Orientador: Claudio Lucio Rossi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-22T01:18:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Partel_ClaudiaDambroski_M.pdf: 1594290 bytes, checksum: e86f411daa6a16b26e173461e10bb358 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A Doença de Chagas, infecção causada pelo parasita Trypanosoma cruzi, em pessoas imunocompetentes é, geralmente, assintomática ou se apresenta associada com manifestações clínicas leves e não específicas. Os pacientes com infecção crônica podem apresentar anormalidades cardíacas e/ou digestivas severas, mas estas manifestações clínicas são, usualmente, precedidas por muitos anos de infecção assintomática. Deste modo, a suspeita clínica da infecção, além de levar em consideração aspectos epidemiológicos, deve ser confirmada por dados laboratoriais. O diagnóstico da fase crônica da infecção chagásica é, geralmente, baseado na presença de níveis significativos de anticorpos específicos, desde que a detecção de parasitas circulantes é, frequentemente, dificil, em consequência dos baixos níveis de parasitemia. O presente estudo teve como objetivo o desenvolvimento de uma técnica imunoenzimática (ELISA) rápida e quantitativa para o imunodiagnóstico da Doença de Chagas. Considerando que o desempenho de uma técnica imunológica depende, em grande parte, da preparação antigênica utilizada, o extrato bruto de T.cruzi foi fracionado por cromatografias de afinidade (Sepharose 4B-Ientil-Iectina) e de troca iônica (DEAESephacel), na tentativa de se encontrar frações com alta atividade antigênica específica e baixa reatividade cruzada. Uma fração do parasita obtida por cromatografia em DEAESephacel foi selecionada com base na reatividade apresentada com soros de pacientes com Doença de Chagas e leishmaniose. A técnica ELISA foi padronizada utilizando um sistema comercial para reações imunoenzimáticas - "falcon assay screening test" (FAST -ELISA). Este sistema é constituído por placas apropriadas para todos os pàssos da reação, incluindo uma placa que possui uma tampa de plástico onde estão fixadas 96 esferas de poliestireno que se encaixam nos orificios de placas de microtitulação. Na realização do teste, a tampa com esferas revestidas com a preparação antigênica de T.cruzi foi transferi da., sucessivamente, após as lavagens necessárias, para as placas contendo as amostras de soros sendo testadas, o conjugado (anti-IgG humana marcada' com peroxidase) e o sistema substrato (tetrametilbenzidina/peróxido de hidrogênio). Nas incubações com os soros, conjugado e substrato (5 minutos cada, à temperatura ambiente) as placas foram colocadas sobre um aparelho com movimentos orbitais e agitadas continuamente. As absorbâncias das reações foram medidas a 630 nm na placa contendo o substrato. Em todos os ensaios, foram inclui dos soros padrões contendo concentrações conhecidas de anticorpos anti-T.crozi, em termos de unidades de atividade por ml (V/ml). Cada soro foi testado em triplicata e a absorbância média foi transformada em U/ml utilizando a curva padrão. Em um estudo comparativo, anticorpos IgG anti-T.crozi foram pesquisados com as técnicas de ELISA e IFI em 50 pacientes chagásicos crônicos, 58 pacientes com infecções heterólogas e em 20 pessoas sadias. A técnica ELISA apresentou sensibilidade de 98% e especificidade de 99%, enquanto que a sensibilidade e a especificidade obtidas com a reação de IFI foram, respectivamente, 92% e 96%. O bom desempenho, em termos de sensibilidade e especificidade, mais a simplicidade e rapidez, evidenciam que a técnica de ELISA, por nós desenvolvida, pode ser de grande utilidade para o imunodiagnóstico da Doença de Chagas / Abstract: Chagas' disease, an infection caused by the parasite Trypanosoma crnzi, is generally asymptomatic or is associated with mild, non-specific clinical manifestations in immunocompetent subjects. Severe cardiac and/or digestive system abnorrnalities may develop in