Made available in DSpace on 2015-04-11T13:38:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Renata Maria Leite Castelloes Mesquita.pdf: 1252525 bytes, checksum: 9ec0087057f4329331531ec3014e3df7 (MD5) Previous issue date: 2012-09-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Brazil nuts are an important commercial product of northern Brazil, however this product has been rejected by the international market due to high levels of aflatoxin contamination. The fungus considered more important in the production of these mycotoxins is Aspergillus flavus. In order to provide data for the development of an efficient strategy for the detection of aflatoxigenic A. flavus, which will contribute greatly to the quality control of the Brazil nuts, this main scope of this work was to study the genetic diversity of the fungi A. flavus isolated from almonds produced by different regions of Amazon. For this we have used microsatellite markers (SSR) which have proven to be effective for the study of genetic diversity between individuals and populations. We have selected 100 isolates of Aspergillus sp., and species identification was performed by sequencing the rDNA ITS region. It was identified 32 Aspergillus nomius, 49 Aspergillus flavus, 16 Aspergillus tamarii and 1 Aspergillus fumigatus. In the study of genetic diversity was used 12 SSR markers developed specifically for the species A. flavus and selected from the literature. Two groups of isolates of A. flavus were formed according to the origin of Brazil nuts (Humaitá / AM and Acre), and a third group isolated from nuts previously acquired in trade fairs in Belém / PA were also included in the study, totaling 86 individuals. Ten of the twelve markers used were efficient in PCR amplification. According to the result all the 10 loci studied were polymorphic, and from the 86 individuals analyzed 118 alleles were identified ranging from 110-390 base pairs. The number of alleles per locus ranged from 8-16 with a mean of 11.7. The statistical mean value for genetic differentiation (Gst) was 0.099, which represents a low genetic variation between the groups. However, the genetic diversity within groups accounted for 85.9% of the total genetic diversity, indicating a greater variability within groups. The coefficient of similarity wasused to estimate the genetic distance between the 86 A. flavus, it ranged from 0.7 to 1.0 with an average of 0.96. The genetic distance was also calculated between populations and ranged from 0.562 to 0.7287. Thus it is concluded that the isolates showed high polymorphism among them, however a greater variability was found within the groups (85.5%), while diversity among the groups was only 14.5%. And according to the groups formed by genetic diversity analysis of A. flavus using SSRs markers, there was no correlation with the origin of the isolates / A Castanha-do-brasil é um importante produto comercial da região norte do Brasil, entretanto esta vem sofrendo embargos na exportação devido aos altos níveis de aflatoxinas presente em lotes comercializados. A espécie de fungo considerada mais importante na produção destas micotoxinas é o Aspergillus flavus. No intuito de fornecer subsídios para o desenvolvimento de uma estratégia eficiente para a detecção de A. flavus aflatoxigênicos, que irá contribuir extremamente para o controle da qualidade da Castanha-do-brasil, pretendeu-se neste trabalho estudar a diversidade genética de fungos A. flavus isolados de amêndoas provenientes de diferentes municípios do estado do Amazonas e Acre. Para isso foram utilizados marcadores moleculares microssatélites (SSR), os quais