Magister en Bioquímica área de
especialización en Toxicología / No autorizada por el autor para ser publicada a texto completo en el Portal de Tesis Electrónicas. / Un gran número de intoxicaciones agudas letales se producen en el país debido al
uso indebido de métodos químicos para el control de plagas. Sin embargo, no se
encuentran implementados protocolos confiables para establecer el diagnóstico de
intoxicaciones agudas producidas por agentes de control de plagas como los
fitosanitarios, que contribuyan a brindar información a los tribunales de justicia para
establecer la etiología tóxica. En respuesta a lo anteriormente descrito, en el presente
trabajo se implementaron protocolos analíticos para la investigación de productos
fitosanitarios en muestras biológicas postmortem. Se establecieron protocolos y se
implementaron metodologías analíticas para la determinación cualitativa o
cuantitativa de un grupo de pesticidas organofosforados (paration, metil paration y
diazinon) y del tipo carbamatos (carbaril, methomil y aldicarb) en muestras
ingresadas en el departamento de laboratorios del Instituto Médico Legal de Santiago
de Chile, y procedentes del departamento de Tanatología. Las metodologías
analíticas se basaron en un pre-tratamiento de las muestras de acuerdo a su
naturaleza, extracción en fase sólida (SPE) y análisis cromatográfico con detectores
de nitrógeno-fósforo (GC-NPD) y de espectrometría de masas (GC-MS). Estas
metodologías fueron validadas y favorablemente comparadas en su eficiencia con
respecto a aquellas existentes en el servicio.
Este nuevo pre-tratamiento, asociado ahora con SPE, permitió obtener muy
buenos resultados tras la aplicación de cromatografía en placa fina (TLC) con
derivatización post-cromatografica, para identificar pesticidas organofosforados en
contenido gástrico y carbamicos en sangre y contenido gástrico. Al mismo tiempo se
implementó un método analítico adecuado para la cuantificación de pesticidas
organofosforados en la matriz sangre (paration, metilparation y diazinon), mediante
la aplicación de SPE y GC-NPD. Se obtuvieron las curvas de calibración para determinar los pesticidas
organofosforados en la matriz sangre, en el intervalo de concentraciones
comprendido entre 0,1 y 4,0 mg/L, lográndose coeficientes de determinación
superiores a 0,99 para los tres pesticidas organofosforados. Los limites de detección
(LOD) y cuantificación (LOQ) obtenidos con esta metodología se encuentran entre
0,05-0,06 mg/L y 0,17-0,19 mg/L respectivamente. Estos valores son adecuados de
acuerdo a las concentraciones que se logran obtener en sangre luego de una
intoxicación aguda por pesticidas, según la experiencia forense mundial. La
recuperación de los pesticidas organofosforados desde las muestras de sangre fue
superior o igual al 95%, con valores de repetibilidad menores o iguales a 6,5%,
indicando un bajo grado de dispersión para el método. Al mismo tiempo se evaluó la
precisión intermedia obteniéndose valores inferiores o iguales a 6,9% (RSD), siendo
menores al máximo de 15% establecido como límite.
Los parámetros de calidad del método analítico desarrollado se enmarcan dentro
de los valores aceptados para una metodología destinada al análisis de muestras de
sangre del tipo post-mortem, avalados por literatura internacional.
La importancia del desarrollo e implementación de esta metodología de trabajo
para el Servicio Médico Legal tiene un alto impacto debido a que se trata de los
compuestos (pesticidas organofosforados y carbamicos) que estadísticamente se
presentan con mayor frecuencia en las causas de muerte por intoxicación aguda por
pesticidas (IAP). En consecuencia, esta metodología será una valiosa contribución al
informe tanatológico final que debe presentar el médico ante los tribunales de
justicia, cuando se encuentra frente a un caso por muerte por intoxicación por
pesticidas. / A great number of lethal acute intoxications take place in the country due to the
undue use of chemical methods for the control of plagues. However, reliable
protocols are not implemented to establish the diagnosis of acute intoxications taken
place by agents of control of plagues, as the phytosanitary, that contribute to offer
information to the tribunals of justice to establish the toxic etiology. In answer to
these facts, in this work were implemented analytical protocols for the investigation
of products phytosanitary in biological postmortem samples. It were established and
implemented analytical methodologies for the qualitative or quantitative detection of
a group of organophosphorus pesticides (parathion, parathion methyl and diazinon)
and carbamates (carbaril, methomil and aldicarb) in samples entered in the
department of laboratories of the Legal Medical Institute of Santiago from Chile, and
coming from the department of Tanatology. The analytical methodologies were
based on a pre-treatment of the samples according to their nature, solid phase
extraction and chromatographic analysis with nitrogen-phosphorus (GC-NPD) and
mass spectrometry detectors (GC_MS). These methodologies were validated and
favorably compared in their efficiency with regard to those existent ones in the
service.
This new sample treatment, associate now with SPE, allowed to obtain very good
results after the application of thin layer chromatography (TLC) with postchromatographic
derivatization, to identify organophosphorus pesticides in gastric
content and carbamates in blood and gastric content. At the same time a suitable
analytical method for the quantification of organophosphorus pesticides in blood
samples was implemented (parathion, metilparathion and diazinon), by means of the
application of SPE and GC-NPD. The calibration curves for determining the organophosphorus pesticides in blood
samples were obtained between 0.1 and 4.0 mg/L, with coefficients of determination
higher than 0.99 for the three organophosphorus pesticides. The limit of detection
(LOD) and quantification (LOQ) obtained with this methodology ranged 0.05-0.06
mg/L and 0.17-0.19 mg/L, respectively. These values are adequate taking into
account the concentrations reached in blood after an acute poisoning by pesticides,
according to world-wide forensic experience. The recovery of the organophosphorus
pesticides from the blood samples was higher or equal than 95% with values of
repeatability lower or equal than 6.5% indicating a low degree of dispersion for the
method. At the same time the intermediate precision showed values lower or equal
than 6.9% (RSD), being lower than the maximum of 15% establishes as the limit.
The quality parameters of the analytical method developed are within the ranges
of acceptance for a methodology aimed to the analysis of blood samples of the type
post-mortem examination, and are warranted by international literature.
The importance of the development and implementation of this methodology of
work for Legal Medical Service has a high impact because it is the compounds
(organophosphorus and carbamates pesticides) that statistically appear most
frequently in the death causes by acute poisoning by (IAP). As a consequence, this
methodology will be a valuable contribution to the report that it must present the
doctor before the justice courts, when as opposed to a case by death by poisoning by
pesticides.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/113428 |
| Date | 06 1900 |
| Creators | Allendes Pérez, Christian |
| Contributors | Fuentes Pérez, Edwar, Torres Sepúlveda, Eduardo, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | Tesis |
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