Orientador : Benedito de Oliveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T17:59:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marques_MariaRisoletaFreire_M.pdf: 4054803 bytes, checksum: 9fa9e20cea77e9e9e07ab93477bdcd1d (MD5) Previous issue date: 1984 / Resumo: Urina de paciente da Faculdade de Ciências Médicas da UNICAMP, com quadro clínico de gamopatia monoclonal tipo mieloma múltiplo e apresentando proteinúria de Bence Jones caracte-rística, foi purificada através de diálise exaustiva seguida de cromatografia de troca iônica. Seu grau de pureza foi ava-liado através de imunodifusão em gel de agar, imunoeletrofore-se em agarose e eletroforese em gel de poliacrilamida na presença de SDS. Através de anti-soro específico a proteína de Bence Jones JJO foi tipada sorologicamente como pertencente ao tipo antigênico ?. A composição global de aminoácidos da proteína de Bence Jones JJO mostrou: a) a presença de cinco meias cistinas. b)presença de um resíduo de metionina. c) numero total de resíduo (excluindo triptofano) igual a 206, d) um padrão de re-síduos compatível com as proteínas de Bence Jones descritas. O pentapeptideo radioativo Plde seqüência de aminoácidos Pro-Thr-Glu-Cys-Ser, isolado de autoradiografia do di-gesto peptico-tríptico da proteína BJP (JJO) reduzida e alqui-lada, tipifica quimicamente JJO corno uma proteína do isotipo lambda. O isolamento e caracterização do peptídeo Tl de seqüência Thr-Val-Ala-Pro-Thr-Glu-Cys-Ser e que compreende a re-gião C-terminal da cadeia, confirma a tipificação química de BJP (JJO) como uma proteína ?. A evidência obtida de PAGE/SDS de que após redução, a proteína de Bence Jones JJO migra como uma única banda de mes-ma mobilidade de cadeias leves de imunoglobu1inas monoc1onais reduzidas, permite caracterizar seu arranjo como dimêrico. O isolamento e caracterização do tripeptídeo Ser-His--Arg, permite classificar a proteína JJO como Oz(-) em relação a expressão desta variante sorológica (Arg 190).O pentapeptideo denominado T5 (Gln-Ser-Asn-Asn-Lys), Onde está inserida a posição 171 correlacionada com a expressão da variante Mz, permite caracterizar parcialmente JJO como uma proteína Mz(-}.O peptídeo Ala-Ala-Pro-Ser-Val-Thr-Leu-Phe-Pro-Pro-Ser-_Ser-Glu-Glu-Leu-Glu-Ala-Ser-Lys, obtido de mapeamento diagonal, compreende a região delimitada pelos resíduos 111 a 129 do domínio C ?, onde estão localizadas duas das três posições características da variante Mcg. A presença de alanina na po-sição 112 e serina na posição 114 caracterizam parcialmente a proteína JJO como Mcg(-). O peptídeo Ala-Gly-Va1-Glu-Thr-Thr-Thr-Pro-Ser-Lys permite caracterizar a proteína de Bence Jones JJO como uma proteína Way{-), uma vez que alanina foi o resíduo presente na posi-ção 157. Treonina na posição 163 caracteriza a terceira posição envolvida na expressão da variante Mcg e conseqüentemente permite classificar JJO como uma cadeia leve Mcg(-). A sequência de aminoãcidos determinada para o peptídeo Ser-Tyr-Ser-Cys-G1n-Va1-Thr-His-G1u-Gly-Ser-Thr-Va1-Gly-Lys, permite caracterizá-lo como o peptídeo de região constante de cadeia leve do isotipo 1ambda que compreende os resíduos 191 a 205 e que contém um dos resíduos de cisteína da ponte disu1fe-to intradomínio C?. As informações conseguidas através da identificação das variantes não a1élicas de região C ? da proteína JJO poderiam sugerir dois arranjos possíveis dentro dos oito descritos (FETT & DEUTSCH, 1976): Oz(-) Kern(+) (Mcg(-) Weir(-) Ev(-} Way(-) Mz(-) ou Oz(-) Kern(-) Mcg(-) Weir(-) Ev(-) Way(-) (Mz(-). Estes dois arranjos poderiam corresponder à codificação das duas sequências Oz- Kern- é Oz- Kern+ dentre as quatro formas não a1é1icas da região C ? descritas (HIETER et a1., 1981).A presença de tirosina determinada como resíduo-N-termina1 através da técnica de dinitrofenilação, permite c1assificar a proteína BJP (JJO) como pertencente ao subgrupo V?III.. A composição de aminoácidos (Leu, G1y, Asp, Lys) obtida a partir de e1uição do material contido na mancha Tv2 bem como a determinação de 1eucina na posição N-terminal, poderia sugerir relação de homologia com o segmento 28 ? 