chronically infected patients, but these clinical manifestations are usually preceded by many years of asymptomatic infection. For this reason, the clinical diagnosis should always be considered in an epidemiological context and confirrned by laboratory data. The diagnosis of chronic Chagas' disease is generally based on detecting specific antibodies, since the detection of circulating parasites is often difficult in view of the low levels of parasitemia. The purpose of this study was to develop a rapid and quantitative enzymelinked immunosorbent assay (ELISA) for the immunodiagnosis of Chagas' disease. Considering that the perforrnance of an immunological technique is highly dependent on the antigen used, a T.crnzi crude extract was fractionated by affinity chromatography (Sepharose 4B-lentil lectin) and ionic exchange chromatography (DEAE-Sephacel) in an attempt to identify fractions with both a high specific antigenic activity and a low cross reactivity. One fraction of the parasite extract obtained by chromatography on DEAE Sephacel was selected for further study based.on its reactivity with sera from patients with Chagas' disease and leishmaniasis. The ELISA procedure was standardized using the Falcon assay screening test (FAST-ELISA / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica

Orientadores : Ricardo Barini, Joyce Maria Annichino-Bizzacchi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-28T19:19:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_EgleCristinaCoutode_D.pdf: 200870 bytes, checksum: 7770263b762d34a64a28098de67ab0d7 (MD5) Previous issue date: 2001 / Doutorado

Orientador : Maria Marluce dos Santos Vilela / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-31T15:01:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Amoras_AnaLidiaBraga_M.pdf: 16753114 bytes, checksum: d704d73dbf02424f587fbb18b6726b51 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A Imunodeficiência Comum Variável (ICV) é uma sindrome incompletamente definida, caracterizada por defeito na formação de anticorpos. Devido ao fato da ICV apresentar ainda inúmeros pontos não esclarecidos, propusemo-nos analisar evolutivamente a apresentação clinico-laboratorial de 17 pacientes com diagnóstico de ICV, em seguimento no Ambulatório de Imunologia-Alergia e Pneumologia do Hospital de Clinicas da Universidade Estadual de Campinas(Unicamp). Os pacientes foram avaliados quanto à idade de início dos sintomas e à forma de apresentação clinica e imunológica. A função fagocitária de monócitos foi avaliada in vitro através da quimiotaxia, fagocitose mediada via Fc, CRI e CR3 e atividade do sistema NADPH oxidase. A concentração dos níveis séricos de IgM, IgG, IgA e subclasses de IgG foi determinada por nefelometria e as subpopulações linfocitárias e células NK por citometria de fluxo. Todos os pacientes apresentaram as primeiras manifestações clinicas antes dos quatro anos de idade, evoluíram com infecções de repetição e, em 8 pacientes havia associação de manifestações gastrointestinais e em 7 fenômenos autoimunes. Ao diagnóstico, a média da concentração de IgM, IgG e IgA foi 17 mg/dl, 365 rng/dl e 7,85 mg/dl, respectivamente. Observou-se nos pacientes com ICV, redução significativade todas as subclassesde IgG (IgGI, p=0,0001; IgG2, p=0,002; IgG3, p=0,006 e IgG4, p=0,0001), em relação ao grupo controle. A porcentagem de células NK foi significantemente reduzida (P=0,006) quando comparada aos indivíduos normais. A porcentagem de células-T CD3+(p=0,013)e CD8+ (P=0,004)foi significantemente aumentada e a relação CD4/CD8 (P=0,013) foi significantemente reduzida nos pacientes com ICV em relação ao grupo controle. Entretanto, a porcentagem de células-T CD4+ não demonstrou diferença entre os doisgrupos. Redução do número de' células-B circulantes com valores inferiores a 2% foi observado em 47% dos pacientes com ICV. A fagocitose mediada via Fc, CRI, CR3 (p=0,0001)de monócitos e quimiotaxia (p=0,0027)foram