tem se mostrado eficientes no estudo de variabilidade genética entre indivíduos e entre populações. Foram selecionados 100 isolados do gênero Aspergillus, e para identificação da espécie foi realizado o sequenciamento e análise da região ITS do rDNA. Ao total foram identificados 32 Aspergillus nomius, 49 Aspergillus flavus, 16 Aspergillus tamarii e 1 Aspergillus fumigatus. No estudo da variabilidade genética foram utilizados 12 marcadores SSR selecionados da literatura desenvolvidos especificamente para a espécie de A. flavus. Dois grupos de isolados de A. flavus foram formados de acordo com a origem da castanha (Humaitá/AM e Acre), e um terceiro grupo previamente isolado de castanhas adquiridas em feiras na cidade de Belém/PA também foram incluídos no estudo, totalizando 86 indivíduos. Dez dos doze marcadores utilizados foram eficientes na amplificação da PCR. Com o resultado verificou-se que todos os 10 locus analisados foram polimórficos, e a partir dos 86 indivíduos analisados foram identificados 118 alelos com amplicons variando entre 110 a 390 pares de base. O número de alelos variou de 8-16 por locus, com a média de 11,7. Ao realizar a análise estatística o valor médio da diferenciação gênica (GST) foi de 0,099, representando uma baixa variação genética entre os grupos analisados. Já a diversidade gênica dentro dos grupos foi responsável por 85,9% da diversidade genética total, indicando maior variabilidade dentro dos grupos. O coeficiente de similaridade utilizado para calcular a distância genética entre os 86 isolados variou de 0,7 a 1,0 com uma média de 0,96. A distância genética também foi calculada entre as populações e variaram de 0,562 a 0,7287. Assim conclui-se que os isolados apresentaram grande polimorfismo entre eles, sendo que a maior variabilidade ocorreu dentro do grupo (85,5%), enquanto que a diversidade entre os grupos estudados foi de 14,5%. De acordo com os resultados obtidos os agrupamentos formados pela análise da variabilidade genética de A. flavus utilizando marcadores SSRs, não apresentou correlação com a origem dos isolados.

Lipoxygenase (LOX)-derived oxylipins are known to play critical roles in defense against herbivores and pathogens. The objective of this study was to determine the biochemical, molecular and physiological roles of a specific maize lipoxygenase gene, ZmLOX10, with special emphasis on LOX10-derived oxylipins in plant-insect and plant-pathogen interactions. To achieve this goal, independent mutant alleles were generated and genetically advanced to create near-isogenic mutant and wild-type lines suitable for functional analysis. Here we provide genetic evidence that LOX10 is the sole LOX isoform in maize required for the biosynthesis of green leafy volatiles (GLV) in leaves and show that LOX10- mediated GLVs play a significant role in direct and indirect defense responses to insects through their regulation of jasmonic acid and volatile organic compound production. Contrary to the defensive role of LOX10 in plant-insect interactions, tests for susceptibility to fungal pathogens suggest that LOX10-mediated GLVs may contribute to the development of disease symptoms to the economically important maize pathogens, Aspergillus flavus and Colletotrichum graminicola. Specifically, LOX10-derived GLVs may facilitate aflatoxin accumulation in response to A. flavus infection and may play a positive role in anthracnose leaf blight and stalk rot caused by C. graminicola. Collectively, our results suggest that metabolites derived from GLV-regulated pathways have a significant impact on molecular plant-herbivore and plant-pathogen interactions.