31 da região de hipervariabi1idade CDR1 da proteína X (MILSTEIN, 1968) per-tencente ao subgrupo de região variável VÀIII (KABAT, 1979).O peptídeo Tv1 de composição Thr, Glx, Pro, G1y, Leu2 Val, Lys não foi localizado por homologia nas regiões CDR e FR de nenhum dos seis subgrupos de região variável descritos(KABAT, 1979), o que indicaria a possibilidade de se tratar de um pép-tideo de região determinante de complementariedade da proteína JJO. De imunização de coelhos com a proteína de Bence Jones JJO purificada, foi obtido anti-soro anti-cadeia ? humana. Este anti-soro não revelou proteínas do isotipo kappa, o que atesta sua especificidade / Abstract: Urine of a patient (J.J.O.) with osteolytic neoplasia characteristic of multiple myeloma was obtained from the School of Medicine. Universidade Estadual de Campinas. Through the qualitative heat test it was detected a Bence Jones proteinuria. Urine JJO was exhaustively dialyzed against deionized water and purified by anion exchange on chromatography. Bence Jones protein JJO was serologically typed as ? and its dimeric configuration shown by SDS polyacrylamide electrophoresis gel The amino acid composition of protein JJO showed: a) 5 moles of half-cystine/mole of protein (which is in agreement with the evidence of dimeric form); b) 1 mole of methionine/ mole of protein; c) total number of residues estimated in 206(not including tryptophane) and d) results similar to the data avaiable for other proteins of this type. Chemical typing was achieved by the isolation of the radioactive C-terminal Pro-Thr-Glu-*CMCys-Ser pentapeptide characteristic of ? type L chains; these data are in agreement with the serological typing. The tryptic Tl octapeptide (Thr-Val-Ala-Pro-Thr-Glu-Cys- Ser) corroborates the chemical typing of JJO as a ? Bence Jones protein. The tryptic T3 peptide (Ser-His-Arg), obtained from peptide mapping, supports the .characterization of JJO as a 190 Arg Oz{-) lambda chain. The iso1ation of the Gln-Ser-Asn-Asn-Lys pentapeptide from peptide mapping allows the partial characterization of JJO as far as position 171 is concerned. The assignement to the Mcg variant was accomplished by the isolation of the peptide Ala-A1a-Pío-S_r-Val-Thr-Leu-Phe- Pro-Pro-Ser-Ser-G1u-Glu-Leu-Glu-Ala-Ser-Lys,' which includes two of the three positions involved in the expression of this variant. The detection of Ala 112 and Ser 114 provides evidence of the partial characterization of JJO as an Mcg (-) L chain. The peptide Ala-Gly-Va1-G1u-Thr-Thr-Thr-Pro-Ser-Lys obtained from the neutral region of diagona1 mapping the presence of alanine tn position 157, allowing the showed classi-fication of JJO as a Way(-) variant. The parcial characteri-zation of BJP (JJO) as Mcg(-) was confirmed by the presence of threonine in position 163 in this peptide. One of the half-cystines involved in the C ? intradomain disulphide bridge was detected through the isolation of the tryptic T2 peptide (Ser-Tyr-Ser-Cys-Gln-Val-Thr-His-Glu-Gly-Ser-Thr-Val-Gly-Lys).Based on the information concerning the study of the C domain of the ? protein JJO and the eight types of C ? Domains proposed by FETT & DEUTSCH (l976), one of the following ar-rangements is suggested: Oz(-) Kern(+) Mcg(-) Weir(-) Ev(-) Way(-) Mz(-) or Oz(-) Kern{-) Mcg(-)Weir(-} Ev(-) Way(-) Mz(-) / Mestrado / Mestre em Biologia

