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Micotoxinas em cereais e seus produtos : desenvolvimento de método analítico e avaliação do risco da exposição na dieta / Mycotoxins in cereals and derived products : method development and dietary risk assessment

Andrade, Patrícia Diniz 12 August 2016 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Curso de Ciências Farmacêuticas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-12-09T16:25:44Z No. of bitstreams: 1 2016_PatríciaDinizAndrade.pdf: 5174142 bytes, checksum: e2bf5f6601ed133e753520d9a150236f (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2017-01-05T20:08:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_PatríciaDinizAndrade.pdf: 5174142 bytes, checksum: e2bf5f6601ed133e753520d9a150236f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-05T20:08:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_PatríciaDinizAndrade.pdf: 5174142 bytes, checksum: e2bf5f6601ed133e753520d9a150236f (MD5) / A dieta da população mundial é baseada no consumo de cereais como o arroz, milho, trigo e seus derivados, alimentos que podem estar contaminados por micotoxinas, metabólitos secundários potencialmente tóxicos ao homem e animais. O presente estudo teve como objetivos: 1) Avaliar a situação mundial da contaminação de cereais por aflatoxinas (AFs) e conduzir uma avaliação de risco da exposição na dieta; 2) Desenvolver e validar um método multi-micotoxinas para determinar aflatoxinas, ocratoxina A, fumonisinas, deoxinivalenol, zearalenona e citreoviridina em arroz, produtos de milho e produtos de trigo; 3) Otimizar um método para análise de fumonisinas totais (formas livres e ligadas/ocultas) em produtos de milho; 4) Analisar amostras de arroz, produtos de milho e produtos de trigo quanto ao teor das micotoxinas; 5) Conduzir uma avaliação de risco da exposição brasileira a estas micotoxinas pela dieta. Os dados da ocorrência mundial de AFs em cereais in natura (arroz, milho, trigo e sorgo) foram obtidos de artigos publicados e do banco de dados do GEMS/Food. Consumo de alimentos e peso corpóreo foram obtidos das 17 dietas Cluster do GEMS/Food. Os resultados indicaram alta incidência de aflaltoxinas em cereais, principalmente do arroz, com potencial risco à saúde em todos os clusters avaliados. O método multi-micotoxinas otimizado inlcui extração com acetonitrila acidificada e análise por LC-MS/MS, com LOQs entre 0,5 e 121 μg/kg. As fumonisinas ligadas/escondidas foram determinadas após a extração das formas livres (multi-micotoxinas) por meio de hidrólise básica. No total, foram analisadas 196 amostras de arroz, produtos de milho e trigo adquiridas no comércio de Brasília. Todas as amostras de produtos de trigo estavam contaminadas com pelo menos uma micotoxina, 90,7 % das amostras de produto de milho e 16% das amostras de arroz também estavam contaminadas. As micotoxinas mais prevalentes foram fumonisinas (produtos de milho), DON e ZON (produtos de trigo). As formas ligadas/ocultas foram encontradas em todas as amostras de produtos de milho, principalmente em alimentos que passaram por tratamento térmico, como massas, cereais matinais e salgadinhos. A ingestão crônica total de DON pela população total e consumidores de produtos de milho e trigo representou 31 e 107% do PMTDI, respectivamente; a ingestão aguda representou 117% da ARfD, indicando um potencial risco para a saúde. A ingestão total de fumonisinas correspondeu a 8 e 85% do PMTDI para população total e consumidores, e a de ZON 10 e 37% do PMTDI, respectivamente. Os alimentos que mais contribuíram para a ingestão de fumonisinas foi o fubá, e para a ingestão de DON e ZON, as massas. Os resultados deste estudo indicam a necessidade do monitoramento constante de micotoxinas em cereais, particularmente DON, pois devido ao seu elevado consumo, qualquer nível de contaminação pode impactar fortemente na exposição. __________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Cereals such as maize, rice, wheat and derived products are staple foods in diets around the world. They can be contaminated with mycotoxins, secondary fungi metabolites which are potentially toxic for humans and animals. The objectives of this study were: 1) to evaluate the worldwide occurrence of aflatoxins (AFs) in cereals and conduct a dietary risk assessment; 2) to develop and validate a multi-mycotoxin method to determine the presence of aflatoxins, ochratoxin A, fumonisins, deoxynivalenol, zearalenone and citreoviridin in rice, maize-based products and wheat-based products; 3) to optimize a method to determine total fumonisins (free and bound/hidden forms) in maize-based products; 4) to evaluate the occurrence of these mycotoxins in rice, maize-based products and wheat-based products; and 5) to conduct a dietary risk assessment of these mycotoxins for the Brazilian population. Data on the worldwide occurrence of AFs in raw cereals (rice, maize, wheat and sorghum) were obtained from published papers and from the GEMS/Food database; food consumption and body weight data were obtained from the 17 Cluster Diets. Results indicated a high incidence of aflatoxins in cereals, mainly rice, and a potential health risk for all clusters evaluated. The validated multi-mycotoxin method was based on extraction with acidified acetonitrile and LC-MS/MS analysis, with LOQs ranging from 0.5 to 121 μg/kg. Bound/hidden fumonisins were determined after extraction of the free forms (multi-mycotoxin), using a basic hydrolysis procedure. A total of 196 samples of rice, maize and wheat-based products were analyzed. All samples of wheat-based products were contaminated with at least one mycotoxin; 90.7% of maize-based products and 16% of rice samples were also contaminated. The most prevalent mycotoxins were fumonisins in maize-based products, and DON and ZON in wheat-based products. Bound/hidden forms were found in all maize products, mainly in samples submitted to heat treatments such as pasta, breakfast cereals and maize snacks. The total DON chronic intake estimated for total population and for consumers of maize and wheat-based products represented 31 and 107% of the PMTDI, respectively; acute intake represented 117% of the ARfD, indicating a potential health risk. Total fumonisin intake for the total population and consumers represented 8 and 85% of the PMTDI, and ZON intake represented 10 and 37% of the PMTDI, respectively. Foods that most contributed to total intakes were maize meal for fumonisins and pasta for DON and ZON exposure. Results indicate that the occurrence of mycotoxins should be continuously monitored for cereals, particularly DON, since their occurrence in highly consumed products have a significant impact on dietary exposure estimates.
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Pesquisa de Clostridium difficile em carne bovina homogeneizada comercializada na região do Distrito Federal