Le aflatossine sono tra i composti naturali conosciuti più cancerogeni. Queste molecole, tossiche sia per gli animali sia per l’uomo, sono prodotte su importanti colture, quali mais, arachidi e cotone da differenti specie fungine di Aspergillus in particolare quelli afferenti alla sezione Flavi. In Italia il principale fungo responsabile della contaminazione da aflatossine su mais è A. flavus e l’area più esposta alla contaminazione è il nord della penisola dove si localizza circa il 90% della coltivazione del mais. Generalmente, le condizioni climatiche in questa area non sono favorevoli alla contaminazione da aflatossine; comunque stress idrico e alte temperature possono verificarsi durante il ciclo di crescita del mais favorendo la produzione di AFB1 da parte del fungo e determinando un accumulo superiore ai limiti di legge, come accadde nel 2003. Infatti, a partire dal 2003 più attenzione è stata dedicata alla caratterizzazione della popolazione italiana di A. flavus associate alla coltivazione del mais e allo sviluppo di una valida tecnica, come il controllo biologico degli isolati tossigeni mediante l’utilizzo di isolati non tossigeni, per ridurre la contaminazione da aflatossine. / Aflatoxins are the most carcinogenic natural compound known in nature. These molecules, toxic for animal and humans, are produced on important economic commodities worldwide by the secondary metabolism of several fungal species of Aspergilli of the section Flavi. In Italy the principal responsible of aflatoxins contamination on maize is A. flavus and the more exposed area to contamination is the northern of the peninsula where almost 90% of the cultivation is located. Generally, climatic conditions in this area are not favourable for aflatoxins contamination; however, reduced rainfall and increased temperature during maize developing season can occur along with associated levels of AFB1 exceeding the legal limits, as happened in 2003. Since this year, more attention has been dedicated to characterize Italian A. flavus populations associated with maize cultivation and to develop a useful tool to reduce aflatoxins contamination. To accomplish this goal, vegetative compatibility analysis, identification of atoxigenic isolates, evaluation of the ability of atoxigenic isolates to reduce in vitro aflatoxins produced by toxigenic isolates in vitro, selection of atoxigenic isolates potentially useful as biocontrol agents, individuate deletions in the aflatoxin biosynthesis gene cluster of selected atoxigenic isolates and biocontrol field trial with the selected potential biocontrol agents were achieved.

Thesis (Ph.D.) -- Mississippi State University. Department of Biochemistry and Molecular Biology. / Title from title screen. Includes bibliographical references.

Submitted by Johnny Rodrigues (johnnyrodrigues@ufcg.edu.br) on 2018-06-15T19:21:25Z No. of bitstreams: 1 CELEIDA QUEIROZ DE LIMA - DISSERTAÇÃO PPGEA 2009..pdf: 7013625 bytes, checksum: 9063ee4b1275012362d4e2737d1c4d9f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-15T19:21:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CELEIDA QUEIROZ DE LIMA - DISSERTAÇÃO PPGEA 2009..pdf: 7013625 bytes, checksum: 9063ee4b1275012362d4e2737d1c4d9f (MD5) Previous issue date: 2009-04 / E premente a necessidade de controle do Aspergillus flavus, fungo importante por deteriorar sementes e grãos armazenados e produzir toxinas prejudiciais a saúde humana e animal. Produtos "naturais" como óleos essenciais ou extratos vegetais, vêm sendo testados e até mesmo utilizados com propósitos de eliminar ou reduzir os efeitos negativos apresentados pelos fungicidas sintéticos. O presente estudo realizou-se com extratos de nim (Azadirachta indica) - comercial e obtido de folhas-, canela (Cinnamomum zeylanicum) e alho (Allium sativum L.), aplicados nas proporções 1,10, 25, 50 e 100%, com o objetivo de avaliar "in vitro" os seus efeitos no desenvolvimento de A. flavus e sobre a qualidade fisiológica de sementes de amendoim (Arachis hypogeae L.) tratadas com os referidos extratos. O trabalho foi desenvolvido no Laboratório de Fitopatologia do Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal da Paraíba. Os conídios do fungo foram imersos nas soluções de extratos e avaliados quanto a germinação. Também foram plantados em meio de cultura BDA mais extratos, conídios