Graduation date: 1998

Les principaux échecs des greffes de cellules souches allogéniques (HSCT) sont la rechute et les infections, accompagnées ou non de GvHD (Graft versus Host Disease, maladie du greffon contre lhôte), manifestations qui pourraient être partiellement attribuées à un déficit immunitaire (rechute, infections) ou à une réaction immunitaire exacerbée envers le receveur (GvHD) (Baron, Storer et al. 2006). Létude de la reconstitution du système immunitaire, et particulièrement, lymphocytaire, savère dès lors capitale dans le développement des HSCT. Nous avons investigué la reconstitution immune de 50 patients traités par HSCT nonmyéloablative classique vs HSCT nonmyéloablative déplétée en lymphocytes T CD8+. 50 patients ont été randomisés : greffon déplété en CD8 (n=22) vs non manipulé (n=28). Lâge médian était de 57 ans au moment de la greffe (range 36-69). Le régime de conditionnement consistait en une irradiation corporelle totale de 2 Gy avec ou sans ajout de Fludarabine. 20 patients ont reçu une greffe de donneur familial, 14 de donneurs non familiaux HLA identiques, et 16 de donneurs non familiaux présentant une disparité HLA. La reconstitution immunitaire la première année après HCT a été monitorée par cytométrie en flux, analyse de la diversité du répertoire du TCR (spectratyping), quantification de sjTREC (signal joint T cell receptor excision circle, marqueur de la thymopoïèse). La déplétion des CD8 a réduit la reconstitution des taux de CD8 durant les 6 premiers mois postgreffe (P<0.0001) mais na pas présenté dimpact significatif sur la récupération des autres populations cellulaires. Les concentrations de sjTREC et des taux de CD3 ont augmenté parallèlement entre le jour 100 et le jour 365 après greffe (P=0.006 et P=0.022, respectivement), suggérant ainsi la néoproduction de lymphocytes T par le thymus, même chez ces patients âgés. Les facteurs associés à une concentration conséquente de TREC un an après greffe incluent 1° le choix dun donneur non familial HLA-matched (P=0.029), 2° de hautes concentrations de lymphocytes T dans le greffon (P=0.002), et 3° labsence de GVHD chronique (P<0.0001). Nos données suggèrent un modèle biphasique de reconstitution du pool lymphocytaire T: 1) une expansion des T matures du greffon en périphérie durant les 3 premiers mois ;2) une néoproduction active par voie intrathymique assurant la reconstitution du système immunitaire à plus long terme. Combien de temps cette néosynthèse intrathymique perdure-t-elle ? Quels facteurs laffectent ? Est-elle associée à une diversité accrue du répertoire lymphocytaire ? Ces questions nous ont amenés à étudier la reconstitution immunitaire à long terme (entre 1 et 6.5 ans) de 73 patients après minigreffe (211 points au total). Nous avons observé un maintien de la thymopoïèse réenclenchée au cours de la première année postgreffe chez les patients âgés de moins de 50 ans et de 50-60 ans. Cette reprise de la thymopoïèse na pas été mise en évidence au sein du groupe des plus de 60 ans. Ainsi, une application clinique concrète à cette observation pourrait être ladministration de greffons particulièrement riches en lymphocytes T à ce type de patients, puisquils seront plus susceptibles de développer une lymphopénie persistante postgreffe par absence de réenclenchement de la voie thymodépendante. Les facteurs associés à une reconstitution thymodépendante à long terme après minigreffe étaient : 1°labsence de cGvHD (P<0.0001); 2°lâge du receveur (P<0.0001); 3° la concentration en lymphocytes T dans le greffon (P=0. 0.0038) ; 4°laugmentation de la diversité HLA (P=0.0001). Enfin, une tendance non significative à une augmentation parallèle de la diversité du répertoire TCR et des concentrations en sjTREC a été mise en évidence. Cette analyse doit être confirmée par létude dun plus grand nombre de sujets. Afin déliminer au maximum les influences extrathymiques sur les taux de TREC périphériques, nous comptons mesurer pour chaque patient des TREC précoces (BTREC) et un TREC tardif (sjTREC), et calculer un ratio reflétant exactement le nombre de divisions intrathymiques. Cette méthode a été validée dans notre centre au cours dune expansion de lymphocytes T in vitro au moyen de billes anti-CD3 anti-CD28, expansion durant laquelle nous avons pu observer une diminution des sjTREC et des BTREC, mais pas du ratio sjTREC/BTREC. Lanalyse des ratios de TREC des patients greffés est actuellement à létude. Une troisième étude a été également menée afin déclaircir le lien entre GvHD, thymopoïèse et présence de lymphocytes T régulateurs (TRegs) chez 64 patients après HCT. Lémergence dun nouveau marqueur spécifique des TRegs, le CD127, a permis pour la première fois une isolation sans équivoque des TRegs (Liu, Putnam et al. 2006). Nous navons pas pu mettre en évidence de différence significative entre lapparition dune cGvHD chez les patients présentant après greffe des taux de TRegs supérieurs ou inférieurs à la médiane (P=0.13). Inversement, loccurrence de cGvHD na pas paru significativement affecter les concentrations en TRegs après greffe (P=0.1). Nous avons également mis en évidence une corrélation positive significative entre le taux de sjTREC/ml et le taux de TReg/ul au J100 (R=0.46, P=0.007) et à 1 an R=0.47, P=0.001). Afin de déterminer lorigine précise de ces TReg après greffe (thymus du donneur?), nous réalisons actuellement des mesures de sjTREC et de chimérisme sur les populations cellulaires triées au moyen du triple marquage CD4+CD25+CD127- (cellules T classiques vs régulatrices).

