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Efecto inmunomodulador de hemocianinas de moluscos combinadas con adyuvantes de vacuna en cáncer oral murino

Magíster en Bioquímica, área de
especialización Bioquímica de Proteínas Recombinantes y Biotecnología / Las hemocianinas de algunos moluscos son ampliamente usadas en
biomedicina, entre ellas, la de Megathura crenulata (KLH), de Concholepas
concholepas (CCH) y de Fissurella latimarginata (FLH), éstas dos últimas
producidas en Chile, debido a que son potentes inmunoestimulantes no
específicos. El factor común en su mecanismo de inmunoestimulación es que
polarizan la respuesta hacia una de tipo Th1, fundamental para combatir
tumores. Sin embargo, para potenciar su efecto en cánceres más agresivos
como el cáncer oral, se requieren adyuvantes adicionales.
Así, los objetivos de esta tesis fueron estudiar la respuesta inmune
específica, el efecto antitumoral en modelos murinos de cáncer oral y el efecto
in vitro de una formulación terapéutica, constituida por una hemocianina y un
adyuvante tipo Th1 (QS-21, AddaVax), planteando las siguientes hipótesis: 1.
Las hemocianinas de moluscos gastrópodos inducen una respuesta inmune
humoral y celular del tipo Th1 en la inmunoterapia del cáncer oral en un modelo
murino, que será potenciada al ser empleadas en conjunto con adyuvantes
Th1, mejorando así la respuesta terapéutica contra dicho cáncer. 2. Las
hemocianinas afectan la viabilidad de las células tumorales de cáncer oral.
Los principales resultados demostraron que: 1. La formulación FLH más
QS-21 presentó la mejor inmunogenicidad, reflejada en un mayor título de IgG
total anti-hemocianina, con predominio de anticuerpos IgG2a, y una respuesta
celular superior en un ensayo de hipersensibilidad retardada (DTH). 2. En los
modelos ortotópicos y heterotópicos de cáncer oral, la formulación FLH más
QS-21 brindó los resultados más prometedores, evaluados mediante una DTH
positiva, menor desarrollo de tumor y mayor sobrevida de los animales de
experimentación en comparación con el resto de los tratamientos y controles,
siendo el denominador común el requerimiento de una inmunización previa con
hemocianina antes del desafío con las células tumorales. 3. Las preparaciones
de hemocianina-adyuvante tuvieron efectos variables, pero no significativos
sobre la viabilidad de las líneas celulares de cáncer oral AT-84, AT-84 E7 Luc y
MOC7. 4. No se encontró reacción cruzada entre los anticuerpos antihemocianina
y antígenos de superficie presentes en la línea tumoral murina
MOC7.
Finalmente, es importante destacar que se trata del primer trabajo en que
se investiga el efecto de hemocianinas solas y combinadas con adyuvantes en
modelos de cáncer oral murino, por lo cual los resultados obtenidos sientan las
bases para profundizar en el estudio y la aplicación de las hemocianinas y
especialmente de FLH en la inmunoterapia del cáncer oral, tanto para la
prevención como para el tratamiento de este tipo de carcinoma en seres
humanos / The hemocyanins of some mollusks are used in biomedicine, including the
one of Megathura crenulata (KLH), of Concholepas concholepas (CCH) and of
Fissurella latimarginata (FLH), the last two produced in Chile, since they are
potent non-specific immunostimulants. The common factor in their
immunostimulatory mechanism is that induce a strong polarization toward Th1
immune response, fundamental for destroying tumors. Nevertheless, to
potentiate its effect in more aggressive cancers like oral cancer, additional
adjuvants are required.
The aims of this thesis were to study the specific immune response, the
antitumor effect in murine models of oral cancer and the in vitro effect of a
therapeutic formulation, consisting of a hemocyanin and a Th1 adjuvant (QS-21,
AddaVax). The hypotheses were: 1. The hemocyanins of mollusks gastropod
induce a humoral and cellular type Th1 immune response in oral cancer
immunotherapy in a murine model, and will be enhanced when they are used in
conjunction with Th1 adjuvants, thereby improving the therapeutic response
against such cancer. 2. The hemocyanins affect the cellular viability of the
tumor cells of oral cancer.
The principal results demostrated that: 1. The FLH plus QS-21 formulation
showed the better immunogenicity, as reflected in a major anti-hemocyanin IgG
total title, with predominance of IgG2a antibodies, and better cellular response
in a delated-type hypersensitivity assay (DTH). 2. In the orthotopic and
heterotopic models of oral cancer, the FLH plus QS-21 formulation showed the
most promising results, evaluated through a positive DTH, less tumor
development and a major survival compared with other treatments and controls.
The common factor was the priming with hemocyanins prior the tumor cells
challenge. 3. The hemocyanin-adjuvant preparations had variable, without
significant effects on the viability of the oral cancer cell lines AT-84, AT-84 E7
Luc and MOC7. 4. A cross reaction between the anti-hemocyanin antibodies
and the surface antigens in the MOC7 murine tumor line was not found.
Finally, it is important to note that this is the first study in which are
investigated the effect of the hemocyanins alone and combined with adjuvants
in murine models of oral cancer. Therefore, the results lay the basis for further
studies on application of hemocyanins and especially FLH in oral cancer
immunotherapy, both for the prevention and/or the treatment of such carcinoma
in humans / Fondecyt

Identiferoai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/138247
Date January 2015
CreatorsMora Román, Juan José
ContributorsBecker Contreras, María Inés, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas
PublisherUniversidad de Chile
Source SetsUniversidad de Chile
LanguageSpanish
Detected LanguageEnglish
TypeTesis
RightsAtribución-NoComercial-SinDerivadas 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/

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