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Atividade de anticorpos especificos nas propriedades ligantes da hemoglobina extracelular de Glossoscolex paulistus (Oligochaeta, Glossoscolecidae)

Cardillo, Fabiola 14 July 2018 (has links)
Orientador: Benedito de Oliveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T14:42:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cardillo_Fabiola_M.pdf: 5099827 bytes, checksum: 1fc2d746dba481cc9f5204af1bf2a688 (MD5) Previous issue date: 1989 / Resumo: Eritrocruorinas são proteínas - respiratórias responsáveis pelo transporte de oxigênio,- possuem peso molecular acima de 3x¿10 POT. 6¿ e estão presentes na hemolinfa de anelídeos. O espectro característico da eritrocruorina de Glossoscolex paulistus em ensaios de Equilíbrio com o Oxigênio mostra a oxieritrocruorina com um pico máximo de absorção a 419 nm, e sua forma deoxigenada com um pico máximo a 428 nm. Este comportamento é modificado pelo efeito de antisoro de coelhos específico, por IgG específica e por fragmento Fab específicos,- revelando urna alteração do espectro de absorção da eritrocruorina por um desvio para a esquerda das Curvas no ¿Plot de Hill". Este desvio demonstra uma afinidade aumentada da hemeproteína pelo oxigênio. Não foram observadas modificações do espectro da eritrocruorina sozinha ou na presença de soro de carneiro não imunizado. A concentração de proteínas dos diferentes soros foi ajustada, na intenção de se obter quantidade, similar de proteína. Por outro lado, urna diminuição na afinidade pelo oxigênio é observada quando são usadas grandes quantidades de proteínas totais do soro - talvez devido à interação não específica de proteínas outras que não IgG, existentes no soro total específico / Abstract: Erythrocruorins are respiratory proteins responsible for the oxygen transport, having molecular weight over 3x¿10 POT. 6¿, present in the haemolymph of annelids. The caracteristic spectrum of the erythrocruorin from Glossoxolex paulistus in a Oxygen Equilibrium assay shows the oxyerythrocruorin with a maximum absortion peak at 419 nm ant the deoxygenated form with a maximum at 428 nm. This behavior is modified by the effect of a whole specific antiserum raised in rabbits, by specific IgG antibodies and by specific Fab fragments, showing an alteration of the erythrocruorin spectrum by a deviation to the left of the Hill Plot Curves. This deviation denotes an increasing affinity to the oxygen of the hemeprotein. No differences in the spectrum of the erythrocruorin were detected with erythrocruorin alone, or in the presence of whole serum of a non-immunized sheep. Protein concentration of the different sera were adjusted, in order to have a similar amount of protein. On the other hand, a decreased affinity to the oxygen is observed when larger amounts of the whole serum protein are use - perhaps due to non-specific interaction of non IgG rnolecules of the whole specif antiserum / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas
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Estrutura quaternaria da hemoglobina de Glossoscolex paulistus (oligochaeta - glossoscolecidae)

Rennebeck, Gabriela Maria 13 July 2018 (has links)
Orientador : Benedito Oliveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-13T23:00:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rennebeck_GabrielaMaria_M.pdf: 2753145 bytes, checksum: f7b8d06229201e90a6c07df471489016 (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: A hemoglobina extracelular de Glossoscolex paulistus (0ligochaeta - glossoscolecidae) apresenta peso molecular aproximado de 3.106 e é formada por cinco unidades principais de: 70kOa, 50kOa, "kDa, 28kOa e 12kDa. Estudos eletroforéticos em poliacrilamida (PAGE/SDS) evidenciaram ser a unidade 70kDa o tetrâmero formado por quatro cadeias polipeptídicas de 16kDa, a unidade 50kDa o trímero formado por três cadeias de 16kDa, as unidades 33 e 28kDa dímeros de cadeia única e a unidade 12kDa o monômero, a menor unidade encontrada nas hemoglobinas de invertebrados. A hemoglobina nativa (pH 7,4) apresenta afinidade pelo oxigênio (P50 = 6.6 torr) maior que a hemoglobina humana e menor do que a mioglobina. A hemoglobina dissociada em pH alcalino apresenta menor afinidade pelo oxigênio sendo necessário quantidade de O2 maiores para saturar 50% dos grupamentos heme. A ligação do oxigênio na hemoglobina dissociada é irreversível sendo necessário o tratamento com ditionito de sódio para que ocorresse a desoxigenação. Através da filtração da hemoglobina dissociada em gel de Sephadex G-200, foi possível isolar o monômero 12kDa. Esse monômero apresenta homologia com a mioglobina e sua afinidade pelo oxigênio é similar a mioglobina. Estudos imunoquímicos indicaram a identidade antigênica parcial entre o monômero 12kDa e o trímero 50kDa, sugerindo que possivelmente as cadeias polipeptídicas que formam o trímero são homólogas às cadeias monoméricas a nível de seqüência primária. Este resultado sugere que as unidades que formam o complexo final partilham de um gene ancestral comum e que por pressão evolutiva se agregaram a fim de optimizar o transporte do oxigênio. Um modelo localizando as unidades dentro do complexo total é sugerido indicando que as unidades funcionais se encontram no centro da molécula e são protegidas da oxidação pelos polipeptídeo estruturais que se encontram por toda a superfície da molécula / Mestrado / Genetica / Mestre em Ciências Biológicas
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Flutuação populacional do oligochaetaedafico Amynyhas spp. (Kinberg, 1867) emquatro ecossistemas, atraves de dois metodos de extração

