CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Clostridium difficile à um bacilo Gram positivo, anaerÃbio estrito, formador de esporos e produtor de toxinas. Atualmente, representa a principal causa de diarreia hospitalar associada ao uso de antibiÃticos. Pacientes oncolÃgicos sÃo um dos principais grupos de risco para infecÃÃo por C. difficile (CDI), visto que o uso de agentes quimioterÃpicos pode alterar a mucosa intestinal. AlÃm disso, estes pacientes normalmente sÃo imunodeprimidos e frequentemente utilizam antibiÃticos de largo espectro. Tendo em vista a patogenicidade do C. difficile e a importÃncia da doenÃa induzida por essa bactÃria em ambiente hospitalar este estudo visou determinar a incidÃncia e caracterizaÃÃo fenotÃpica e genotÃpica de cepas de C. difficile isoladas de pacientes oncolÃgicos internados do Hospital Haroldo JuaÃaba, Fortaleza, CearÃ. Durante o perÃodo de 12 meses (maio/2013 a maio/2014) foram coletadas 41 amostras de fezes diarreicas. Toxinas A e/ou B foram detectadas a partir das fezes por meio de um kit de detecÃÃo comercial ELISA. Em seguida, as amostras foram cultivadas em Agar Cicloserina, Cefoxitina, Frutose (CCFA) e incubadas em anaerobiose. As cepas isoladas foram processadas e realizadas identificaÃÃo fenotÃpica e anÃlise de detecÃÃo dos genes das toxinas e do fragmento do gene tpi (identificaÃÃo definitiva) por PCR convencional. A sensibilidade das cepas isoladas a 12 antimicrobianos foi determinada por meio de E-test. TambÃm foi realizado a genotipagem das cepas por meio da anÃlise molecular PFGE. 46,3% (19/41) das amostras foram positivas para presenÃa das toxinas A/B por ELISA e/ou cultura do C. difficile. Dessas amostras, foram isolados C. difficile de trÃs amostras (15,8% - 3/19). Em todos os isolados foram detectados os genes tpi, tcdA e tcdB. O domÃnio de ligaÃÃo da toxina binÃria (cdtB) nÃo foi detectado assim como tambÃm nÃo foram observadas deleÃÃes no gene tcdC nos isolados. Todas as cepas apresentaram o mesmo genÃtipo, NAP4. Com relaÃÃo à sensibilidade das cepas aos antimicrobianos foi verificado resistÃncia a dois ou mais antimicrobianos (azitromicina, tetraciclina, ciprofloxacina, levofloxacina, ceftriaxona e cefotaxima). 57,9% (11/19) faziam uso de antibiÃticos e quimioterÃpicos. Este trabalho descreveu a incidÃncia de CDI em pacientes oncolÃgicos, e evidenciou pela primeira vez a presenÃa de C.difficile em casos associados a comunidade (CA-CDI) nesses pacientes no Brasil, ressaltando a importÃncia do estudo dessa bactÃria para a compreensÃo da situaÃÃo epidemiolÃgica dessa infecÃÃo e de sua dispersÃo entre unidades hospitalares brasileiras. / Clostridium difficile is a strictly anaerobic, spore-forming, toxin-producing Gram positive bacillus. Currently, it is the main cause of nosocomial diarrhea associated with antibiotic use. Cancer patients are a major risk group for C. difficile infection (CDI), since the use of chemotherapeutic agents can alter the intestinal mucosa. Furthermore, these patients are often immunosuppressed and often use broad spectrum antibiotics. Considering the pathogenicity of C. difficile and the importance of this infection in hospitalized patients, this study aimed to determine the incidence and the phenotypical and genotypical characterization of strains of C. difficile isolated from cancer patients at Haroldo JuaÃaba Hospital, Fortaleza, CearÃ. During the 12 month period (May/2013 to May/2014) 41 diarrheic fecal samples were collected. Toxins A/B were detected from feces through a commercial ELISA detection kit. Then, the samples were cultivated on cefoxitine-cycloserine-frutose agar (CCFA) and incubated anaerobically. Isolates were submitted to several analyses, including phenotypical identification, detection of toxin genes and of a fragment of the tpi gene (definitive identification) by conventional PCR. The susceptibility of the strains to 12 antimicrobial agents was determined by E-test. Genotyping of the strains was also performed through molecular PFGE analysis. Out of 41 samples, 46.3% (19/41) were positive for either one or both of the performed tests: detection of toxin A/B and/or culture of C. difficile. C. difficile was recovered from three samples (15.8% - 3/19). The tpi, tcdA and tcdB genes were detected in all of the isolates. The binding domain of the binary toxin (cdtB) was not detected as well as no deletions were observed in the tcdC gene of the analysed isolates. All strains belonged to the same genotype, NAP4. Regarding the antimicrobial susceptibility of the strains, resistance to two or more antibiotics (azithromycin, tetracycline, ciprofloxacin, levofloxacin, ceftriaxone and cefotaxime) was observed. Out of the 19 positive patients, 57.9% (11/19) were using antibiotics and under chemotherapy. This paper describes the incidence of CDI in patients with cancer, and shows for the first time the detection of community-associated Clostridium difficile infection (CA-CDI) in those patients in Brazil, highlighting the importance of studying this bacterium for understanding the epidemiological situation of this infection and its spread among Brazilian hospitals.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:8851 |
| Date | 13 November 2014 |
| Creators | CecÃlia Leite Costa |
| Contributors | Cibele Barreto Mano de Carvalho, Gerly Anne de Castro Brito, Tereza de Jesus Pinheiro Gomes Bandeira, Regina Maria Cavalcanti Pilotto Domingues |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Microbiologia MÃdica, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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