La génération des cellules hématopoïétiques, aussi connue sous le nom d'hématopoïèse, est contrôlée par l’activité conjuguée de facteurs de transcription lignée-spécifiques permettant l’expression, en temps et lieu, de gènes spécifiques nécessaires pour le développement cellulaire. Dans le cadre de notre étude, nous avons étudié les facteurs de transcription KLF2 et KLF4 qui jouent des rôles cruciaux dans la formation des lymphocytes B et T. KLF2 et KLF4 activent la transcription de gènes spécifiques via leur interaction avec le co-activateur (CBP). Leurs interactions avec CBP requièrent le domaine de transactivation (TAD) qui est localisé dans la région N-terminal des facteurs KLF2 et KLF4.
Des études préalables ont montré que des domaines TAD sont aussi présents chez la protéine suppresseur de tumeur p53 et que ces domaines sont requis pour les interactions entre la protéine p53 et le co-activateur CBP. Récemment, plusieurs structures des TADs de p53 en complexe avec les domaines TAZ2 et KIX de CBP ont permis de démontrer que ces TADs sont de nature acide et contiennent un motif ΦΧΧΦΦ crucial pour la formation des interactions. De plus, il s’avère que ces TADs sont similaires aux TADs de KLF2 et KLF4.
L’étude présentée dans ce mémoire relate la caractérisation structurelle et fonctionnelle des interactions formées par les facteurs de transcription KLF2 et KLF4 avec leur partenaire d'interaction, CBP, pour activer la transcription de gènes spécifiques. Nos analyses ont été faites en utilisant différentes techniques telles que le titrage calorimétrique isotherme (ITC), la résonance magnétique nucléaire (RMN) ainsi que des expériences de transactivation chez la levure. Notre étude permet une meilleure compréhension des rôles opposés mais complémentaires qu'ont les protéines KLF2 et KLF4 au cours du développement et de la différentiation des lymphocytes B et T en plus de fournir les détails mécanistiques à la base de leurs interactions. Ces informations seront potentiellement utiles pour le développement d'outils à des fins thérapeutiques dans le cadre des leucémies, notamment. / Hematopoietic development is regulated through a combinatorial interplay between
lineage-specific activators and the general transcription factors that enables cell-specific
patterns of gene expression. In this study, the transcription factors KLF2 and KLF4 play
crucial roles in lymphocytes B and T development by activating transcription of specific genes
through interactions with the co-activator (CBP). These interactions involve the
transactivation domains (TAD) localized in the N-terminal region of KLF2 and KLF4 factors.
Previous studies have shown that TADs are also found in the tumor suppressor protein
p53 and these TADs are responsible for the interactions between the p53 protein and the coactivator
CBP. Recently, several structures of p53TADs in complex with the TAZ2 and KIX
domains of CBP have shown that these TADs are acidic and possess a ΦΧΧΦΦ motif crucial
for the formation of the interaction. Interestingly, these TADs are similar to the ones found on
KLF2 and KLF4.
This thesis provides a structural and functional characterization of the interactions
formed by the transcription factors KLF2 and KLF4, which have opposing roles, and
competes for the same interacting partner CBP to activate transcription. The analysis is done
using isothermal titration calorimetry (ITC), nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy
and a yeast activation assay. This study brings a greater understanding on the opposing roles
yet complementary of KLF2 and KLF4 proteins involved in B and T lymphocytes specific
lineages selection and also provides information for potential therapeutic research regarding
disease such as leukemia.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:umontreal.ca/oai:papyrus.bib.umontreal.ca:1866/18660 |
| Date | 04 1900 |
| Creators | Idrissa Moussa, Mohamed |
| Contributors | Omichinski, James G. |
| Source Sets | Université de Montréal |
| Language | French |
| Detected Language | French |
| Type | Thèse ou Mémoire numérique / Electronic Thesis or Dissertation |
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