Tanck, Benedito Carlos Borges 21 August 2012 (has links)
Resumo: Neste trabalho procurou-se avaliar a influência dos sistemas plantio direto e convencional e dos ecossistemas naturais mata nativa e campo nativo, na região dos campos gerais no Paraná, sobre a densidade populacional do Oligochaeta edá:icc Amynthas spp. (KINBERG, 1867). As áreas situam-se no 2° planalto paranaense entre as cidades de Ponta Grossa e Castro. O es~udo foi conduzido no período de fevereiro de 1993 a janeiro de 1994, sendo que as avaliações foram feitas mensalmente. Nos agroecossistemas foram desenvolvidas as cul turas de milho (P- 3069), triticale (Arapoti) e soja (EMBRAPA-4) simultaneamente, com aplicações de fertilizantes e agrotóxicos. Já nos ecossistemas naturais ocorrem vegetação carac~erística de estepes de gramíneas baixas para o campo nativo e de matas de galerias subtropícais para a mata nativa. Para a determinação da densidade e biomassa dos Oligochaeta, utilizou-se o método ativo, através do uso de substâncias químicas repelentes: formol 1% e permanganato de potássio 0,2 %. As amostragens foram realizadas usando-se um quadrado de madeira com área de 0,25 m2 , onde as soluções extratoras eram adicionadas independentes. Os organismos, após a coleta, foram conduzidos ao laboratório de Biologia do Solo do Departamento de fi totecnica e fí tossaní tarísmo do SCA/UFPR, para serem identificados, quantificados numericamente e pesados. A densidade e biomassa populacional do Oligochaeta Amynthas spp. foram mais acentuadas no agroecossistema plantio direto e no ecossistema natural mata nativa, enquanto que no agroecossistema plantio convencional foram baixas, devido provavelmente a movimentação mecânica do solo e baixo conteúdo de resíduos orgânicos. Já no ecossistema natural campo nativo não ocorreu presença do gênero estudado, devido as características peculiares que envolvem a área. Em relação aos extratores, o formol 1% mostrou-se com melhor rendimento no sistema de plantio direto, enquanto que o permanganato de potássio 0,2% obteve resultados significativos relacionados com a biomassa no ecossistema mata nativa. A caracteri zação física e química do solo foi realizada a partir de coletas sazonais, para ser observado alterações. Para a análise estatística utilizou-se o programa SANEST, onde avaliou-se diferenças entre os ecossistemas plantio direto e mata nativa e os extratores, através da aplicação de ANOVA e Teste de TUKEY ao nível de 5% de probabilidade, enquanto que para os ecossistemas plantio convencional e campo nativo não foi possível realizar análise estatística, devido a inexistência de comparação entre os intervalos.
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Influencia do Oligochaeta edáfico Amynthas spp. e do Rhizobium tropici no feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.)