Orientador: Lilian Maria de Castilho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T10:40:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ribeiro_KarinaAnteroRosa_M.pdf: 9556135 bytes, checksum: c5c2410984bcb33910ac159609eec0d7 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: O sistema Rh representa atualmente um dos sistemas de grupos sangüíneos de maior interesse devido a sua importância na clínica transfusional e na medicina materno-feta!. Os antígenos do sistema Rh são codificados por dois genes altamente homólogos, RHD que produz o antígeno D e o gene RHCE (alelos RH Ce, RH cE, RH ce e RH CE), que produz dois pares de antígenos antitéticos, C/c e Ele. Variantes que apresentam expressão parcial ou ausência total dos produtos do gene RHCE são relativamente freqüentes e suas bases moleculares têm sido motivo de diversas pesquisas, pois permitem correlacionar os genótipos com os fenótipos e esclarecer a perda de expressão de alguns antígenos Rh comuns, aumentando assim a segurança transfusional de pacientes politransfundidos e facilitando a seleção adequada de sangue a ser transfundido. Até o momento, poucos estudos moleculares das variantes deste gene foram realizados na população brasileira, o que tem dificultado a elaboração de protocolos de genotipagem seguros para aplicação na clínica transfusional e materno-feta!. Baseados nestas informações, nossos objetivos foram: estabelecer protocolos eficientes de genotipagem RHCE na população brasileira; calcular as freqüências gênicas (porcentagem de ocorrência) e as taxas de combinações alélicas dosalelos RHCE em nossa população e caracterizar molecularmente variantes do gene RHCE responsáveis por alterações na expressão dos antígenos Rh. Foram estudadas 358 amostras de sangue de doadores voluntários, 5 amostras de sangue de uma família portadora do fenótipo Rhnull e 2 amostras de sangue de indivíduos portadores da rara variante do gene Rhce denominada JAL. A genotipagem RH Cc foi realizada através de duas técnicas de PCR: uma técnica de PCR-RFLP, onde o índice de discrepância entre os resultados da fenotipagem e genotipagem foi de 26% e uma técnica de PCR-ASP, onde a discrepância entre os resultados da fenotipagem e genotipagem foi de 0,28%. A discrepância observada na técnica de PCR-ASP ocorreu em virtude da presença da variante híbrida RHD (D-CE-D) denominada r's, responsável pela fraca expressão do antígeno RH C em indivíduos de origem Africana. A genotipagem RH Ee foi realizada através de uma técnica de PCR-RFLP em todas as amostras de sangue dos doadores e apresentou apenas 1 discrepância (0,28%) em relação ao resultado da fenotipagem. A análise molecular desta amostra discrepante evidenciou a presença da mutação da mutação 48G>C no exon 1 e das mutações G667T e 733G no exon 5 do gene RHce, responsáveis pela diminuição da expressão do antígeno Rhe, caracterizando assim a discrepância observada. As freqüências do gene RHCE observadas em nosso estudo variaram entre as diferentes populações analisadas, sugerindo assim o processo de miscigenação ocorrido na nossa população. Os indivíduos portadores da rara variante JAL foram fenotipados como VS-V+ JAL+. O seqüênciamento direto dos 10 exons do gene RHCE em ambas as amostras identificou as mutações C733G (L245V) no exon 5 responsável pelo antígeno VS, e a mutação A1060C (N354A) no exon 7 que silencia o alelo VS, ambas em heterozigose. As amostras de sangue da família Rhnullforam fenotipadas, submetidas a análises de expressão dos antígenos Rh (citometria de fluxo), genotipadas, clonadas e seqüenciadas para os 10 exons do gene RHce. Os propósitos RhnUIaIpresentaram ausência na expressão dos antígenos Rh, o que caracterizou o fenótipo como Rhnull tipo amorfo. A genotipagem Rh revelou um gene RHD deletado e o genótipo RHce. O seqüênciamento do gene RHce identificou a deleção de um nucleotídeo entre os nucleotídeos 960 e 963 do exon 7, o que gerou um stop codon prematuro e a produção de uma proteína RHce truncada, responsável pelo fenótipo Rhnulldo tipo amorfo nestes indivíduos / Abstract: Rh is a highly complex red cell blood group system, consisting of 48 antigens. The RH locus is composed of two highly homologous genes, the RHD gene, which encodes for the D protein and the RHCE alleles have been characterized: ce, Ce, CE and cE. Six nucleotide (nt) substitutions within