Martins, André Ricardo Lucas 30 June 2017 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Saúde Animal, 2017. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2017-08-24T16:38:51Z No. of bitstreams: 1 2017_AndréRicardoLucasMartins.pdf: 1221325 bytes, checksum: 041d4c1bb3acb33ab97299edfdfad788 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-10-05T14:37:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_AndréRicardoLucasMartins.pdf: 1221325 bytes, checksum: 041d4c1bb3acb33ab97299edfdfad788 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-05T14:37:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_AndréRicardoLucasMartins.pdf: 1221325 bytes, checksum: 041d4c1bb3acb33ab97299edfdfad788 (MD5) Previous issue date: 2017-10-05 / Clostridium difficile é uma bactéria formadora de esporos anaeróbicos grampositivos que causa doença em seres humanos e animais, principalmente aqueles submetidos à antibioticoterapia. Embora as pesquisas com o C. difficile sejam crescentes, as formas de transmissões ainda não são muito claras, entretanto, muitos autores associam os alimentos contaminados como principal forma de contaminação por essa bactéria. Este trabalho teve como objetivo fazer o isolamento microbiológico de C. difficile em carne bovina homogeneizada comercializada na região do Distrito Federal, bem como a detecção dessa bactéria por meio da reação em cadeia de polimerase. Foram analisadas 82 amostras, não sendo feito o isolamento microbiológico do C. difficile em nenhuma delas. Entretanto, 06 (7,3%) amostras apresentaram a presença de C. difficile na PCR. Embora não tenha tido sucesso o isolamento microbiológico do C. difficile nesta pesquisa, a técnica de PCR mostrou se uma ferramenta eficaz quanto à detecção desse microrganismo. Por se tratar de um estudo pioneiro realizado no Distrito Federal e região, mais estudos devem ser feitos a fim de aprimorar técnicas de isolamento do C. difficile em alimentos, considerando a importância desse microrganismo para a saúde pública. / Clostridium difficile is a gram-positive anaerobic spore-forming bacterium that causes disease in humans and animals, especially those undergoing antibiotic therapy. Although the studies with C. difficile are increasing, the forms of transmissions are still not very clear; however, many authors partner contaminated foods as the main form of contamination by this bacterium. The aim of this work were to isolate the C. difficile from homogenized beef commercialized at the Federal District area, as well as to detect this bacterium by the polymerase chain reaction. Eighty-two samples were analyzed, and no microbiological isolation of C. difficile was detected in any one of them. However, 06 (7.3%) samples showed the presence of C. difficile by PCR.Although the microbiological isolation of C. difficile was not successful in this study, the PCR technique proved to be an effective tool for the detection of this microorganism. Since this is a pioneering study carried out in the Federal District and region, but more studies should be done to improve techniques for isolating C. difficile in food, considering the importance of this microorganism to public health.

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