e fragmentos miceliais (2mm de diâmetro) do fungo para se observar, respectivamente, o número de unidades formadoras de colónias (UFC) e o crescimento micelial. As sementes de amendoim, cv. BR-1 , antes ou após a inoculação de A. flavus, foram imersas nas soluções de extratos e, após, avaliadas quanto a incidência do fungo e qualidade fisiológica (Germinação e índice de Velocidade de Germinação - IVG). A análise estatística realizou-se segundo o delineamento inteiramente casualizado em arranjos fatorial, definidos conforme a natureza do ensaio. Os extratos empregados apresentaram atividade fungicida e/ou fungistáticas com relação a germinação de esporos, número de UFC e crescimento micelial, porém de forma diferenciada quanto a planta de onde foram obtidos e a concentração empregada. Os conídios imersos em extrato de canela a 10, 25, 50 e 100% e em extrato de nim comercial a 1 e 10% não germinaram e os menores números de UFC foram nos extratos de canela a 10, 25, 50 e 100%. O crescimento micelial foi nulo nas concentrações 50 e 100% de todos os extratos. Quanto ao tratamento das sementes, os produtos testados em relação à incidência de A. flavus exerceram mais efeito erradicantes, sendo também essas sementes as que apresentaram os maiores valores de germinação e IVG. / The fungus Aspergillus flavus cause deterioration of seeds and grains in storage and produce toxins that affect the human and animal health. Natural products as essential oils and plant extracts have been tested or applied instead fungicides to eliminate or reduce the negative effects of synthetics fungicides. This work was realized employing extracts of neem (Azadirachta indica) leaves and a commercial product, cinnamon (Cinnamomum zeylanicum) and apian (Allium sativum), in the proportions of 1, 10, 25. 50 and 100% aiming to evaluate "'in vitro" effects on the development of A. flavus and physiological quality of treated peanut seeds. The study was carried out in the Laboratory of Phytopathology/Federal University of Paraíba, Areia-Paraiba State-Brazil. The fungi conidia were immersed in the extracts solutions and observed to germination evaluation. Suspensions of conidia and discs of mycelium (2mm diameter) were planted in PotatoDextrose-Agar (PDA) aditioned of extracts solution to verify respectively the numbers of originated colonies (UFC) and mycelium growth. Peanut seeds cv. before and after inoculated with A. flavus conidia suspensions were treated with extracts solutions and evaluated about fungai incidence. and physiological qualities (germination and index of germination velocity - IVG). The statistical analyses were realized as an entirely randomized factorial design defined according the assays characteristics. The extracts shown fungicides and, or fungistatic effects to spores germination. numbers of UFC and mycelia growth but with variations according the origin (plant) and proportion of extract. Conidia immersed into cinnamon extract at the proportions of 10, 25, 50 and 100% and in neem commercial extract at the proportions of 1 and 10% did not germinate. AIso the cinnamon extract at the proportions of 10, 25, 50 and 100% when eddied to PDA cultural media reduced the numbers of UFC. The mycelia growth do not verified on PDA cultural media with the extracts at the proportions of 50 and 100%. Used in seed treatment the extracts presented more eradication effects than protective effects. The peanut seeds treated after the fungai inoculation presented the higher germination and IVG

Orientador: João Cláudio Thoméo / Banca: Vanildo Luiz del Bianchi / Banca: Vera Aparecida de Oliveira Tiera / Banca: Cecilia Cristina Marques dos Santos / Banca: Danila Comelis Bertolin / Resumo: Este trabalho teve como objetivo geral avaliar a viabilidade técnica da aplicação de biofungicidas extraídos de plantas no processamento de amendoim (Arachis hypogaea L.), de modo a reduzir a infestação pelo fungo Aspergillus flavus L. e possível contaminação por aflatoxina. Foi realizado na primeira etapa o estudo da contaminação fúngica e de aflatoxina, nas Safras 2011/12, 2012/13 e 2013/14, nas etapas da colheita e pós-colheita das vagens de amendoim Runner IAC 886 na região de Jaboticabal - SP, e a proposta da Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle (APPCC). Os resultados da umidade das vagens mostraram uma redução, em