Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / Autorizada por el autor, pero con restricción para ser publicada a
texto completo hasta diciembre de 2015, en el Portal de Tesis Electrónicas. / La diferenciación de fibroblastos cardiacos (FC) a miofibroblastos cardiacos (MFC)
es gatillada por TGF-β1, la cual señaliza principalmente a través de las proteínas
Smad. Los MFC muestran como principal característica la presencia de
microfilamentos citoplásmicos de α-SMA, estructuradas como fibras de estrés, lo
que les permite la contracción. Por otro lado, LPS es un ligando del receptor TLR4,
que señaliza de manera dependiente e independiente de MyD88 teniendo como
principal efector el NF-κB, induciendo así la expresión de genes de citoquinas
proinflamatorias. Sin embargo, aunque se ha descrito un efecto antagónico entre
la señalización inducida por LPS y la señalización canónica de TGF- β, a la fecha
no se ha estudiado si en FC y en MFC la expresión de α-SMA inducida por TGF-β1
es antagonizada por LPS.
Para responder estas interrogantes se utilizaron FC y MFC de ratas adultas, y se
determinó in vitro la capacidad de LPS de inhibir la expresión de α-SMA. Además,
utilizando TAK- 242, un inhibidor de las vías intracelulares dependientes de TLR4,
se determinó que los efectos gatillados por LPS ocurrían a través de este receptor.
La utilización de los inhibidores PD98059, LY29002 y BAY 11-7082 permitió
determinar que en FC LPS a través de la vía de señalización PI3K/Akt, disminuye
la expresión de α-SMA. Por lo que nuestros resultados demuestran que LPS
inhibe la expresión de α-SMA en FC, a través del receptor TLR4 mediante la
activación de vía de señalización PI3K/Akt y que LPS es capaz de disminuir la
expresión de α-SMA en MFC a través de TLR4 inhibiendo la mantención del
fenotipo miofibroblasto / The difference between cardiac fibroblasts (CF) and cardiac myofibroblast (CMF)
is triggered by TGF-β1, which mainly signals via Smad proteins. The main
characteristic of CMF is cytoplasmic microfilaments of α-SMA; this are structured
as stress fibers, which allow the contraction of CMF. Also, LPS is a ligand of the
TLR4 receptor that signals via a dependant and independent pathway of MyD88
whose main factor is NF-κB; this induces the expression of inflammatory cytokine
genes. However, despite an opposite effect has been described between the
signaling induced by LPS and the canonical signaling of TGF-β, the opposite effect
that LPS may have on the expression of α-SMA on CF and CMF induced by
TGF-β1 has not been studied so far.
In order to answer these questions, CF and CMF of adult rats were used; this
showed in vitro evidence that LPS is capable of inhibiting the expression of α-SMA.
Also, with the use of TAK-242, which is an inhibitor of the dependant intracellular
domain of TLR4, we determined that the effects triggered by LPS occurred through
said receptor.
Using PD98059, LY29002 and BAY11-7082 inhibitors allowed us to determine
that, via the PI3K/Akt signaling pathway, LPS decreases the expression of α-SMA
in CF. Therefore, our results show that LPS inhibit the expression of α-SMA in CF
through the TLR4 receptor via the activation of the PI3K/Akt signaling pathway,
and that LPS is capable of decreasing the expression of α-SMA in CMF through
TLR4 receptor, which inhibits the maintenance of the myofibroblast phenotype
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/117231 |
| Date | January 2014 |
| Creators | Santana Sepúlveda, Roxana Carolina |
| Contributors | Díaz Araya, Guillermo, Ayala Jeria, Pedro Segundo, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas, Departamento de Química Farmacológica y Toxicológica |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | English |
| Type | Tesis |
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