exons 1 and 2 have been reported to determine C/c polymorphism at caused by a single nt substitution (C/G), resulting in a Pro/Ala amino acid exchange at position 226. a plethora of RHCE variants have been identified at molecular level, although the requirements for expression of the RhCE antigens are not fully understood. There are few studies of the RHCE gene and these variants in the Brazilian population and little is known about them in such population. Based on this knowledge, the purpose of this study was to investigate the presence of the RHCE alleles and their frequencies, to establish protocols for RHCE genotyping andT to identify at molecular level RHCE variants responsible for weak expression of the RhCE antigens in the Brazilian population. Blood and DNA sample from 358 blood donors were tested for RH Cc by two different techniques (one multiplex PCR one PCR-RFLP) and for RH Ee for a PCR-RFLP technique... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Lilian Maria de Castilho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-07T12:16:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Melo_Laerciode_D.pdf: 15534575 bytes, checksum: 0d830bc1ab58a6f7460b5beacb32557c (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: O Programa de Controle de Qualidade Externo em Imunohematologia foi introduzido com o objetivo de avaliar a qualidade do diagnóstico em Imunohematologia. Foram realizadas 41 avaliações em 223 instituições no período de 1992 a 2003 que incluíram testes de proficiência para determinação ABO e RhD, fenotipagem Rh e K, teste direto da antiglobulina humana, pesquisa de anticorpos irregulares e identificação de anticorpos. No período de 12 anos o programa incluiu 8014 determinações de grupo sanguíneo ABO, 8000 classificações RhD, 5193 fenotipagens Rh, 5101 fenotipagens K, 7939 pesquisas de anticorpos irregulares, 4533 identificações de anticorpos e 7912 testes diretos da antiglobulina humana. Respostas incorretas foram classificadas como erros clericais, técnicos, ou não determinados. Ocorreu um número elevado de erros clericais na determinação do grupo sanguíneo ABO (76/76 erros), classificação RhD (34/58 erros) e na fenotipagem Rh (50/73 erros). Erros técnicos ocorreram predominantemente na determinação do antígeno D fraco (91/95 erros), na pesquisa de anticorpos irregulares (252/301 erros) e na identificação de anticorpos (321/335 erros) e estavam associados à sensibilidade das técnicas e dos reagentes utilizados. As avaliações teóricas, como incentivo à educação continuada, auxiliaram na diminuição dos erros, estimularam o treinamento dos participantes e o trabalho em equipe. A detecção dos erros foi importante para propor melhoria técnica com reavaliação dos protocolos bem como ações corretivas visando à melhoria da qualidade. A participação em um programa de controle de qualidade externo bem organizado mostrou ser fundamental na melhoria da qualidade dos testes em imunohematologia, reduzindo a freqüência dos erros e no potencial risco de reações hemolíticas garantido uma melhoria na qualidade das transfusões / Abstract: The Brazilian External Quality Assessment Program in Immunohematology (BEQAPI) was introduced with the objective of evaluating the quality of diagnosis in Immunohematology. From 1992 to 2003, proficiency tests for ABO grouping, Rh (D, C, c, E, e), K phenotyping, Direct Antiglobulin Testing (DAT), Antibody Screening (AS) and Antibody Identification (AI) were performed. Forty-one evaluations were carried out in 223 institutions. Over the period of 12 years, the program included 8,014 ABO typing, 8,000 RhD typing, 5,193 Rh (C, c, E, e), 5,101 K phenotyping, 7,939 AS, 4,533 AI and 7,912 DATs. Erroneous responses were classified as clerical, technical or undetermined. A substantial proportion of erroneous responses due to clerical errors occurred in ABO typing (76/76 errors), RhD typing (34/58 errors) and Rh phenotyping (50/73 