média, de 65,65% base seca (b.s.) no arranquio, para 7,17% b.s. no armazenamento. A contaminação fúngica foi maior na Safra 2013/2014 e os índices de aflatoxinas estavam abaixo do exigido pela legislação vigente. O plano APPCC apresentou os pontos de controle (PC) nas etapas do arranquio, secagem ao sol, colheita mecânica e transportes; e os Pontos Críticos de Controle(PCC), nas etapas de recepção, secagem e armazenamento, concluindo-se que a melhor etapa para a aplicação do biofungicida é antes da secagem artificial. A segunda parte consistiu na obtenção de biofungicidas nas formas de extratos (aquoso e alcoólico) e de óleo essencial das plantas: canela (Cinnamomum zeylanicum), cravo (Syzygium aromaticum), cidreira (Cymbopogon citratus), oregano (Origanum vulgare) e manjericão (Ocimum basilicum), e na avaliação destes quanto à inibição do fungo Aspergillus flavus L. e sintetização de aflatoxina. A eficiência de inibição dos biofungicidas sobre o Aspergillus flavus L. foi avaliada em meio Agar Dextrose Batata (BDA), pela técnica de inibição do crescimento micelial (ICM), concentração inibitória mínima (CIM) e por aplicações dos óleos mais eficientes nas vagens de amendoim contaminadas e armazenadas em umidades... / Abstract: This study aims to evaluate the technical feasibility of the application of biofungicides extracted from plants in the processing of peanut (Arachis hypogaea L.), with the objective of reducing infestation by fungus Aspergillus flavus L., and consequent contamination by aflatoxin, a chemical hazard. Firstly, we studied the fungal and aflatoxin contamination for the 2011/12, 2012/13, and 2013/14 crops, during the Runner IAC 886 peanut pods' harvesting and post-harvesting stages, in the region of Jaboticabal, Sao Paulo, Brazil, and proposed the Hazard Analysis and Critical Control Points (HACCP). The results of the pods' humidity showed a decrease, on average, of 65.65% d.b. on uprooting, to 7.17% d.b. on storage, and the fungal contamination was higher for 2013/2014 crops; the aflatoxin levels were below the required by current legislation. HACCP showed the control points (CP) during uprooting, sun drying, mechanical harvesting, and transportation; and the PCCs during stages of reception, drying, and storage proved the best stage for biofungicide application is before artificial drying. The second stage consisted of obtaining biofungicides as aqueous, alcoholic, and essential oil extracts from the plants: cinnamon (Cinnamomum zeylanicum), cloves (Syzygium aromaticum), lemon grass (Cymbopogon citratus), oregano (Origanum vulgare), and basil (Ocimum basilicum); then, we evaluated those in inhibiting the fungus Aspergillus flavus L. and synthesizing aflatoxin. The biofungicides' inhibiting efficiency on Aspergillus flavus L. was evaluated in Potato Dextrose Agar medium (PDA), by mycelial growth inhibition technique (MGI), by minimum inhibitory concentration (MIC), and by applying the most efficient oils on the contaminated peanut pods, stored in controlled humidity and room temperature, thus determining colony-forming units (CFU/g) and aflatoxins. The extracts' MGI results showed that there was no... / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-22Bitstream added on 2014-06-13T20:35:41Z : No. of bitstreams: 1 goncalves_an_me_sjrp.pdf: 651485 bytes, checksum: f6bb7160fc2afa8aae9c65f75fff26da (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Há um grande interesse no mercado de enzimas para descobertas de novas fontes para prospecção, tendo em vista que as enzimas de origem animal ou vegetal não suprem totalmente a demanda mundial. Desta forma busca-se não apenas novas fontes, mas também materiais fermentescíveis de baixo custo, assim agregando valor ao produto final. Neste trabalho investigou-se a produção de peptidase utilizando o fungo Aspergillus flavus, através de dois processos biofermentativos, sólido e submerso, usando farelo de trigo e meio complexo, respectivamente. Alguns parâmetros foram analisados para a obtenção de uma melhor produção. Para o bioprocesso fermentativo sólido foi investigado a influência da concentração de esporos, suplementação do meio com fontes adicionais de nitrogênio, temperatura e tempo. Obtivemos para essas variações a melhores condições quando o fungo era fermentado somente em farelo de trigo, sem suplementação