significantemente reduzidas nos pacientes com ICV em relação ao controle normal. Entretanto, não houve diferença na produção de ânion superóxido entre os dois grupos. Devido a heterogeneidade de apresentação clínica entre nossos pacientes e dos relatados na literatura sugere-se que a ICV possa ser a expressão fenotípica de várias doenças, e que defeitos na quimiotaxia e fagocitose de monócitos podem ser caracterizados em um grupo de pacientes, determinando uma nova direção na fisiopatologiada ICV / Abstract: Common variable immunodeticiency is an incompletely detined syndrome, characterized by a defect in antibody formation. Since CVI presents numerous, as yet unclarified, defects we proposed to analyze the evolution of the clínical-laboratorial presentations of 17 patients diagnosed with CVI from the Immunology-Allergy and Pneumology Clínic ofthe Hospital de Clínicas at the State University of Campinas, Brazil. The patients were evaluated according to their age at the initiation of symptoms and their clínical and immunological evolutional presentation. Blood monocyte phagocytic functions were evaluated in vitro by chemotaxis, phagocytosis mediated by Fc, CRI and CR3 and NADPH-oxidase activity. Concentrations of the serum levels of IgM, IgG, IgA and subclasses of IgG were determined by nephelometry and the lymphocyte subset and NK cells were evaluated by flow cytometry. All the patients presented initial clínical manifestations before four years of age, developing repeated infections and, in 8 patients, there was an association of gastrointestinal manifestations and 7 patients presented autoimmune phenomenons. At the time of diagnosis, the mean concentrations of IgM, IgG and IgA were 17.0 rng/dL, 365.0 mg/dL and 7.85 rng/dL, respectively. In CVI patients, significant reductions in all the subclasses of IgG (IgGI, p=0.0001;IgG2, p=0.002; IgG3, p=0.006 and IgG4, p=0.0001) were observed in relation to the control group. The elative number of NK cells was significantly reduced (p=0.006) whencompared with normal individuals. The percentage of CD3+ (p=0.013) and CD8+ T cells (p=0.004) were significant1yreduced in patients with CVI in relation to the control group. However a percentage of CD4+ T cells did not demonstrate any differences between the two groups. A reduction in the number of circulating B cells was also observed, with values lower than 2 % in 47 % of the patients with CVI. Phagocytosis measured via Fc, CRI, CR3 (p=0.0001) of monocytes and chemotaxis (p=0.0027) were significant1yreduced in the patients with CVI in relation to the normal controls. However, there was no difference in the superoxide production between the two groups. Due to the heterogeneity of the clinicalpresentations of our patients and those related by the literature, it may be suggested that CVI may be a phenotypic expression of various diseases and that the defects in the chemotaxis and phagocytosis of monocytes may be characterized in a group of patients, determining a new direction in the physiopathology of CVI / Mestrado / Pediatria / Mestre em Saude da Criança e do Adolescente

Orientador : Lilian Maria de Castilho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T06:37:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BaleottiJunior_Wilson_M.pdf: 6907784 bytes, checksum: 324eddb7fcb054026e1642e61315fd3e (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O sistema de grupo sanguíneo Diego é constituído por 21 antígenos localizados na glicoproteína banda 3 da membrana eritrocitária. Compreende 4 antígenos antitéticos Dia/Dib e Wra/Wrb e 17 antígenos de baixa incidência populacional. O fenótipo Dia resulta de uma mutação de ponto no nucleotídeo 2561 (T>C) que leva à substituição do aminoácid6 Prolina (Dib) para Leucina (Dia) na posição 854. O antígeno Dib é um antígeno de alta incidência na população geral, enquanto que o antígeno Dia é de baixa incidência em caucasianos, mas pode ser comum entre