errors). Technical errors occurred predominantly for weak D (91/95 errors), AS (252/301 errors) and AI (321/335 errors). Based on these results, since 1996, participants have received ¿Questions and Case Studies¿ as an incentive for training and education. The results of the present study show an improvement in the performance of participants in the course of the program. We found that a well-organized external proficiency program can contribute to the improvement of quality of testing in Immunohematology / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientadores : Sonia Maria Alves Bueno, Ricardo de Lima Zollner / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-31T16:28:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Duarte_IsaSantos_M.pdf: 2454250 bytes, checksum: 63f82b7377938718d529451b2667d48f (MD5) Previous issue date: 2001 / Mestrado

Orientador: Ricardo de Lima Zollner / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-20T10:52:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Garmes_HeraldoMendes_M.pdf: 1631848 bytes, checksum: fed0142ad21dd75d72806c3fbb118f74 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: A falência ovariana precoce é caracterizada por amenorréia hipergonadotrófica antes dos 40 anos de idade e pode apresentar diversas etiologjas. Trabalhos recentes caracterizaram subgrupos destas pacientes com inúmeras evidências sugerindo auto-imunidade como fator responsável. Com objetivos de detectar o anticorpo antiovário neste subgrupo, inúmeras técnicas têm sido utilizadas. Contudo, a prevalência deste anticorpo na população com falência ovariana precoce :oão está estabelecida. Neste trabalho realizaram-se a extração e a solubilização de antígenos a partir de tecido ovariano humano. Os extratos assim obtidos foram caracterizados eletroforeticamente e utilizados para a detecção do anticorpo antiovário através das técnicas de imunodifusão simples e immunoblotting. Utilizando imunodifusão simples foram detectados anticorpos séricos em 5 (14%) pacie!1tes. Por outro lado, empregando o método de immunoblotting, 14 (40%) pacientes apresentaram reatividade para peptídeo com peso molecular de 30kDa. Após classificar as pacientes em dois grupos dependentes da presença ou não de reatividade à banda de 30kDa, não foram verificadas diferenças estatísticas quando avaliada a idade da menarca, idade de início dos síntomas e nível de gonadotrofinas. Estudos posteriores, como a caracterização das propriedades biológicas destes anticorpos e isolamento da fração com peso molecular de 30kDa, poderão trazer importantes subsídios para o entendimento dos fatores imunes envolvidos com a falência ovariana precoce / Abstract: Premature Ovarian F ailure is characterized by hypergonadotrophic ammenorrhea before the age of forty (40) and can present diverse aetiologies. There is innumerable evidences suggesting that auto immUIrity is a factor which responsible for this disfunction. To detect this antibody, several techniques have been used, however the prevalence in the population of women who have premature ovarian failure. has not been established yet. Human ovarian tissue was used with the purpose to extract soluble antigens to be able to use them in the detection of serum antibodies by means of simple immuno-diffusion and immunoblotting methods. 5/35 (14%) patients presented reaction by immunodifusion and specific reactivity was found for a protein wi1!b molecular weight of 30 kDa in 14/35 (40%) patient~ using immunoblotting. Nevertheless, even classificating these patient in two groups depending on the presence or not, of reactivity for peptide of 30 kDa, no diference with the regard the age of menarc, the age of onset of synptoms and the leveI of gonadotrophins was found. Later studies such as the characterization of biological properties of these antibodies and isolation of peptide of 30 kDa, could bring important aid for the understanding of premature ovarian failure / Mestrado / Medicina Interna / Mestre em Medicina