de fontes adicionais de nitrogênio, com a proporção de 2,5x 10 6 esporos/ 5g meio a 30°C e em 96 horas de fermentação. Para o bioprocesso fermentativo submerso avaliamos a influência da concentração de esporos, suplementação do meio com fontes de carbono e com caseína, temperatura, pH e tempo. Obtivemos como melhores condições quando o fungo era fermentado em meio sem suplementação de fonte de carbono adicional, com 0,5% de caseína, 5x10 5 esporos/mL de meio a 30°C em pH 8 por 168 horas. Os extratos enzimáticos de ambos bioprocessos foram caracterizados bioquimicamente avaliando desta forma: pH ótimo, temperatura ótima e classe da peptidase. A partir desses dados foram realizados métodos cromatográficos para obtenção da peptidase pura e com essa amostra realizou-se a caracterização bioquímica funcional e a determinação dos... / There is a great interest by enzyme’s market on discovery of new sources for prospecting, considering that the enzymes from animal or plant do not fully supply the global demand. Therefore, the research of new sources, is not only of new sources, but also fermentable material with low cost are also required, in order to add value to the final product. In this study it was investigated the production of peptidase using the fungus Aspergillus flavus, through two processes, solid and submerged fermentation, using wheat bran and complex media, respectively. Some parameters were analyzed to obtain the best production. In solid fermentation bioprocess were investigated the influence of spore concentration of supplementation of the medium with additional sources of nitrogen, temperature and time. We obtained for these variations the best conditions when the fungus was fermented wheat bran only, without supplementation of additional sources of nitrogen, with a density of 2.5 x 10 6 spores / 5 g medium at 30 ° C and 96 hours of fermentation. In the submerged fermentation bioprocess were evaluated the effect of spore concentration supplementation of the medium with carbon sources and with casein, temperature, pH and time. We obtained as best conditions when the fungus was fermented in medium without supplemental carbon source added with 0.5% casein, 5x10 5 spores / ml medium at 30°C at pH 8 for 168 hours. The enzymatic extracts obtained by these bioprocesses were biochemically characterized by testing optimum pH, optimum temperature and class of peptidase. From these data it was obtained a pure peptidase by using chromatographic methods and this sample was used for functional biochemical characterization and determination of kinetic parameters, using the peptide substrate of FRET. The fungus Aspergillus flavus... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Hamilton Cabral / Banca: Eleonora Cano Carmona / Banca: Maria de Lourdes Teixeira de Moraes Polizeli / Resumo: Há um grande interesse no mercado de enzimas para descobertas de novas fontes para prospecção, tendo em vista que as enzimas de origem animal ou vegetal não suprem totalmente a demanda mundial. Desta forma busca-se não apenas novas fontes, mas também materiais fermentescíveis de baixo custo, assim agregando valor ao produto final. Neste trabalho investigou-se a produção de peptidase utilizando o fungo Aspergillus flavus, através de dois processos biofermentativos, sólido e submerso, usando farelo de trigo e meio complexo, respectivamente. Alguns parâmetros foram analisados para a obtenção de uma melhor produção. Para o bioprocesso fermentativo sólido foi investigado a influência da concentração de esporos, suplementação do meio com fontes adicionais de nitrogênio, temperatura e tempo. Obtivemos para essas variações a melhores condições quando o fungo era fermentado somente em farelo de trigo, sem suplementação de fontes adicionais de nitrogênio, com a proporção de 2,5x 10 6 esporos/ 5g meio a 30°C e em 96 horas de fermentação. Para o bioprocesso fermentativo submerso avaliamos a influência da concentração de esporos, suplementação do meio com fontes de carbono e com caseína, temperatura, pH e tempo. Obtivemos como melhores condições quando o fungo era fermentado em meio sem suplementação de fonte de carbono adicional, com 0,5% de caseína, 5x10 5 esporos/mL de meio a 30°C em pH 8 por 168 horas. Os extratos enzimáticos de ambos bioprocessos foram caracterizados bioquimicamente avaliando desta forma: pH ótimo, temperatura ótima e classe da peptidase. A partir desses dados foram realizados métodos cromatográficos para obtenção da peptidase pura e com essa amostra realizou-se a caracterização bioquímica funcional e a determinação dos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: There is a great interest by enzyme's market on discovery of new sources for prospecting, considering that the enzymes from animal or plant do not fully supply the global demand. Therefore, the research of new sources, is not only of new sources, but also fermentable material with low cost are also required, in order to add value to the final product. In this study it was investigated the production of peptidase using the fungus Aspergillus flavus, through two processes, solid and submerged fermentation, using wheat bran and complex media, respectively. Some parameters were analyzed to obtain the best production. In solid fermentation bioprocess were investigated the influence of spore concentration of supplementation of the medium with additional sources of nitrogen, temperature and time. We obtained for these variations the best conditions when the fungus was fermented wheat bran only, without supplementation of additional sources of nitrogen, with a density of 2.5 x 10 6 spores / 5 g medium at 30 ° C and 96 hours of fermentation. In the submerged fermentation bioprocess were evaluated the effect of spore concentration supplementation of the medium with carbon sources and with casein, temperature, pH and time. We obtained as best conditions when the fungus was fermented in medium without supplemental carbon source added with 0.5% casein, 5x10 5 spores / ml medium at 30°C at pH 8 for 168 hours. The enzymatic extracts obtained by these bioprocesses were biochemically characterized by testing optimum pH, optimum temperature and class of peptidase. From these data it was obtained a pure peptidase by using chromatographic methods and this sample was used for functional biochemical characterization and determination of kinetic parameters, using the peptide substrate of FRET. The fungus Aspergillus flavus... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

L’aflatoxine B1 (AFB1) est une mycotoxine contaminant de nombreux substrats agricoles, notamment les céréales, arachides, pistaches, graines de coton et autres fruits secs. Elle est génotoxique, agit comme un initiateur de la cancérogenèse et elle est classée par le CIRC (Centre International de Recherche sur le Cancer) dans le groupe I des molécules carcinogènes pour les hommes et les animaux. Cette toxine est produite par des espèces fongiques appartenant essentiellement au genre Aspergillus et à la section Flavi ; A. flavus étant l’espèce la plus préoccupante. Cette espèce peut se développer à la fois au champ ou lors du stockage des matières premières après récolte. Plusieurs études montrent qu’un grand nombre de denrées alimentaires destinées à l’alimentation humaine et animale sont contaminées par les aflatoxines mettant en évidence la faible efficacité ou l’insuffisance des stratégies actuelles utilisées pour la maîtrise de cette contamination. L’objectif principal de cette étude est le développement d’une stratégie alternative basée sur l’utilisation de produits naturels et visant à réduire la production de la toxine par les moisissures aflatoxinogènes. Grâce à l’élaboration d’un outil moléculaire regroupant un ensemble de gènes impliqués directement ou indirectement dans la biosynthèse de l’AFB1, ce travail permet de mieux comprendre le mécanisme d’action moléculaire de composés anti-aflatoxinogènes. Des extraits aqueux de plantes méditerranéennes ont été testés pour leur efficacité à inhiber l’aflatoxinogénèse. Ainsi, l’extrait aqueux d’hysope, Micomeria graeca, présente des propriétés anti-aflatoxinogènes importantes sans modification de la croissance fongique. Son effet inhibiteur sur plusieurs souches productrices d’aflatoxines ainsi que son mécanisme d’action ont été caractérisés. Ce dernier semble impliquer des gènes pivots dans la régulation des métabolismes fongiques primaire et secondaire ainsi que des voies impliquées dans la réponse cellulaire au stress oxydatif. Ces travaux permettent de valider l’utilisation d’extraits naturels comme stratégie alternative de lutte contre la contamination des aliments par les aflatoxines.