Kusdra, Jorge Ferreira 21 August 2012 (has links)
Resumo: O presente trabalho foi executado visando investigar a influência da inoculação do Oligochaeta edáfico Amynthas spp. ("minhoca louca") e Rhizobium tropici SEMIA 4077, sobre os parâmetros de matéria seca da parte aérea, da raiz, dos nódulos e da planta, número de nódulos e nitrogênio total da parte aérea do feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.) pertencente a variedade FT-Nobre. Para cumprir esse objetivo foram instalados três experimentos sendo os dois primeiros conduzidos em condições distintas de ambiente, fertilidade do solo e unidade experimental, sob a forma de um arranjo inteiramente casualizado, em esquema fatorial, com quatro repetições, considerando como um fator as minhocas, com quatro níveis e o outro fator o inoculante, com dois níveis em um experimento e três no outro. O terceiro experimento foi destinado a estimar as populações de rizóbios estabelecidas no solo utilizado nos experimentos anteriores. De um modo geral os resultados evidenciaram uma redução nos parâmetros avaliados devida a ambas as inoculações sendo, porém, os decréscimos significativos relacionados principalmente com a inoculação das minhocas. Concluiu-se que, nas condições experimentais estabelecidas, a presença das minhocas caracterizou-se em efeitos negativos as plantas e a inoculação das sementes com o rizóbio não foi capaz de promover acréscimos nos parâmetros avaliados.
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Estudo ecotoxicológico para valorização do resíduo produzido no processo de polimento de piso porcelanato na indústria cerâmica

Costa, Cristina Henning da 25 October 2012 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Ambiental, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T10:10:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 282052.pdf: 3348954 bytes, checksum: 2b943321ee85f635105ff0a5f038a28d (MD5) / Um dos problemas da indústria de cerâmicas é a quantidade de resíduo gerado, principalmente o resultante do processo de polimento de pisos de porcelanato. Este resíduo, constituído de água, argila, areia e compostos químicos presentes no piso, após o tratamento físico-químico, gera como subproduto uma massa úmida chamada de "torta ou lodo de polimento", que em geral é desidratado e encaminhado para um aterro industrial. Porém esta solução não é econômica e ambientalmente adequada. Uma alternativa para a valorização deste resíduo é a sua utilização em outra linha de produção, incorporando-o na fabricação de tijolos e blocos de concreto para a construção civil. Para tal objetivo, esta pesquisa realizou um estudo ecotoxicológico deste resíduo em diferentes situações, testando o lodo fresco (in natura), o lodo seco (coletado no pátio fabril) e ainda os tijolos fabricados com diferentes concentrações do resíduo (0%, 1%, 3% e 5%). Para a avaliação toxicológica, a amostra do resíduo e os corpos de prova (tijolos) foram submetidos ao teste de lixiviação de bancada. Após a obtenção do extrato lixiviado, este foi usado para a realização dos testes de toxicidade aguda e crônica com o microcrustáceo Daphnia magna, ensaios de comportamento e teste de letalidade com o oligoqueta Eisenia fetida (minhoca) e teste de germinação com sementes de rúcula (Eruca sativa L.). Os ensaios de toxicidade aguda com D. magna foram baseados na metodologia da NBR 12.713 (2003), onde o organismo-teste foi exposto por um período de 48 horas em diferentes concentrações da amostra. Os testes de toxicidade crônica foram realizados com amostras dos lixiviados de lodo fresco, lodo seco e dos tijolos com percentuais de 0 e 5% de incorporação do resíduo. Os ensaios de ecotoxicologia terrestre com E. fetida seguiram a metodologia descrita na NBR 15.537, em que os organismos jovens foram expostos ao lixiviado do resíduo. O ensaio de germinação com sementes de rúcula durou 7 dias, sendo as sementes expostas à concentrações do lixiviado do lodo fresco. Os resultados dos testes de toxicidade aguda mostraram que para D. magna, o resíduo não apresentou efeitos tóxicos agudo, ou seja, não foi observada a imobilidade dos organismos-teste nas concentrações testadas. Os resultados para os corpos de prova com diferentes percentagens do resíduo apresentaram muito pouca ou pouca toxicidade, estando dentro do limite estabelecido pela Portaria 017/2002 da FATMA. Já efeitos de toxicidade crônica para a longevidade, crescimento e reprodução de Daphnia magna foram observados nas amostras dos lixiviados do lodo fresco, lodo seco e dos tijolos. Em relação aos testes com o E. fetida, não foi observado efeito tóxico agudo sobre os organismos expostos. Os resultados obtidos com sementes de rúcula, também foram positivos, pois não houve efeito inibitório sobre a germinação das sementes expostas. Contudo as plântulas expostas a concentrações altas tiveram um crescimento menor que o controle com água destilada. Diante dos resultados obtidos, conclui-se que, tanto o lixiviado da "torta ou lodo de polimento", quanto o lixiviado do lodo seco, coletado no pátio do parque fabril, obtiveram bons resultados, ou seja, o resíduo apresentou toxicidade aguda nula ou baixa aos organismos testados neste trabalho, mostrando que o resíduo pode ser valorizado e reutilizado como matéria prima para produtos menos nobre e reduzir o impacto ambiental.

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