índios e japoneses. A mutação 166A>G no gene SLC4A1 (AE 1) que codifica a banda 3 dá origem a uma proteína variante, chamada banda 3-Memphis. Podem ser distinguidos dois tipos de banda 3 Memphis: variantes 1 e 11. A banda 3 Memphis II está associada a presença do antígeno Dia e apresenta maior afinidade de reação covalente com o H2DIDS do que a Memphis 1 e a banda 3 normal. De acordo com a literatura, o antígeno Dia está sempre associado a presença da banda 3-Memphis, caracterizando a variante Memphis 11. Entretanto, nenhum estudo de freqüência dos alelos DI A e 166G foi realizado até o momento. Com a finalidade de determinar a freqüência dos alelos DI A/DI B e da mutação 166A>G na população brasileira por métodos moleculares, estudamos 318 amostras de DNA de 4 diferentes populações (93 doadores voluntários de sangue, 71 descendentes de japoneses, 84 descendentes de africanos e 70 índios da tribo dos Parakanãs).Nossos resultados demonstraram que existe forte associação entre os alelos DI A e 166G e que o alelo DI A pode também ocorrer sem o alelo 166G. Em nosso trabalho foram identificadas 4 formas alélicas da associação DI / Memphis na população brasileira: alelo DI A 1 66A, DI A 1 66G, DI B166A e DI B166G . Os resultados da genotipagem 166A/G demonstraram que a banda 3-Memphis é um polimorfismo comum entre as populações estudadas. Devido a alta freqüência da mutação 166A>G encontrada, o alelo 166G pode ser considerado como um bom marcador genético de populações não miscigenadas e que o alelo 166G pode também ser considerado um protótipo do gene SLC4A1. Além disso, considerando a importância clínica dos antígenos Dia e Dib, a possibilidade em determinar os genótipos DI A/DI B, poderá contribuir substancialmente na segurança transfusional e materno-fetal / Abstract: The Diego blood group system consists of21 antigens located on band 3 of the red blood cell membrane. It includes the 4 antithetical antigens Dia / Dib and Wra / Wrb, and 17 low incidence antigens. The Dia phenotype results from a point mutation at nucleotide 2561 (T>C) leading to a single amino acid substitution from Leu (Dia) to Pro (Dib) in position 854. Dib is a high incidence antigen while Dia has low incidence among Caucasians but is particularly common among American Indians and Japanese. The Memphis variants of band 3 result from a point mutation 166 A>G in SLC4Al leading to an amino acid substitution (56 Lys>Glu). There appears to be a strong association of Memphis (56Glu) with Dia (854Leu) among Native Americans. The initial aim of this study was to determine the frequency of Diego (DI A/DI B) and Memphis (166A>G) mutations in the Brazilian population. We studied samples from 70 Amazonian Indians, 71 individuals of Japanese descent, 93 regular blood donors and 84 Sickle Cell Disease patients by PCR-RFLP. PCR assays were designed to amplify a sequence of 149 bp from exon 18 (DI A/DI B alleles), and of 84 bp from exon 3 SLC4Algene that determine band 3-Memphis. Al1eles were identified by digestion of amplified products with the restriction enzymes Msp I to discriminate DI A from DI B in exon 18, and Mnl I to identify band 3-Memphis in exon 3. Both the DI A allele and band 3-Memphis had high gene frequency among Amazonian Indians (0.571 and 0,543, respectively). Unexpectedly, four Amazonian Indians had the DI A allele without the band-3 Memphis mutation / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica

Orientadores: Marlene Tiduko Ueta, Lucia Helena Faccioli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T23:48:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Machado_EleuzaRodrigues_D.pdf: 6853225 bytes, checksum: 52539dc94b93b334f5d8fa00246c06b1 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Neste estudo mostramos que camundongos infectados com as linhagens L-2 ou L-49 de Strongyloides venezuelensis induzem aumento de leucócitos totais, eosinófilos (EO) e células mononucleares (MO) no sangue, na cavidade peritoneal (LCP) e espaço broncoalveolar (LBA) de formas semelhantes. Ambas linhagens estimularam síntese de citocinas do padrão TH1 ou TH2 da resposta imune, com maior tendência para TH2. L-2 foi mais infectante que L-49, induzindo precocemente maior síntese de IL-4, IL-5 e IFNy e anticorpos. Houve correlação positiva entre indução de maior síntese de IL-4 e de IgG e maior expulsão do parasita pela L-2. Não houve correlação entre indução de maior síntese de IL-5 e maior proliferação e recrutamento de EO e MO. O tempo e a temperatura de manutenção das culturas influenciaram na infectividade do parasita. Com menor tempo de permanência das larvas nas culturas estas induziram resposta imune inata mais intensa no sangue e no LCP, com eliminação mais rápida dos parasitas. Larvas obtidas a temperatura mais alta induziram eosinofilia mais intensa e precoce no LCP, e sob temperatura mais baixa, a eosinofilia foi menor e tardia. Larvas mantidas por menor tempo nas culturas estimularam resposta imune celular capaz de expulsar mais rapidamente as fêmeas parasitas, e as mantidas por maior tempo e sob temperaturas mais altas induziram maior síntese de anticorpos e de IL-4 e IL-10. Larvas mantidas por menor tempo nas culturas induziram maior síntese de IL-12, e as de maior tempo, maior produção de IFN-y. O tempo e/ou temperatura não influenciaram a síntese de IL-5. Observamos que leucotrienos participam do aumento de leucócitos totais, EO e MO no sangue, no LCP e LBA na estrongiloidíase. A IL-5 também participa no aumento de leucócitos nesses compartimentos. IL-12 e IFN-y protegem o parasita contra as defesas do hospedeiro. Verificamos que as oito linhagens de S. venezuelensis apresentaram antigenicidade semelhante, detectada por imunofluorescência indireta, ELISA e "Immunoblot". O anticorpo IgG anti-S. stercotalis reconheceu a fração antigênica de peso molecular aparente de 45 kDa. Assim, antígenos destas linhagens podem ser usados no imunodiagnóstico da estrongiloidíase humana. Palavras chave: Strongyloides venezue/ensis, estrongiloidíase, leuc6citos totais, eosinofilia, células mononucleares, citocinas, anticorpos, leucotrienos, imunodiagnóstico / Abstract: In this study, we have shown that, in mice, L-2 and L-49 strains of S. venezuelensis induced an increase in the total number of leukocytes, eosinophils (EO) and mononuclear cells in blood, peritoneal cavity (LCP) and in the bronchoalveolar space (LBA), in a similar manner. Both strains stimulated synthesis of TH1 or TH2 type immune response cytokines, with a greater tendency to TH2. L-2 strain was more infective than L-49, inducing earlier synthesis of IL-4, IL-5 and IFN-y, and antibodies. In L-2, there was a direct correlation between greater production of IL-4 and IgG and expulsion of parasites, but no correlation to greater synthesis of IL-5 or proliferation and recruitment of EO and MO. Time and temperature had influence on parasite infectivity. Larvae that remained in the cultures for shorter periods of time had their infectivity affected, inducing a more intense innate immune response in blood and LCP, with rapid elimination of the parasites. Parasites kept in higher temperatures rapidly induced higher eosinophil levels in LCP, while for low temperatures, eosinophils appeared later and in lower numbers. When larvae were cultured for shorter periods of time, they stimulated a cellular immune response capable of quickly expelling female parasites, while those submitted to shorter periods and high temperatures induced a higher synthesis of antibodies, IL-4 and IL-10. Larvae kept in culture for short periods induced greater synthesis of IL-12, while longer periods lead to greater IFN-y production. Neither time nor temperature affected IL-5 synthesis. It was observed that, in strongyloidiasis, leukotrienes participate on the increase of total leukocyte numbers, EO, and MO in blood, LCP and LBA. IL-5 is also involved in the increase of leukocyte numbers in these compartments. 