Submitted by Kamila Costa (kamilavasconceloscosta@gmail.com) on 2015-07-14T19:57:04Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Silmara M Miranda.pdf: 1535464 bytes, checksum: 2e2afc8694fa41a1cb6af9490965b12b (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-16T19:32:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Silmara M Miranda.pdf: 1535464 bytes, checksum: 2e2afc8694fa41a1cb6af9490965b12b (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-16T19:36:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Silmara M Miranda.pdf: 1535464 bytes, checksum: 2e2afc8694fa41a1cb6af9490965b12b (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-16T19:36:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Silmara M Miranda.pdf: 1535464 bytes, checksum: 2e2afc8694fa41a1cb6af9490965b12b (MD5) Previous issue date: 2014-06-27 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Filamentous fungi are organisms with the ability to produce various secondary metabolites, among them, mycotoxins, characterized by the toxic properties that have the human and animal organism. Are produced mostly by species of the genera Aspergillus and Penicillium, by engaging with relevant food contamination and mycotoxin production. The study aimed to identify the mycoflora and mycotoxins in samples of cassava produced in TNL in the Amazon region, Brazil flour. 30 samples of cassava flour in the local market and evaluated for moisture and water activity (aw), fungi (isolation, purification and identification by traditional taxonomy) and mycotoxins were collected. Confirmation of toxigenic fungal species was made by molecular biology, scanning electron microscopy was performed in three toxigenic species and mycotoxins were identified by MALDI-TOF. The results of moisture and (aw) ranging from 7.08 to 13.55% and 0.37 to 0.69 respectively. Among the samples analyzed, 30% had fungi and of these 18.5% were toxigenic. The species most frequently identified were Aspergillus flavus, Penicillium waksmanii and Penicillium citrinum. Among the toxigenic fungi Penicillium citrinum, Aspergillus flavus and Aspergillus amoenus were found. MALDI-TOF showed the presence of aflatoxin B1, patulin and citrinana more frequently. We conclude that greater attention to cassava flour, one of the most consumed foods in the north of the country is needed as toxigenic fungi and mycotoxins were found in the samples analyzed. / Fungos filamentosos são organismos com a capacidade de produzir diversos metabólitos secundários, dentre eles, as micotoxinas, caracterizadas pelas propriedades tóxicas que apresentam ao organismo humano e animal. São produzidas em sua maioria por espécies dos gêneros Aspergillus e Penicillium, relevantes pelo envolvimento com contaminação de alimentos e produção de micotoxinas. O estudo objetivou identificar a micobiota e ocorrência de micotoxinas em amostras de farinha de mandioca produzidas em Coari na região Amazônica, Brasil. Foram coletadas 30 amostras de farinha de mandioca no mercado local e avaliadas quanto à umidade e atividade de água (aw), fungos (isolamento, purificação e identificação pela taxonomia tradicional) e micotoxinas. A confirmação das espécies fúngicas toxigênicas foi feita pela biologia molecular, foi realizada microscopia eletrônica de varredura em três espécies toxigênicas e micotoxinas foram identificadas por MALDI-TOF. Os resultados de umidade e (aw) variaram de 7,08 a 13,55% e 0,37 a 0,69 respectivamente. Entre as amostras analisadas, 30% apresentaram fungos e destes 18,5% foram toxigênicos. As espécies identificadas com maior frequência foram Aspergillus flavus, Penicillium waksmanii e Penicillium citrinum. Entre os fungos toxigênicos foram encontrados Penicillium citrinum, Aspergillus flavus e Aspergillus amoenus. MALDI-TOF demonstrou presença de aflatoxina B1, citrinana e patulina com maior frequência. Conclui-se que é necessário maior orientação para os produtores da farinha de mandioca, um dos alimentos mais consumido na região Norte do país, pois fungos toxigênicos e micotoxinas foram encontrados nas amostras analisadas.