Progressive obesity and its associated metabolic syndromes represent a globally growing challenge, yet mechanistic understanding and current therapeutics are unsatisfactory. We discovered that CD4+ T-lymphocytes, resident in visceral adipose tissue (VAT), control insulin-resistance in diet-induced obese (DIO) mice and likely humans. DIO VAT-associated T cells display biased TCR-Valpha/betarepertoires suggesting antigen-specific expansion. CD4+ T-lymphocyte control of glucose homeostasis is compromised in DIO when VAT accumulates pathogenic IFNgamma-secreting Th1 cells, overwhelming static numbers of Th2 (CD4+GATA-3+) and regulatory Foxp3+ T cells. CD4+ T cell transfer into DIO, lymphocyte-free RAGnull mice reversed weight gain and insulin resistance predominately through Th2 cells. Brief systemic treatment with anti-CD3 antibody or its F(ab’)2 fragment, restores the Th1/Foxp3+ balance and reverses insulin resistance for months, despite continuing high-fat diet. CD4+ T cells impact the progression of obesity-associated metabolic abnormalities and can be manipulated by immunotherapy.

Progressive obesity and its associated metabolic syndromes represent a globally growing challenge, yet mechanistic understanding and current therapeutics are unsatisfactory. We discovered that CD4+ T-lymphocytes, resident in visceral adipose tissue (VAT), control insulin-resistance in diet-induced obese (DIO) mice and likely humans. DIO VAT-associated T cells display biased TCR-Valpha/betarepertoires suggesting antigen-specific expansion. CD4+ T-lymphocyte control of glucose homeostasis is compromised in DIO when VAT accumulates pathogenic IFNgamma-secreting Th1 cells, overwhelming static numbers of Th2 (CD4+GATA-3+) and regulatory Foxp3+ T cells. CD4+ T cell transfer into DIO, lymphocyte-free RAGnull mice reversed weight gain and insulin resistance predominately through Th2 cells. Brief systemic treatment with anti-CD3 antibody or its F(ab’)2 fragment, restores the Th1/Foxp3+ balance and reverses insulin resistance for months, despite continuing high-fat diet. CD4+ T cells impact the progression of obesity-associated metabolic abnormalities and can be manipulated by immunotherapy.

This thesis includes two topics. The first topic is a 868/915 MHz band ZigBee physical layer design. The second topic is a synchroniza- -tion design of DVB-T demodulators. The first topic includes simulations and a hardware design. This chip is a physical layer design for IEEE Std 802.15.4 standard applications, including both a transmitter and a receiver for 868/915 MHz band. The measurement of the maximum power is about 144 &#x00B5;W at 2.4 MHz. This chip is proved to be compliant with a low power consumption requirement. The second topic mainly includes an introduction of the DVZB-T transmitter, equivalent channel model, a demodulation design of the receiver and simulations. The algorithms of the receiver include symbol timing synchronization, frequency offset estimation and its compensation and scattered pilots synchronization.

Thèse doctorat : Sciences de la vie et de la santé. Biologie moléculaire et cellulaire : Paris 12 : 2003. / Version électronique uniquement consultable au sein de l'Université Paris 12 (Intranet). Titre provenant de l'écran-titre. Bibliogr. : 220 réf.

Thesis (Ph. D.)--University of Chicago, Committee on Immunology, 2002. / Includes bibliographical references. Also available on the Internet.

Thesis (Ph. D.)--Joint Program in Oceanography (Massachusetts Institute of Technology, Dept. of Biology, and the Woods Hole Oceanographic Institution), 2001. / Includes bibliographical references.

Thesis--Freiburg i. Br. / Includes bibliographical references.

Diss.--Bern. / Vita. Includes bibliographical references.