La chromatographie à contre courant (CCC) est une technique de purification chimique préparative quitravaille avec un système biphasique liquide. Une phase est la phase mobile, l'autre phase est la phasestationnaire. Il n'y a aucun support solide: un champ de force centrifuge est utilisé pour maintenir en place laphase stationnaire. Ce travail est une contribution à l'étude de la purification préparative par CCC. Après uneimportante étude bibliographique des procédés de purification en continu tant en CCC qu'autres, il est montréque la méthode dite "multi-dual-mode", ou MDM, est une solution possible. Elle consiste à utiliser le fait queles deux phases liquides peuvent servir de phase stationnaire: il suffit d'inverser le sens de circulation et lanature de la phase mobile (méthode dual-mode). Le mélange est séparé de façon classique pendant untemps chronométré, puis on inverse le rôle des phases: la phase mobile devient stationnaire et vice versa eton inverse également le sens de circulation (ascendant devient descendant ou vice versa). On sort lescomposants du mélange soit d'un coté de la colonne CCC, soit de l'autre. La méthode est mise en oeuvrepour purifier le Bleu de Coomassie en le débarassant des ses composés polaires (d'un coté) et apolaire (del'autre coté de la colonne et en accumulant dans la colonne la fraction de polarité intermédiaire, fractiond'intérêt. Une nouvelle colonne hydrostatique de petit volume (30 mL) a également été testée: elle permetde tester un nouveau système liquide très rapidement. / Counter-current chromatography (CCC) is a preparative purification technique that works with the twoliquid phases of a biphasic liquid system. One phase is used as the mobile phase when the other phase isused as the stationary phase. There is no solid support: centrifugal fields are used to obtain a support-freeliquid stationary phase. This work contains an exhaustive bibliographic study of what can be found in theliterature concerning continuous chromatographic processes. The multi-dual-mode (MDM) process was foundto be the best one able to purify large amount of crude mixtures. The MDM method starts with a classicalseparation of the mixture followed by a switch of both the liquid phase nature and the flowing direction. Themobile phase flowing e.g. in a descending direction becomes the stationary phase. The previous stationaryphase becomes the mobile phase flowing in the ascending direction (or vice versa). The purified compoundsof the introduced mixture are eluted at one side of the column or the other according to their polarity. TheMDM method was used to purify a crude sample of Coomassie Blue: the polar part of the dye was eluted atthe column top (or head) and the apolar part at the column bottom (or tail) while the essential part of the dyewas trapped inside the CCC column. The work also presents a new small volume (30 mL) hydrostatic CCCcolumn. It is shown that this column could be used to test quickly the potential of a given biphasic liquidsystem.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:theses.fr/2012LYO10249 |
| Date | 29 November 2012 |
| Creators | Mekaoui, Nazim |
| Contributors | Lyon 1, Berthod, Alain |
| Source Sets | Dépôt national des thèses électroniques françaises |
| Language | French |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation, Text |
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