Trabajo de Investigación Requisito para optar al Magister en Ciencias Odontológicas con Mención en Periodontologia / las especies reactivas de oxígeno (ERO), entre ellas H202, son
liberadas durante la inflamación crónica inducen la destrucción tisular por medio
de la sobreexpresión de citoquinas proinflamatorias y la activación de
metaloproteinasas de matriz (MMP), en ocasiones involucrando la activación de
la vía de señalización NFκB. Si bien, los fibroblastos del ligamento periodontal
(FLP) regulan la homeostasis del periodonto, no se conoce el efecto de las ERO
sobre la síntesis y actividad de las MMPs y las vías de señalización
involucradas.
Objetivo: Evaluar la actividad de MMPs -2 y -9 en conjunto con la
participación de la vía NFκB en cultivos primarios de FLP humano tratados o no
con dosis subletales de H2O2.
Metodología: FLP fueron aislados y cultivados a partir de 14 terceros
molares sanos de 14 sujetos con indicación de extracción y expuestos a dosis
subletales de peróxido. La activación de NFκB se determinó mediante la
translocación nuclear de la subunidad p65 en presencia de H2O2 y/o SN50, un
péptido inhibidor de la subunidad p50 de la vía NFκB y controles respectivos
mediante inmunofluorescencia. Los FLP fueron estimulados con dosis
subletales de H2O2 (2,5-10 µM) por 24 h y/o SN50 como control negativo. Los
sobrenadantes fueron recolectados y procesados. La actividad de las proformas
y formas activas de MMP-2 y MMP-9 fueron determinadas mediante
zimografías en gelatina y evaluadas por densitometría. Los resultados fueron
expresados como unidades arbitrarias densitométricas (ua) por mg de proteínas
totales. Los resultados fueron analizados por medio del test estadístico ANOVA
con el software StataV11.1.
Resultados: La viabilidad celular se mantuvo en los grupos estimulados
con H2O2 en dosis de 2,5-10 µM por 24 h. El H2O2 Indujo la translocación
nuclear de NFκB. El porcentaje de activación (% A) de MMP-9 fue mayor en el
grupo H2O2 5 μM que en el grupo 5 μM/ SN50 (p=0,051); mientras que el % A
de MMP-2, aumentó significativamente en el grupo H2O2 5 μM comparado con
el control. La actividad de MMP-9 fue significativamente mayor en el grupo H2o2
2,5 μM comparado con el de 5 μM/ SN50 y el de 10 μM; mientras que la
actividad de MMP-2 aumentó significativamente en el grupo de 5 μM en
comparación con el grupo control, 10 μM y el grupo de 5 μM + SN50.
Conclusiones: La actividad gelatinolítica de MMP-2 aumenta con dosis
subletales de H2O2 (<10 µM), en parte vía NFκB en FLP humano. La actividad
de MMP-9 en FLP humano, está regulada parcialmente por la vía NFκB. El
aumento en la actividad de MMP-2 inducido por H2O2, podría estar relacionado
con la destrucción de tejido en las enfermedades periodontales. / FINANCIAMIENTO
FONDECYT 1090461
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/147331 |
| Date | January 2012 |
| Creators | Osorio Alfaro, Constanza Andrea |
| Contributors | Hernández Ríos, Emma, Díaz Araya, Guillermo, San Martín Peñaloza, Inga |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | Tesis |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/ |
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