Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Neurocysticercosis (NC) caused by the Taenia solium metacestodes usually affects the central
nervous system and can be confused with other brain pathologies, which present similar
clinical and image findings. This parasitose is endemic in Brazil and the serological diagnosis
of NC is of great importance in routine clinical management of patients. The search for
alternative antigens for NC immunodiagnosis is importance because of the difficulty of
obtaining parasites from naturally infected pigs for the preparation of metacestodes T. solium
homologous antigen. Once that purified antigen is more sensitive and specific than crude
saline extracts, the objective of this study was to evaluate the performance of enzyme linked
immunosorbent assay (ELISA) and Immunoblotting (IB) for the serological diagnosis of
human NC, using the crude saline extract (Crude) obtained from T. saginata metacestodes and
two fractions of this extract, hydrophobic or detergent fraction (D) and hydrophilic or aqueous
fraction (A), purified by extraction with Triton X-114 as alternative purified antigens for the
diagnosis of human NC. Serum samples were obtained from 115 individuals: 40 patients with
a definitive diagnosis of NC, 45 patients with Taenia sp. and with other parasitic diseases and
30 apparently healthy individuals. The serum samples were diluted 1:200 for ELISA but only
the samples positives were diluted 1:100 and evaluated in IB. ELISA sensitivity and
specificity were 95% and 73.3% when using Crude, 95% and 82.6% for D phase and 65% and
61.3% for A phase, respectively. The diagnostic efficiency and Youden index were: 83.9%
and 0.74 (Crude), 88.5% and 0.80 (D phase) and 72.8 % and 0.46 (A phase), respectively. IB
of the antigens confirmed the results obtained by ELISA, and the D phase antigen proved to
be more specific than other extracts, showing only one immunodominant protein of 70-64
kDa that was the most frequent (92.5%) among patients with NC. Our results suggest that the
D phase obtained with Triton X-114 can be used as heterologous purified antigen for the
serological diagnosis of human NC in the IB. / A Neurocisticercose (NC), resultado do acometimento do sistema nervoso central pelas
formas metacestódeas de Taenia solium, é uma doença polimórfica podendo ser confundida
com outras síndromes neurológicas que apresentam achados clínicos e de imagem similares.
Uma vez que esta parasitose é endêmica no Brasil o diagnóstico sorológico é de grande
importância, pois auxilia na rotina laboratorial de pacientes com suspeita clínica. A busca por
antígenos alternativos se faz necessária diante da dificuldade de obtenção de suínos
naturalmente infectados com metacestódeos de T. solium, para a produção do antígeno
homólogo. Uma vez que antígenos purificados apresentam sensibilidade e especificidade
superiores aos extratos totais, o objetivo deste estudo foi avaliar os testes enzyme linked
immunosorbent assay (ELISA) e Immunoblotting (IB) no diagnóstico sorológico da NC
humana utilizando o extrato salino total (S) de metacestódeos de Taenia saginata e suas
frações purificadas com Triton X-114 (TX-114). Uma alíquota do extrato S foi fracionada
com TX-114, para obtenção das frações antigênicas: hidrofóbica ou detergente (D) e
hidrofílica ou aquosa (A). Os extratos antigênicos foram analisados em SDS-PAGE 12% e
utilizados no ELISA na concentração de 10μg/mL. Foram analisadas 115 amostras de soro:
40 de pacientes com diagnóstico definitivo de NC, 45 de pacientes com Taenia sp. e por
outros parasitos e 30 de indivíduos saudáveis. As amostras foram diluídas a 1:200 para o
ELISA, sendo apenas as positivas submetidas ao IB, na diluição de 1:100. A sensibilidade e
especificidade do ELISA foram: 95% e 73,3% (S), 95% e 82,6% (D) e 65% e 61,3% (A),
respectivamente. O cálculo de eficiência do diagnóstico e Youden Index foram: 83,9% e 0,74
(S); 88,5% e 0,80 (D) e 72,8 % e 0,46 (A), respectivamente. No IB a fração D apresentou com
exclusividade a banda imunodominante de 70-64 kDa, sendo detectada em 92,5% dos
pacientes com NC. A fração D foi significativamente mais eficiente que a fração A, tanto no
ELISA quanto no IB, sendo assim, recomendada como antígeno heterólogo purificado no
diagnóstico sorológico da NC humana no IB. / Mestre em Imunologia e Parasitologia Aplicadas
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/urn:repox.ist.utl.pt:RI_UFU:oai:repositorio.ufu.br:123456789/16749 |
| Date | 29 January 2008 |
| Creators | Gonçalves, Flávia de Assunção |
| Contributors | Costa-cruz, Julia Maria, Barbosa, Alverne Passos, Mendes, Júlio |
| Publisher | Universidade Federal de Uberlândia, Programa de Pós-graduação em Imunologia e Parasitologia Aplicadas, UFU, BR, Ciências Biológicas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFU, instname:Universidade Federal de Uberlândia, instacron:UFU |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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