La phosphatase PPEF1 (protein phosphatase with EF-hand domain 1) est impliquée dans plusieurs processus cellulaires chez les mammifères comme la réponse aux stress, la survie cellulaire et la prolifération. Cette protéine est présente de manière universelle chez les eucaryotes et elle est majoritairement exprimée dans le cerveau des tissus fœtaux et dans les testicules. Une expérience ayant pour but d’étudier le rôle de la calmoduline dans les mécanismes entourant l’activité des spermatozoïdes nous a permis de découvrir cette phosphatase. PPEF1 n’a jamais été caractérisée dans un contexte reproductif, et a été très peu étudiée de manière plus générale comparativement aux autres phosphatases. Cette étude vise à élucider le rôle de cette phosphatase dans les spermatozoïdes et à vérifier notre hypothèse selon laquelle elle pourrait être impliquée dans la motilité et la capacitation des spermatozoïdes. Les résultats obtenus démontrent la présence de cette protéine et de ses transcrits dans les testicules et les spermatozoïdes. PPEF1 est localisée aux membranes et palmitoylée ; la protéine est relocalisée dans les spermatozoïdes au cours de leur capacitation. L’immunoprécipitation de PPEF1 a permis d’identifier des interacteurs possibles, impliqués dans les processus biologiques de capacitation et de motilité des spermatozoïdes, de même que dans l’interaction avec l’ovocyte. L’immunoprécipitation de PPEF1, de même qu’une protéine recombinante, nous ont permis de déterminer que PPEF1 possède une activité phosphatase. Les résultats obtenus corroborent l’hypothèse de départ. Davantage d’études seront toutefois nécessaires pour déterminer les cibles de déphosphorylation et les interacteurs de PPEF1 dans les spermatozoïdes. Il s’agit d’une première étude sur la phosphatase PPEF1 dans un contexte reproductif. / PPEF1 phosphatase (protein phosphatase with EF-hand domain 1) is involved in several cellprocesses such as stress response, cell survival and proliferation. This protein is ubiquitously expressed in eukaryotes, mostly in brain fetal tissues and in testis. A study to unravel the role ofcalmodulin in sperm function led us to the discovery of this phosphatase in spermatozoa. PPEF1 hasnever been studied in a reproductive context and has been poorly described compared to other phosphatases. The purpose of this study is to understand the role of this phosphatase in spermatozoa .Our hypothesis is that PPEF1 is involved in sperm motility and capacitation. Results show the presence of this protein and its transcript variants in testis and sperm cells. PPEF1 localizes to sperm membranes and is palmitoylated; the protein is relocated in spermatozoa during capacitation. Immunoprecipitation of PPEF1 led to the identification of putative interactors that are involved inbiological processes of capacitation and motility of spermatozoa, as well as in sperm-oocyte interaction. This protein shows a phosphatase activity when immunoprecipitated; it is also the case of a PPEF1 recombinant protein. Our results corroborate the initial hypothesis. Other studies will benecessary to identify the proteins de phosphorylated by PPEF1 and to confirm its interactions withother proteins in spermatozoa. It is the first study on the phosphatase PPEF1 in a reproductive context.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LAVAL/oai:corpus.ulaval.ca:20.500.11794/69451 |
| Date | 07 July 2021 |
| Creators | Lavoie-Ouellet, Camille |
| Contributors | Leclerc, Pierre, Belleannée, Clémence |
| Source Sets | Université Laval |
| Language | French |
| Detected Language | French |
| Type | mémoire de maîtrise, COAR1_1::Texte::Thèse::Mémoire de maîtrise |
| Format | 1 ressource en ligne (ix, 117 pages), application/pdf |
| Rights | http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
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