80th IL-12 and IFN-y protect the parasite against host defense. It was also verified, through indirect immunofluorescence, ELISA, and Immunoblot, that eight strains of S. venezuelensis presented similar antigenicity. The antibody anti-S. stercoralis IgG was able to recognize the antigenic fraction with apparent molecular weight of 45 kDa. Therefore, antigens to these strains may be used for the immunodiagnosis of human strongyloidiasis. Key words: S. venezue/ensis, strongyloidiasis, leukocytes, eosinophils, mononuclear cells, cytokines, antibody, leukotrienes, immunodiagnosis, mice / Doutorado / Doutor em Parasitologia

Orientador: Paulo Cesar Giraldo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T18:46:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Goncalves_AnaKatherinedaSilveira_D.pdf: 214680 bytes, checksum: 43be4c0fef340004db04eeb304347fc6 (MD5) Previous issue date: 2003 / Doutorado

Orientador: Leonilda M. B. Santos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T16:22:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_ElaineConceicaode_M.pdf: 2798115 bytes, checksum: 61d79f078b53e3a9e431dfc5f57eba5b (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: A Encefalomielite Experimental Autoimune (EAE) é um modelo de doença auto imune mediada por células T e tem sido utilizado para o entendimento da Esclerose Múltipla humana. Os linfócitos CD4 Th1 têm sido implicados na patogenia da EAE. Citocinas como IL2, TNFa e IFNg foram detectadas no Sistema Nervoso Central durante a fase aguda da doença. A administração oral de Proteína Básica de Mielina (MBP) tem sido utilizada para reduzir a gravidade da EAE. O presente estudo teve por objetivo estudar como a administração oral de neuro-antígenos pode modificar a padrão das citocinas produzidas pelos linfócitos Th1 e Tb2. A EAE foi induzida em camundongos SJL/J pela administração de MBP/CFA. A tolerância oral foi conseguida com a administração de 5x 0,25mg de MBP, administrou-se anticorpo monoclonal anti-IL4, obtido de clones 11B11 e as demais citocinas foram quantificadas utilizando-se o método de ELISA de captura. Anticorpos anti-MBP e subclasses de IgG foram quantificados por ELISA. Observou-se que a administração oral de MBP levou a significativa diminuição da EAE e redução na produção de IFNg e IL2, enquanto os níveis de IL4 não modificaram. Com relação aos isotipos de IgG específicos para MBP foi observado redução da IgG total mas não do isotipo IgG1 e IgE. A administração "in vivo" do anticorpo monoclonal anti-IL4 reverte parcialmente a proteção obtida pela indução de tolerância oral a MBP. Estes dados mostram que a administração oral de MBP toleriza mais facilmente os clones de linfócitos Th1, clones estes envolvidos na patogenia da EAE / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Humberto de Araujo Rangel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:13:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_AlbetizaLobode_M.pdf: 2145081 bytes, checksum: f8411276f6b9c1ce6a2dd0cc5ed1728a (MD5) Previous issue date: 1978 / Resumo: O presente trabalho foi realizado com o objetivo de se verificar a influência da IgS anti-IgG de coelho na liberação de Cl do complexo EACl. Os resultados obtidos permitiram as seguintes conclusões: 1 - A adição de IgS-anticorpo à complexos EACl, contendo diferentes quantidades de unidades de Cl, sempre provocou a liberação de Cl, ao passo que a adição de IgS normal não produziu o mesmo efeito. 2 - o emprego de tampão com baixa força iônica não reduziu a quantidade de Cl liberada pela ação do anticorpo, sugerindo que a afinidade da IgS pela IgG é maior do que a afinidade de Cl pelo imune complexo. 