Ce travail étudie l’obtention de phospholipides structurés enrichis en DHA et en acide caprylique (PC DHA-C8) par voie enzymatique. Deux voies de synthèse sont étudiées, l’acidolyse et l’estérification. Suite à un criblage enzymatique, la lipase retenue pour les deux voies de synthèse est TL-IM. Une optimisation des paramètres de la réaction d’acidolyse a été réalisée entre l’acide caprylique (C8:0) et la phosphatidylcholine de tournesol (PC) par le biais d’un plan d’expériences. Les conditions optimales déterminées sont une température de 38°C, une activité de l’eau de 0,7, une quantité d’enzyme de 15% de la masse en substrat ainsi qu’un rapport molaire C8:0/PC de 18. Ces conditions ont ensuite été utilisées pour l’acidolyse de phospholipides microalgaux riches en DHA issus de la microalgue Tisochrysis lutea afin d’obtenir de la PC DHA-C8. Les résultats n’ont pas été concluants. L’autre voie de synthèse étudiée est l’estérification par des lipases de la GPC, de l’acide caprylique et du DHA en milieu fondu. Cette réaction a été optimisée par la technique du pas par pas. Les paramètres étudiés sont la température, la quantité d’enzyme, le rapport molaire GPC/C8:0/DHA et l’application d’un vide. Pour l’obtention de PC DHA-C8, il faut fixer chacun de ces paramètres respectivement de la sorte : 45°C, 20% d’enzyme, un rapport molaire de 1/3/15 et un vide de 100 mbar. La production de PC DHA-C8, bien qu’optimisée ne dépasse pas 2% de rendement. Cependant, durant cette expérience, il a été constaté une forte production de LPC DHA, atteignant 16% sans optimisation des paramètres de synthèse. / The enzymatic synthesis of structured phsopholipids enriched in DHA and caprylic acid (PC DHA-C8) is studied. Two different ways are studied, acidolysis and esterification. An enzymatic screening led to the choice of the immobilized lipase from Thermomyces lanuginosa (TL-IM) for the 2 reactions. Parameters of the acidolysis reaction between carpylic acid (C8:0) and sunflower phosphatidylcholine (PC) were optimized by means of an experimental design. The optimum conditions determined are a temperature of 38°C, an aw of 0.7, an amount of enzyme of 15% of the mass of substrate and a molar ratio of C8:0/PC of 18. These conditions were applied to the acidolysis of microalgal phospholipids from T. lutea, rich in DHA, in order to produce PC DHA-C8. The other studied reaction is the lipase catalyzed esterification of GPC with C8:0 and DHA in a solvent-free medium This reaction has been optimized by studying each factor independently. The parameters studied are the temperature, the amount of lipase, the molar ratio GPC/C8:0/DHA and the use of reduced pressure. In order to obtain PC DHA-C8, each of theses parameters are respectively set at: 45°C, 20% of enzyme, a molar ratio of 1/3/15 and a pressure of 100 mbar. The production of PC DHA-C8, although optimized, does not exceed a yield of 2%. However, during this experiment, a high production of LPC DHA is observed, up to 16% without optimization of the synthesis parameter.

Depuis maintenant plus de 30 ans, il est reconnu qu’au début de la maladie d’Alzheimer, le cerveau utilise moins bien le glucose, son principal carburant. Cependant, ce problème énergétique précoce dans la maladie semblerait limité au glucose et ne concernerait pas un autre carburant, celui-ci dérivé des gras, les cétones. Ces dernières sont produites par le corps après un exercice physique d’intensité modérée. Leur production est également stimulée avec la prise de suppléments alimentaires à base d’huile de noix de coco, un aliment riche en triglycérides de moyennes chaînes (MCT). La capture des cétones au cerveau augmente proportionnellement à leur concentration plasmatique. Ainsi, des conditions élevant la cétonémie augmentent aussi la capture cérébrale des cétones. Par conséquent, l’élévation de l’apport en cétones pourrait constituer une approche novatrice qui permettrait de potentiellement ralentir le développement de la maladie d’Alzheimer. Notre objectif général était d’optimiser le type de supplément MCT à utiliser afin d’élever la cétonémie de manière aigüe et, en second lieu, d’employer ce dernier en combinaison avec une seconde stratégie cétogène, l’exercice physique de type aérobie (EA). Lors de la première phase de ce projet, l’effet cétogène de différents produits alimentaires dérivant de l’huile de noix de coco (acide caprylique [C8], acide caproïque [C10], mélange de MCT typique [C8+C10]) était comparé chez 9 participants jeunes sains. Des échantillons sanguins étaient récoltés toutes les 30 min pendant 8 h. Lors de la seconde phase, le potentiel cétogène de la combinaison d’EA à une supplémentation MCT était évalué chez 10 femmes âgées saines pendant 5 jours. Les cétones plasmatiques sous ces différentes conditions étaient mesurées. Lors de cette étude, le C8 était le produit le plus cétogène testé suivi du supplément C8+C10. L’huile de noix de coco n’a pas induit une cétonémie plus élevée qu’un 8 h sans MCT. De plus, l’ajout de 5 jours d’EA a potentialisé la cétonémie observée suite à la prise de MCT C8+C10 seul. Ainsi, la combinaison de stratégies cétogènes, tant au niveau de la diversité des molécules utilisées ou des stratégies cétogènes employées, permet d’augmenter la présence de cétones dans le sang. / Abstract : Brain glucose consumption deteriorates with age, a situation that worsens with the onset of Alzheimer's disease. However, this early energy problem in the disease is limited to glucose and does not affect brain ketone uptake. Ketones are the main alternative fuel for the brain when glucose concentrations are decreased. They are produced endogenously after moderate aerobic exercise (AE) or with a medium chain triglyceride (MCT) exogenous supplement. Ketone brain uptake increases in proportion to their plasma concentration. Thus, providing a daily ketogenic fuel could help support brain energy needs during aging. Our aim was to optimize the type of MCT to use in a ketogenic supplementation and to combine this supplement with another ketogenic strategy, AE. In the first phase of this project, the acute ketogenic effect of products derived from coconut oil was compared. Nine healthy adults took various MCT supplements (coconut oil, caprylic acid [C8], capric acid [C10], classic MCT mix [C8+C10]). Blood was sampled every 30 min over 8 h. In the second phase, we evaluated the acute ketogenic potential of the combination of AE and MCT supplementation. Ten healthy older women took C8+C10 MCT supplement for 5 days combined with a 5-days AE program. Automated spectrophotometric assays where used to measure plasma ketones under these different conditions. Our results show that in this 8 h experimental design, C8 was the most ketogenic MCT followed by C8+C10. Coconut oil alone did not induce more net ketosis than an 8 h visit with no added MCT. Furthermore, the combination of AE and MCT supplementation enhanced the ketogenic response over 4 h compared to the control day. Thus, the combination of ketogenic strategies, both in terms of the diversity of the molecules or the ketogenic strategy employed, makes it possible to increase the presence of ketones in the blood.