Orientador: Paulo Maria Ferreira de Araujo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T12:19:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gomes_Laurecir_M.pdf: 3268440 bytes, checksum: d4b25825e8a31c5f2d0652db7afc3823 (MD5) Previous issue date: 1984 / Resumo: As imunoglobulinas humanas IgG e IgM séricas e IgA de colostro foram submetidas à ação da proteinase de padrões do extrato de epimastigotas (Araújo, 1979) foi purificada 56 vezes e contendo 1825 unidades/mg. As preparações de imunoglobulinas resultantes do tratamento enzimático em condições ótimas de pH (pH 7.0 e pH 3.1) e os controles adequados, foram analisados em eletroforese em gel de poliacrilamida com SDS (SDS 1% e DTT 100 mM), imunoeletroforese simples e bidimensional frente a imunessoros específicos. A degradação da molécula de IgG foi observada na eletroforese em gel de poliacrilamida, na comparação entre a preparação controle e a tratada com a enzima, onde a banda correspondente à cadeia pesada desaparece, havendo concentração de fragmentos de baixo peso molecular em nova banda de proteínas. A imunoeletroforese com os soros anti-IgG e anti-'delta¿, comprovam o comprometimento da molécula, pois desaparece a reatividade da cadeia pesada com o soro ant-'delta¿. Com as preparações de IgA, tratadas ou não com a enzima, não foi detectada fragmentação da molécula de imunoglobulina, nem nos testes de eletroforese em gel de poliacrilamida, nem nas reações de precipitação das imunoeletroforeses. Pouca ou nenhuma ação da proteinade sobre a IgA secretória ter ocorrido. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Humberto de Araujo Rangel / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-16T07:10:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sakurada_JuliaKeiko_D.pdf: 5244339 bytes, checksum: fd795ed6c959b2f398364f1e1b32ac92 (MD5) Previous issue date: 1979 / Resumo: As investigações foram levadas a efeito com o sentido de se verificar se seria possível utilizar o fenômeno da inibição da imuno hemólise por soro anti-IgG, como instrumento para o estudo da fixação de Cl aos imunecomplexos.. A ação de imunesoros de carneiro anti-IgG de coelho ou de imuneglobulinas isoladas sobre a lise específica de hemácias sensibilizadas com a fração IgG de soro de coelho anti-hemácia de carneiro (EA) ou sensibilizada com o complexo SAB.antiSAB (EGA) foi investigada. Os resultados obtidos mostram que: Os soros anti-IgG eram capazes de reforçar ou inibir a lise desses sistemas hemolíticos dependendo da dose utilizada, ao passo que uma imuneglobulina isolada desse soros por cromatografia em DE-celulose e caracteizada por imunoeletroforese como IgS, apresentava apenas a capacidade de inibir a lise desse sistema. As relações encontradas entre a quantidade de IgS anti-IgG (x) e o grau de lise (y) podem ser expressas pela equação de von KROG , de modo que se pode determinar a dose inibitória 50% (IH50). O valor de IH50 quarda relação direta com a quantidade de IgG de coelho presente na superfície da hemácia mas independe da especifidade de IgG indicando assim que o fenômeno da inibição da lise é uma conseqüência da interação especifica entre a IgG e a IgS anti-IgG...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador : Aldo Focesi Junior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-16T20:00:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Matsuura_MariaSumikoArita_D.pdf: 6744847 bytes, checksum: 3c2d9fa0d7b205566ea7f4e1622773db (MD5) Previous issue date: 1982 / Resumo: Certas propriedades antigênicas e estruturais de hemoglobinas de H.modestus e L.miliaris ,serpentes de "habitat" semi-aquático, foram estudadas a fim de correlacioná-las com suas propriedades funcionais. Antisoros contra hemoglobinas das duas espécies de serpentes foram obtidos em ratos. O soro anti-Hb de H.modestus mostrou similaridade antigênica entre as hemoglobinas