O estudo da detecÃÃo de DNA do M. leprae em secreÃÃo nasal de indivÃduos e as metodologias de genotipagem do M. leprae tÃm complementado a epidemiologia da hansenÃase. Este estudo avaliou a positividade de DNA de M. leprae na secreÃÃo nasal (SN) de pacientes com hansenÃase e de indivÃduos sadios; e a variabilidade genÃtica entre cepas de M. leprae, estudando a relaÃÃo com fatores clÃnico-epidemiolÃgicos. Foram coletadas amostras de SN de 185 pacientes (grupo C), de 136 indivÃduos sem hansenÃase (grupo Co) que frequentavam o Centro de ReferÃncia Nacional em Dermatologia SanitÃria Dona LibÃnia em Fortaleza, Cearà e 121 alunos da Faculdade Christus em Fortaleza (grupo GE). Foram coletadas biÃpsias de pele (BP) de 38 indivÃduos do grupo C. Todas as amostras de SN foram submetidas à amplificaÃÃo da regiÃo RLEP por meio de PCR NESTED. Para avaliaÃÃo da diversidade genÃtica do M. leprae entre indivÃduos, foram analisadas cepas de SN de 48 pacientes positivos do sistema RLEP, utilizando os quatro loci de repetiÃÃes em tandem de nÃmero variÃvel (VNTRs): AC8b, AC9, AC8a e GT9. Para o estudo da variabilidade da cepa no mesmo indivÃduo foram comparadas amostras de BP e SN de 38 pacientes positivos do sistema RLEP, utilizando os quinze loci de VNTRs: AT17, GGT5, GTA9, AC8b, AC8a, AT15, AC9, 21-3, GAA21, TA18, 6-7, 27-5, TA10, 23-3, 12-5. Foram RLEP positivo 69,2% dos casos, 66,9% do grupo Co e 28,1% do grupo GE. O fato de o indivÃduo ser homem, pertencer à classe socioeconÃmica D/E e a cada ano de idade que envelhece, aumenta a chance em 6,266, 3,083 e 1,046, respectivamente, dele ser PCR positivo. Na anÃlise de distribuiÃÃo geogrÃfica dos indivÃduos RLEP positivos, o grupo Co foi o grupo de interseÃÃo entre os grupos C e GE e em relaÃÃo ao grupo C, os com baciloscopia positiva e RLEP positivo estiveram mais agrupados do que os com baciloscopia positiva e RLEP negativo. Os loci AC8b, AC9, AC8a e GTA9 apresentaram uma diversidade alÃlica considerada moderadamente discriminante. Houve a formaÃÃo de quatro grupos com cepas de genÃtipos idÃnticos. Os genÃtipos mais frequentes foram o AC8b: 8, AC9: 7, AC8a: 8, GTA9: 10 e o AC8b: 7, AC9: 8, AC8a: 9, GTA9: 9. As cepas de genÃtipos Ãnicos foram detectadas em pacientes com idade menor e em pacientes nos quais ocorreu maior tempo entre sintomas e diagnÃstico. Foi constatada a existÃncia de diferentes cepas circulando no MunicÃpio em estudo e diferenÃas de subpopulaÃÃes do bacilo entre as amostras de BP e SN de um mesmo indivÃduo.
  / The study of detection of M. leprae DNA in nasal secretions from patients and healthy subjects in addition to the methodologies for genotyping of M. leprae has complemented the leprosyâs epidemiology. This study evaluated the positivity of M. leprae DNA in nasal secretion (NS) of leprosy patients and healthy individuals; and genetic variability among strains of M. leprae, studying the relationship with clinical and epidemiological factors. NS samples were collected from 185 patients (group C), 136 individuals without leprosy (Co) attending the National Reference Center for Sanitary Dermatology Dona LibÃnia in Fortaleza, Cearà and 121 students from the Faculty Christus in Fortaleza (GE group). Skin biopsies (SB) were collected from 38 individuals in group C. All samples NS were subjected to DNA extraction and amplification of RLEP region by nested PCR. To assess the genetic diversity of M. leprae among individuals, 48 strains of SN positive patients RLEP system were analyzed using the four loci of variable number tandem repeats (VNTRs): AC8b, AC9, and AC8a GT9. To study the variability of the strain in the same individual were compared BP and SN samples of 38 positive patients RLEP system using the fifteen loci VNTRs: AT17, GGT5, GTA9, AC8b, AC8a, AT15, AC9, 21-3, GAA21, TA18, 6-7, 27-5, TA10, 23-3, 12-5. 69.2% of the cases, 66.9% of Co and 28.1% of group GE were positive RLEP. The fact that the individual is male, belonging to socioeconomic class D/E and every year-old age increases the chance in 6,266, 3,083 and 1,046, respectively, be it positive PCR. In the analysis of geographical distribution of individuals positive RLEP, the Co was the group of intersection between C and GE groups and the group C, the smear-positive and positive RLEP were more clustered than smear-positive and negative RLEP. The AC8b, AC9, and AC8a GTA9 loci showed allelic diversity considered moderately discriminating. There was a formation of four groups with strains of identical genotypes. The most common genotypes were AC8b: 8, AC9: 7, AC8a: 8, GTA9: 10 and AC8b: 7, AC9: 8, AC8a: 9, GTA9: 9. Strains of unique genotypes were detected in patients aged greater and in patients in whom there was more time between symptoms and diagnosis. The existence of different strains circulating in the city under study and different subpopulations of bacilli between BP and SN samples of the same individual was observed.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:9206 |
| Date | 26 November 2015 |
| Creators | Luana Nepomuceno Gondim Costa Lima |
| Contributors | LÃgia Regina Franco Sansigolo Kerr, Ronald Feitosa Pinheiro, Haroldo Josà de Matos, Bernard Carl Kendall |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em CiÃncias MÃdicas, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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