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Actividad antifúngica in vitro y concentración mínima inhibitoria mediante microdilución de ocho plantas medicinalesRuiz Quiroz, Julio Reynaldo January 2013 (has links)
Se determinó la actividad antifúngica in vitro de los extractos metanólicos, etanólicos e hidroalcohólicos de Hypericum laricifolium (partes aéreas), Ilex guayusa Loes (hojas), Juglans neotropica Diels (corteza), Piper lineatum (hojas), Piper spp. (hojas), Psidium guajava (hojas), Cassia reticulata Wild (planta entera) y Terminalia catappa (hojas); recolectadas en los departamentos de Amazonas y Cajamarca. La actividad antifúngica se evaluó mediante el método de difusión en agar frente a Candida albicans ATCC 10231, Aspergillus niger ATCC 16404 y Microsporum canis cepa clínica y la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) por el método de microdilución colorimétrico, utilizando como controles ketoconazol y fluconazol.
Todos los extractos presentaron actividad antifúngica importante frente a C. albicans y M. canis, y ninguno tuvo actividad frente a A. niger. Las condiciones de laboratorio para determinar la concentración mínima inhibitoria (CMI) de C. albicans mediante el método de microdilución colorimétrico fueron: temperatura de incubación de 37°C, tiempo de incubación de 24 h, inóculo final 0,5-2,5 x 103 ufc/mL y 0,05 mg de resazurina por pozo; y, para M. canis fueron temperatura de incubación de 37°C, tiempo de incubación de 4 días, inóculo final de 1,2 – 6 x 104 ufc/mL y 0,05 mg de resazurina por pozo.
Mediante microdilución se determinó que 19 (79%), 18 (75%) y 24 (100 %) de los extractos investigados presentaron CMIs ≤ 1000 µg/mL, frente a Candida albicans ATCC 10231, Candida albicans cepa clínica y Microsporum canis, respectivamente. Los extractos con la mayor actividad antifúngica fueron los de Juglans neotropica Diels, Psidium guajava y Terminalia catappa; con CMIs < 100 µg/mL. El método de microdilución colorimétrico usando resazurina demostró ser útil para el screening antifúngico de extractos de plantas.
Palabras clave: Actividad antifúngica, plantas medicinales, Amazonas, microdilución colorimétrica, concentración mínima inhibitoria, Candida albicans ATCC 10231, Microsporum canis, Aspergillus niger ATCC 16440. / I was determinated the in vitro antifungal activity of ethanolic, methanolic and hydro alcoholic extracts of Hypericum laricifolium (aerial parts), Ilex guayusa loes (leaves), Juglans neotropica Diels (bark), Piper spp. (leaves), Piper lineatum (leaves), Psidium guajava (leaves), Cassia reticulata Wild (whole plant) and Terminalia catappa (leaves); colected in the departments of Amazonas and Cajamarca. The antifungal activity was evaluated by the agar diffusion method against Candida albicans ATCC 10231, Aspergillus niger ATCC 16404, and the dermatophyte Microsporum canis clinical strain and the Minimun Inhibitory Concentration (CMI) by the microdilution colorimetric method, using as controls ketoconazole and fluconazole.
All of extracts showed antifungal activity against C. albicans and M. canis and no activity against Aspergillus niger. The laboratory conditions to determine the Minimun Inhibitory Concentration (CMI) of Candida albicans through the colorimetric microdilution method were: incubation temperature of 37°C, time of incubation of 24 h, final inoculums 0,5-2,5 x 103 cfu/mL and 0,05 mg de resazurin per well; and, for Microsporum canis were: incubation temperature of 37°C, time of incubation of 4 days, final inoculums 1,2-6 x 104 cfu/mL and 0,05 mg de resazurin per well.
For microdilution were determinited that 19 (79%), 18 (75%) y 24 (100%) of extracts investigated, showed MICs ≤ 1000 µg/mL, against Candida albicans ATCC 10231, Candida albicans clinic strain and Microsporum canis respectively. The extracts with the best antifungal activity were those Juglans neotropica Diels, Psidium guajava and Terminalia catappa; with MICs < 100 µg/mL. The colorimetric microdilution method using resazurin proved useful for screening antifungal plant extracts.
Key words: Antifungal activity, medicinal plants, Amazonas, colorimetric microdilution, Minimal Inhibitory Concentration, Candida albicans ATCC 10231, Microsporum canis, Aspergillus niger ATCC 16404.
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Estandarización de la prueba de susceptibilidad antifúngica in vitro en cepas nativas de dermatofitos por el método de microdiluciónAguedo Ariza, Juvissan Medalith January 2012 (has links)
Establece una prueba de susceptibilidad antifúngica in vitro para cepas nativas de dermatofitos por el método de microdilución, siguiendo las recomendaciones del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) y con algunas modificaciones. Para lograr el óptimo crecimiento y desarrollo de los hongos dermatofitos se probaron 3 tipos de medios de cultivo, Agar Dextrosa Sabouraud 4% (SAB), Agar Papa Dextrosa (PDA) y Agar Oatmeal incubados a Temperatura ambiente (17 - 22 ºC) y a 28 ºC. Se observó que todas las cepas crecieron mejor en el medio SAB a 28°C con un tiempo de incubación de 7 días. Para la prueba de susceptibilidad antifúngica, se utilizó un inóculo de 0.2 - 5 x 104 UFC/mL; una temperatura de incubación de 35 ºC y un tiempo de incubación de 7 días. Para establecer la lectura de susceptibilidad o resistencia de las cepas, se utilizó la concentración minima inhibitoria al 80% (CMI 80). Se determinó el perfil de sensibilidad in vitro de las seis cepas de dermatofitos tales como, E.floccosum; M.canis; M.gypseum; T.rubrum, T.mentagrophytes y T.tonsurans frente a tres antifúngicos Fluconazol, Itraconazol y Terbinafina. Los valores obtenidos de CMI 80 mediante la técnica de microdilución en caldo oscilaron entre 0.25 μg/mL a 64 μg/mL para Fluconazol, varió de 0.002 a 0.063 μg/mL para Itraconazol y entre 0.002 a 0.032 μg/mL para Terbinafina. De todas los antifúngicos utilizados, la Terbinafina fue la droga con mayor actividad in vitro seguida de Itraconazol y finalmente Fluconazol. / Tesis
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