3 - o conjunto de dados sugere que a inibição da imuno hemólise pela IgS deve-se provavelmente ao impedimento estérico do sítio de combinação / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Benedito de Oliveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T14:42:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cardillo_Fabiola_M.pdf: 5099827 bytes, checksum: 1fc2d746dba481cc9f5204af1bf2a688 (MD5) Previous issue date: 1989 / Resumo: Eritrocruorinas são proteínas - respiratórias responsáveis pelo transporte de oxigênio,- possuem peso molecular acima de 3x¿10 POT. 6¿ e estão presentes na hemolinfa de anelídeos. O espectro característico da eritrocruorina de Glossoscolex paulistus em ensaios de Equilíbrio com o Oxigênio mostra a oxieritrocruorina com um pico máximo de absorção a 419 nm, e sua forma deoxigenada com um pico máximo a 428 nm. Este comportamento é modificado pelo efeito de antisoro de coelhos específico, por IgG específica e por fragmento Fab específicos,- revelando urna alteração do espectro de absorção da eritrocruorina por um desvio para a esquerda das Curvas no ¿Plot de Hill". Este desvio demonstra uma afinidade aumentada da hemeproteína pelo oxigênio. Não foram observadas modificações do espectro da eritrocruorina sozinha ou na presença de soro de carneiro não imunizado. A concentração de proteínas dos diferentes soros foi ajustada, na intenção de se obter quantidade, similar de proteína. Por outro lado, urna diminuição na afinidade pelo oxigênio é observada quando são usadas grandes quantidades de proteínas totais do soro - talvez devido à interação não específica de proteínas outras que não IgG, existentes no soro total específico / Abstract: Erythrocruorins are respiratory proteins responsible for the oxygen transport, having molecular weight over 3x¿10 POT. 6¿, present in the haemolymph of annelids. The caracteristic spectrum of the erythrocruorin from Glossoxolex paulistus in a Oxygen Equilibrium assay shows the oxyerythrocruorin with a maximum absortion peak at 419 nm ant the deoxygenated form with a maximum at 428 nm. This behavior is modified by the effect of a whole specific antiserum raised in rabbits, by specific IgG antibodies and by specific Fab fragments, showing an alteration of the erythrocruorin spectrum by a deviation to the left of the Hill Plot Curves. This deviation denotes an increasing affinity to the oxygen of the hemeprotein. No differences in the spectrum of the erythrocruorin were detected with erythrocruorin alone, or in the presence of whole serum of a non-immunized sheep. Protein concentration of the different sera were adjusted, in order to have a similar amount of protein. On the other hand, a decreased affinity to the oxygen is observed when larger amounts of the whole serum protein are use - perhaps due to non-specific interaction of non IgG rnolecules of the whole specif antiserum / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Humberto de Araujo Rangel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T15:03:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Machado_BeatrizMariaRamalho_M.pdf: 2270065 bytes, checksum: 9e816c1979300a39588172068e81ed4b (MD5) Previous issue date: 1980 / Resumo: Este trabalho foi realizado com a finalidade de se obter anti-soros específicos para proteínas plasmáticas do macaco Cebus sp. e estudar as reações cruzadas entre estas proteínas e aquelas presentes no soro humano e soro de macaco rhesus. Os resultados obtidos forma que: a) O soro a-7S contém anticorpos dirigidos contra determinantes presentes na cadeia pesada da IgG tendo reagido cruzadamente com IgG humana e soro de macaco rhesus. b) O soro a-19S contém anticorpos dirigidos contra os determinantes da 'alfa¿ IND. 2¿-macroglobulina tendo reagido cruzadamente com esta proteína contida no soro humano e de macaco rhesus. Em vista desses resultados obtidos podemos concluir que: È possível utilizar as reações cruzadas entre imunoglobulinas humanas e de macaco Cebus no isolamento das outras classes de imunoglobulinas de macaco e na obtenção dos soros específicos contra esta imunoglobulinas / Abstract: Not informed. / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas