- Introducció
Alzheimer's disease (AD) is a neurodegenerative disorder characterized by early synaptic and
late neuronal loss, affecting more than 26 million people worldwide.
Among patients affected with dementia, more than half suffer from Alzheimer’s disease. The
biggest risk factor for developing Alzheimer's disease is age. β-amyloid (Aβ) plaques and
neurofibrillary p-Tau tangles accumulates in the brains of elderly patients playing a central role
in the pathogenesis of AD. During the last years the fruit fly, Drosophila melanogaster has
increasingly been used as a model for neurodegenerative disease. Although the adult fly has a
simpler nervous system than those of vertebrates, it is capable of higher-order brain functions,
including aversive and appetitive learning, and recalling learned information from prior
experiences.
- Contingut de la investigació
This work has been focused on modeling Alzheimer's Disease in Drosophila by expressing two
human genes associated with AD (Aβ42 and Tau) in the fly central nervous system. This model
displays AD-like neuropathological as well as behavioral symptoms. The main goal of developing such a model is to analyse and study the effect of new synthetic fatty acids
molecules in the pathogenesis of AD. Additionally, the model organisms established in this
study could provide tools that help to understand disease-specific processes resulting in
neuronal loss. This study argues that Drosophila can be used to study the behavioural basis of
human neurodegenerative diseases and may provide a model to identify novel therapeutic
avenues for neurodegenerative diseases as Alzheimer’s disease.
In this work also was studied the effect of membrane lipid therapy on cognitive decline of a
transgenic model of Drosophila. This model overexpresses the human amyloid peptide of 42
amino acids (Aβ42), and human Tau protein that play a key role in the development of this
disease.
- Conclusió
The treatment has been based on the use of DHA and its hydroxylated derivate OHDHA, ARA
and its hydroxylated form OHARA and EPA and its hydroxylated form OHEPA at 1, 3, 10, 30,
100 and 250 μg/ml of standard food. After testing the transgenes expression in the F1
generation by PCR analysis and Western blot it was evaluated the toxicity of the compounds,
and it was demonstrated that food supplementation with OHDHA, OHARA, OHEPA partially
restored the loss of locomotor activity and increased the life-span of the flies expressing the
human transgenes whereas the DHA, ARA, EPA, form had not significant effects. It has been
observed that the concentrations of 30 and 100 μg/ml of hydroxylated form, including the
mixtures of (OHDHA+OHARA), (OHEPA+OHARA), and 30 μg/ml of TGMs, LP183A1,
LP183A2, was used, have led to cognitive improvement and have maintained or increased the
lifespan with respect to the control group.
In addition it was analyzed the lipid content from Drosophila heads by using gas
chromatography and it was found that the food supplementation with either hydroxylated or
non-hydroxylated compounds induced changes in the fatty acid profile of Drosophila.
Furthermore it was discovered that the amount of short chain fatty acids (SCFA), from the
heads of F1 treated with ARA, EPA and DHA was less than that from untreated F1 flies.
Concerning the hydroxylated fatty acids, the reduction in the levels of short chain fatty acid
(SCFA) was similar to that of the non-hydroxylated fatty acids. All food supplement tested
induced an increase of long chain fatty acids (≥ 18C). ARA, EPA and DHA were present in the
fatty acid profile of flies treated with the respective non-hydroxylated food supplements. This
fact proves the absorption and incorporation of dietary PUFAs into the Drosophila body tissues. / - Introducció
La enfermedad de Alzheimer (AD, del inglés Alzheimer's disease) es una patología
neurodegenerativa caracterizada por una pérdida temprana de conexiones sinápticas y, de
manera tardía, de neuronas. Esta enfermedad afecta a unos 40 millones de personas en todo
el mundo. Entre las personas con demencia, más de la mitad sufren AD. El mayor riesgo para
desarrollar la enfermedad de Alzheimer es la edad. De hecho, las placas β-amiloide (Aβ) y ovillos neurofibrilares de fosfo-Tau se acumulan en los cerebros de pacientes ancianos,
jugando un papel central en la patogénesis de AD. Además, se han encontrado reducciones
significativas en los niveles de los lípidos fosfatidiletanolamina y ácido docosahexaenoico
(DHA) en el cerebro de pacientes con AD. Durante la última década, la mosca de la fruta
(Drosophila melanogaster) se ha utilizado como modelo para enfermedades
neurodegenerativas, debido a que puede ser utilizada para el análisis de conductas como el
aprendizaje aversivo y apetitivo, así como su capacidad de utilizar la información aprendida de
previas experiencias, aunque la mosca adulta presenta un sistema nervioso mucho más
simple que el de vertebrados.
- Contingut de la investigació
La presente investigación se centra en la utilización de Drosophila como modelo de AD
mediante la sobreexpresión de los genes humanos asociados con AD (Aβ42 y Tau) en el
sistema nervioso central de la mosca. El principal objetivo de desarrollar este modelo es
analizar y estudiar el efecto de ácidos grasos sintéticos novedosos en la terapia de la AD.
Conjuntamente, los organismos modelo establecidos en este trabajo pueden constituir un
sistema que permita la comprensión de los procesos específicos de la enfermedad que
desencadena la pérdida neuronal. Con todo ello, el presente trabajo demuestra que se puede
usar Drosophila para estudiar las bases comportamentales de las enfermedades humanas
neurodegenerativas y puede suponer un modelo para identificar nuevas terapias para dichas
enfermedades, tales como AD.
Además, se ha estudiado el efecto de la terapia lipídica de membrana en el declive cognitivo
del modelo transgénico de AD de Drosophila.
- Conclusió
Los tratamientos empleados se basan en el uso de DHA y su derivado hidroxilado OHDHA,
ARA y su forma hidroxilada OHARA y EPA y su forma hidroxilada OHEPA, así como derivados
de triacilgliceroles (triacilglicerol miméticos, TGM) a dosis crecientes y añadidos en la comida.
Tras confirmar la expresión de los transgenes en la generación F1 de las moscas por PCR y
western blot, se analizó la toxicidad de los distintos compuestos y se demostró que la
suplementación de comida con OHDHA, OHARA, OHEPA restauró la pérdida de actividad
locomotora, parcialmente, además, aumentó la vida media de las moscas expresando los
transgenes humanos, mientras que DHA, ARA, EPA no presentaron efectos significativos. Se
observó que las concentraciones de 30 y 100 μg/ml de las formas hidroxiladas, incluyendo las
mezclas de (OHDHA+OHARA), (OHEPA+OHARA) y 30 μg/ml de TGMs, LP183A1, LP183A2,
mejoraron la capacidad cognitiva y aumentaron la vida media con respecto al grupo control no
tratado.
También se analizó el contenido lipídico en membranas de la cabeza de moscas mediante
cromatografía de gases y se observó que la suplementación de la comida, tanto con los
compuestos hidroxilados como los no-hidroxilados estudiados, indujo cambios en el perfil de
ácidos grasos de Drosophila melanogaster. Entre ellos, se observó una menor cantidad de ácidos grasos de cadena corta en cabezas de moscas F1 tratadas con ARA, EPA and DHA en
comparación con moscas no tratadas. En cuanto a los ácidos grasos hidroxilados, presentaron
un nivel similar en la reducción de los niveles de ácidos grasos de cadena corta. Además,
todos los suplementos añadidos a la comida indujeron un aumento de los ácidos grasos de
cadena larga (≥ 18C). Finalmente, se observó la presencia de ARA, EPA y DHA en el perfil de
ácidos grasos de las moscas tratadas con el correspondiente ácido graso no-hidroxilado. Este
hecho prueba la absorción e incorporación de los ácidos grasos poliinsaturados presentes en
la dieta en los tejidos de la Drosophila.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:TDX_UIB/oai:www.tdx.cat:10803/378038 |
| Date | 27 October 2015 |
| Creators | Mohaibes, Raheem J. |
| Contributors | Busquets, Xavier, Castro Ocón, José A., Escribá Ruiz, Pablo V., Universitat de les Illes Balears. Departament de Biologia |
| Publisher | Universitat de les Illes Balears |
| Source Sets | Universitat de les Illes Balears |
| Language | English |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis, info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
| Format | 165 p., application/pdf |
| Source | TDX (Tesis Doctorals en Xarxa) |
| Rights | ADVERTIMENT. L'accés als continguts d'aquesta tesi doctoral i la seva utilització ha de respectar els drets de la persona autora. Pot ser utilitzada per a consulta o estudi personal, així com en activitats o materials d'investigació i docència en els termes establerts a l'art. 32 del Text Refós de la Llei de Propietat Intel·lectual (RDL 1/1996). Per altres utilitzacions es requereix l'autorització prèvia i expressa de la persona autora. En qualsevol cas, en la utilització dels seus continguts caldrà indicar de forma clara el nom i cognoms de la persona autora i el títol de la tesi doctoral. No s'autoritza la seva reproducció o altres formes d'explotació efectuades amb finalitats de lucre ni la seva comunicació pública des d'un lloc aliè al servei TDX. Tampoc s'autoritza la presentació del seu contingut en una finestra o marc aliè a TDX (framing). Aquesta reserva de drets afecta tant als continguts de la tesi com als seus resums i índexs., info:eu-repo/semantics/openAccess |
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