das duas serpentes, quando testado por imunodifusão dupla. Entretanto no soro anti-Hb de L.miliaris somente reação cruzada foi possível de se constatar, sugerindo a existência de diferenças antigênicas entre as duas hemoglobinas. Os componentes das hemoglobinas de ambas as serpentes foram separados por coluna de isoeletrofocalização em gradiente de sacarose, utilizando-se anfólito com intervalo de pH entre 7,0 e 9,0. No hemolisado total da espécie H.modestus foram encontrados 3 componentes principais e no de L.miliaris , 5 componentes principais. Os componentes obtidos foram testados por imunodifusão dupla, utilizando antisoro homólogo. Os componentes da hemoglobina de H.modestus, mostraram ser antigenicamente indistintas entre si. Por outro lado, na hemoglobina da espécie L.miliaris, foi observada reação cruzada entre o componente III (o de maior concentração no hemolisado) e outros componentes. Os componentes I, II, IV e V, mostraram reação de identidade total. Para os estudos estruturais foram utilizados os componentes de hemoglobinas encontrados em maior concentração em ambas as serpentes...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Antigenic and structural properties of haemoglobins of H.modestus and L.miliaris, snakes of semi-aquatics habitat, were studied to stablish relationships to their functional properties. Antisera against haemoglobins of both snakes species were obtained in rats. The anti-Hb serum of H.modestus showed antigenic similarity between the haemoglobins of the two snakes, when tested by double immunodiffusion test. However, using antiserum to L. miliaris haemoglobin, only irnmunological reaction could be detected, suggesting the existence of antigenic difference between them. The haemoglobins components of both snakes were separated by isoelctrofucusing in sucrose gradient, using ampholine in a pH range of 7,0 to 9,0. In the H.modestus the total hemolysate was found 3 major components and in the L. miliaris 5. The components obtained were assayed by double immunodiffusion using hologous antisera. The components of the H.modestus haemoglobin seem to be antigenically indistinguisable among them. However, in the components of the L.miliaris haemoglobin, was observed antigenic cross-reaction among the component III (major component) and other components. The Components I, II, IV and V, presented identity reaction among them. For the structural studies were used the haemoglobins components found in major concentration in both two snakes. The amino acid composition of the globins of both snakes showed to be very closed, differing only in the lysine amount...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador : Paulo Maria Ferreira de Araujo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-19T01:19:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Azevedo_MariaTeresadeCarvalho_M.pdf: 7005827 bytes, checksum: 7dd48f7a234106492370e6c118e3845a (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: Neste trabalho foi investigada a influência de anticorpos "naturais" obtidos de camundongos BALB/c neonatos na resposta de camundongos BALB/c adultos para eritrócitos de carneiro (E.C.), com ênfase no estudo da ativação policlonal resultante e da produção de auto-anticorpos para os antígenos miosina, colágeno, laminina e TNP-BSA. Camundongos BALB/c adultos foram previamente inoculados por via endovenosa com duas doses do anticorpo monoclonal "natural" IgM 1.3.80 (HOLMBERG et alli, 1986) de 25 µg num intervalo de 2 dias. Após 2 dias, estes animais foram estimulados com E.C. Passados 5 dias, os baços foram retirados para determinação do número de células secretoras de imunoglobulinas por PFC-reverso, e o soro obtido para determinação do título de anticorpos específicos para E.C. e para os auto-antígenos. Os resultados demonstraram que o tratamento prévio dos camundongos com os anticorpos "naturais" e posterior imunização com E.C., reduziu o