida. Quanto à produção de tecido fibroso no fígado, não foram encontradas diferenças significativas entre os grupos desnutrido e eutrófico. Os níveis das imunoglobulinas IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3 e IgE detectados no grupo desnutrido foram significativamente menores, quando comparados aos do grupo eutrófico, evidenciando os efeitos negativos da deficiência protéica crônica sobre a capacidade de formação de anticorpos pelo organismo do hospedeiro desnutrido

ALVES, Alexandre Rodrigues. Detecção de anticorpos séricos e salivares anti-antígeno glicofenólico de Mycobacterium leprae em residentes de localidades do município de Itaitinga, CE. 2014. 78 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-10-19T15:43:24Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_aralves.pdf: 1031569 bytes, checksum: 5df143350013f5c9988589f31e18c2e1 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-10-19T16:04:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_aralves.pdf: 1031569 bytes, checksum: 5df143350013f5c9988589f31e18c2e1 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-19T16:04:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_aralves.pdf: 1031569 bytes, checksum: 5df143350013f5c9988589f31e18c2e1 (MD5) Previous issue date: 2014 / The metropolitan area of Fortaleza is important leprosy transmission area according to the control strategy of the Ministry of Health's D isease in this area the municipality of Itaitinga has highlighted, because of its high incidence with characterization of hyperendemic municipality. The study conducted geore ferencing of cases reported in 2013 by the municipality with definition of three specific groups (01 - contacts, 02 - interviewed the high incidence region and 03 – interviewed the low incidence region) according to the incidence rates of the neighborhoods . Were also analyzed the levels of glicofeno lic anti - immunoglobulin antigen of Mycobacterium leprae serum (IgG and IgM) and salivary (IgA and IgM) of residents correlating them with forms of exposure to the disease by analyzing the residents of different r egions in the city of Itaitinga in which, had different numbers of new cases of leprosy between 2007 - 2013. The variables studied sexo, age, work, study, BCG immunization and symptoms did not showed significant correlation with contacts or cases of leprosy. Although contacts have risk odds of seropositivity in levels of serum IgM (prevalent risk = 3.22, p = 0,04) than respondents who did not have contacts, this relationship does not follow the other analyzed indices (serum IgG, IgM salivary and salivary IgA ). The evaluations carried of the information of georeferencing of the residents showed a negative trend in the relationship between serum IgM (r = - 0.1352) and serum IgG (r = - 0.1298) with distances of residents in relation to the index cases. Levels of salivary IgM antibodies (r = 0.0676) differ from the relation of serum levels and take positive trend, however salivary IgA levels (r = 0,00639) have continuous behavior without differentiation of immunoglobulin values. The study proposes the determinatio n of serum IgM of all risk - based contacts, according to the shorter distances (0 - 300 meters) found within of the regions. The dosage of immunoglobulins can assist in exposure assessment and follow - up contacts with high levels within the areas of higher inc idence of leprosy cases. This assessment needs to expand the studies by serology of the contacts and residents of areas at risk of leprosy by broaden the foundations as a support tool to be incorporated into routine on early diagnosis of leprosy / A sorologia entre contatos com risco de desenvolvimento da hanseníase pode atuar como importante ferramenta de apoio para implementar o diagnóstico precoce da doença. O referido estudo avalia os níveis séricos de imunoglobulinas anti-antígeno glicofenólico de Mycobacterium leprae (IgG e IgM) e salivares (IgA e IgM) dos residentes correlacionando-os com formas de exposição à doença através da análise dos residentes das diferentes áreas no município de Itaitinga nas quais apresentaram números diferentes de casos novos de hanseníase entre 2007 e 2013. Os casos notificados pelo município de Itaitinga foram identificados e georeferenciados com maior agrupamento nos bairros: Centro, Antônio Miguel e Parque Santo Antônio (PSA), o Índice de Moram Global de 0,31 (p -0,01) evidencia a aglomeração segundo áreas de maior densidade. A aplicação de questionário estruturado possibilitou identificar características dos entrevistados com a faixa etária entre 16 a 30 anos (34,10%) foi a mais frequente com média geral de 38 anos. O sexo feminino apresentou 73,41% dos entrevistados. Os domicílios apresentaram média de 05 cômodos; com 97,11% saneados e média de 4 pessoas por residência. No seguimento, os contatos apresentaram maior chance de apresentarem positividade nos índices de IgM sérica (risco prevalente = 3,22, p-0.04) do que entrevistados que não tiveram contatos, esta relação não é seguida pelos demais índices analisados (IgG sérica, IgM salivar e IgA salivar). Foram realizadas avaliações através das informações do georeferenciamento dos residentes que demonstraram tendência negativa da relação entre os valores de IgM sérica (r = - 0,1352) e IgG sérica (r = - 0,1298) com as distâncias das residências dos residentes em relação as residências dos casos índices. Os níveis de anticorpos IgM salivar (r = 0,0676) não seguem a mesma relação e tomam tendência positiva, no entanto os níveis de IgA salivar (r = 0,0,0639) apresenta comportamento continuo e diferenciado dos índices de imunoglobulinas. O estudo propõe dosagem da IgM sérica de todos contatos baseados nas riscos, segundo as menores distâncias (0 a 300 metros) encontradas dentro das regiões mapeadas. Nossos resultados indicam que: a dosagem de IgM sérica pode auxiliar na avaliação da exposição e acompanhamento dos contatos com elevados índices dentro das áreas de