número de células produtoras de imunoglobulinas totais e aumentou o número de células produtoras de IgM. Entretanto, estas alterações no número de células secretoras de imunoglobulinas não alterou o título de anticorpos específicos para E.C. Quanto ao título de auto-anticorpos, houve um aumento para o antígeno colágeno em animais tratados com anticorpos "naturais" e estimulados com E.C. Estes resultados sugerem uma modulação na atividade imunológica por anticorpos "naturais" de neonatos. A ativação policlonal induzida por E.C. ocasionou alterações no título de auto-anticorpos, com aumento para os antígenos miosina e TNP-BSA / Abstract: Not informed. / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas

Resumo:A raiva é uma importante zoonose que acomete os mamíferos e tem os morcegos como reservatórios, tanto em áreas urbanas quanto rurais. Desde 1998 a região Noroeste do Estado de São Paulo tem registrado casos de raiva em morcegos, predominantemente em áreas urbanas. O objetivo deste trabalho foi investigar a circulação do vírus da raiva em morcegos da região noroeste do Estado de São Paulo por meio da pesquisa do vírus em diversas espécies e da pesquisa de anticorpos neutralizantes em morcegos hematófagos. Um total de 1490 amostras de cérebro de morcegos encaminhadas ao Laboratório de Raiva e de 125 amostras de soros obtidos de morcegos vampiros capturados de quatro abrigos da região foi avaliado durante o período de 2008 a 2012. O vírus da raiva foi detectado em 26 (1,97%) dos 1314 morcegos não-hematófagos, por meio da imunofluorescência direta (IFD) e inoculação intracerebral em camundongos (ICC) e em nenhum dos 176 morcegos vampiros examinados. Por outro lado, 7% (9/125) dos morcegos vampiros apresentaram título de anticorpos neutralizantes acima de 0,5UI/mL, 65% (81/125) tinham títulos baixos (0,10 a 0,5UI/mL) e 28% (35/125) foram negativos pela técnica de microneutralização simplificada (SFIMT) em células BHK21. O índice de positividade observado foi de 1,74% o que está acima do percentual médio de 1,3% registrado anteriormente nesta região. A alta percentagem de morcegos vampiros com anticorpos neutralizantes para o vírus da raiva indica uma exposição recente ao vírus o que confirma que, medidas de vigilância devem ser implementadas para evitar um aumento na ocorrência da doença / Abstract:Rabies is a major zoonosis which affects mammals from all over the world and has bats as reservoirs of, both urban and rural areas. Since 1998 cases of rabies in bats have been recorded in the northwest region of São Paulo State, predominantly in urban areas. The objective of this study was to investigate the circulation of rabies in bats in the northwestern region of São Paulo by searching of the virus in different species and the presence of rabies neutralizing antibodies in vampire bats. A total of 1,490 brain samples from bats were sent to the Laboratory of Rabies and 125 serum samples of vampire bats from four shelters in the region were examined from 2008 to 2012. The virus presence was determined by fluorescent antibodies test (FAT) and mouse inoculation test (MIT) while neutralizing antibodies were determined by the simplified microneutralization (SFIMT) in BHK21 cells. Rabies virus was detected in 26 (1.97%) out of 1,314 non-hematophagous bats and in none of the 176 vampire bats examined. Only 7% (9/125) of vampire bats had antibody titers above 0.5UI/ml, 65% (81/125) had low titers (0.10 to 0.5UI/ml) and 28% (35/125) were negative. The positivity rate observed was 1.74% which is above the average rate of 1.3% recorded previously in this region. The high percentage of vampire bats with neutralizing antibodies to rabies virus indicates a recent exposure to the virus which confirms that surveillance measures must be in place to avoid an increase in disease occurrence / Orientador:Luzia Helena Queiroz / Banca:Silvana Regina Favaretto Lazarini / Banca:Avelino Albas / Mestre