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Análise bioquímica dos produtos de excreção/secreção de larvas de Dermatobia hominisBrant, Milena Palmeira Reis Caldeira [UNESP] January 2004 (has links) (PDF)
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brant_mprc_me_botfmvz.pdf: 347841 bytes, checksum: 07a65a6f458afcc54be76d10fc51457e (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O presente trabalho foi desenvolvido com o objetivo de caracterizar os produtos de excreção/secreção (PE/S) de larvas de Dermatobia hominis, especialmente, no que se refere à atividade proteolítica desses produtos. Os PE/S foram obtidos de larvas de primeiro estágio (L1) cultivadas em laboratório e de larvas de segundo (L2) e terceiro (L3) estágios colhidas de bovinos parasitados. O perfil das proteínas foi obtido pela eletroforese dos PE/S em gel de poliacrilamida contendo sódio dodecil sulfato (SDS-PAGE) e a atividade proteolítica foi investigada utilizando gelatina, azocaseína e N-a-benzoil-arginina-nitroanilida (BAPNA) como substratos. Para caracterização das proteases foram realizados ensaios utilizando estes mesmos substratos, nos quais as amostras foram tratadas com os inibidores: PMSF, TPCK, TLCK, DCI, E-64, EDTA, Elastatinal, Leupeptina, Fenantrolina e Antipaína. Nos PE/S de L1 foram detectadas exclusivamente proteases com peso molecular aparente acima de 168 kDa, cuja inibição revelou pertencerem aos grupos das metalo-proteases e serina-proteases. Os zimogramas dos PE/S de L2 e L3 em géis copolimerizados com gelatina revelaram uma ampla faixa de atividade proteolítica, na qual estavam presentes proteases de alto, médio e baixo pesos moleculares aparentes. Nos ensaios realizados com inibidores de proteases, utilizando os três substratos, as proteases presentes em L2 e L3 foram identificadas como pertencentes ao grupo das serina-proteases, sendo em L3, predominantemente, do tipo tripsina. As alterações nos padrões de proteólise e nas características bioquímicas das proteases presentes nos três estágios larvais discuti- se à atividade das larvas em cada fase do seu desenvolvimento. / In the present investigation the biochemical characteristics of the Dermatobia hominis larvae secretory/excretory products (PE/S) were analyzed mainly regard to their proteolytic activities. The PE/S of first-instar larvae were collected from larvae reared in the laboratory and of the second and third instars from larvae removed from infested cattle.The PE/S were tested in a sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) to identify their proteic profiles and the proteases activity were investigated using gelatine, azocasein, and N-a-benzoil-arginine-nitroanilide (BAPNA) as substrates. The proteases characterizations were performed by treating PE/S samples by the following proteases inhibitors: PMSF, TPCK, DCI, E-64, EDTA, Elastatinal, Leupeptine, Phenatroline, and Antipain. SDS-PAGE-Gelatin profiles of L1 PE/S revealed only proteases with molecular weight above 168 KDa whereas profiles from L2 and L3 PE/S revealed a high range of proteolytic activity, including high, medium and low molecular weight proteases. The assays performed with the protease inhibitors, and gelatin and azocasein as substrates, revealed that metalloprotease is the major class of proteases present in the PE/S of L1 besides the low content of serine-proteases. The major class of proteases present in the PE/S of L2 and L3 was characterized as serine-proteases, being in L3 predominantly of trypsin type. The changes in the proteolytic patterns and biochemical characteristics of the proteases found in all three instar larvae of D. hominis were with the larval activity in each phase of their development.
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Proteinograma e indicadores bioquímicos no sangue e no líquido peritoneal de bovinos acometidos com desordens digestivasSANTOS, Jomel Francisco dos 30 October 2017 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-02-21T14:23:49Z
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Previous issue date: 2017-10-30 / The aim of this study was to evaluate the systemic and local response by means of the
hemogram, biochemical and proteinogram analyzes simultaneously evaluated in the blood and peritoneal fluid (PF) of cattle affected with digestive disorders. Twenty-seven adult cattle,
half-dairy breeds and semi-intensive breeding were used at the Garanhuns Cattle Clinic, a
UFRPE school hospital. The animals were divided into two groups according to the disease
that affected them: (GI: intestinal disorders) (n = 14) and (GII: reticulites) (n = 13). Firstly,
the clinical examination was performed and blood samples were taken to perform the
hemogram, plasma protein and fibrinogen determination and the serum to perform the
biochemical and polyacrylamide gel proteinogram (SDS-PAGE) analyzes. At the same time,
PF samples were collected for physical, cytological, measurement of biochemical analytes
and electrophoretic profile (SDS-PAGE). The biochemical determinations in blood and PF
were: total protein (TP), albumin, globulin, albumin/globulin (A/G) ratio, glucose, L-lactate,
urea, creatinine, triglycerides, cholesterol, enzymatic activities of aspartate aminotransferase
(AST), gamma glutamyltransferase (GGT), creatine kinase (CK) and lactate dehydrogenase
(LDH), sodium, calcium and potassium ions and chlorides. The analysis of variance with a
5% probability level was used to compare the groups regarding the hematological,
cytological, [TP] LP/ [TP] and blood serum levels and biochemical analyzes, which were also
compared between the two body fluids analyzed (blood and PF). Both groups presented
clinical impairment, however, apathy, inappetence, dehydration and gastrointestinal
hypomotility were more frequent in GI animals. In the cytological analysis of PF, PMN was
predominant in both groups (P>0.05). Hematologic response revealed neutrophilic
leukocytosis with regenerative left shift and hyperfibrinogenemia in both groups (P>0.05).
Albumin (ALB), transferrin, ceruloplasmin, haptoglobin, α1-acid glycoprotein (α1-GPA), PM
23.000 Da, α1-antitrypsin, IgA and IgG were identified in blood and PF. It was observed that
the values of the ratio of the proteins identified in both body fluids were high and showed a
statistical difference between the groups (P <0.05), with higher TP, ALB, transferrin, α1-GPA
and IgG, demonstrating that the acute phase response was more evident in animals with
intestinal disorders. The biochemical evaluation of the blood showed that TP, globulin,
cholesterol and GGT were significantly higher in GII (P<0.05), while the A/G ratio was
higher in GI (P<0.05). In PF, albumin and CK were significantly higher in GI (P<0.05). When
comparing blood and PF concentrations, a significant increase of L-lactate in PF in both
groups (P <0.05) was observed, which was related to the severity of the alterations present in the abdominal cavity. In view of the results, it can be observed that intestinal disorders and
reticulitis induced a systemic and local response characterized by clinical, hematological,
cytological, biochemical and proteinogram changes in both blood and PF. The α1-GPA,
haptoglobin and transferrin proteins measured on the PF were good biomarkers. In addition,
simultaneous evaluation in blood and PF of protein concentration and L-lactate can be
recommended as a tool for diagnostic assistance and prognosis of bovine digestive disorders. / O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta sistêmica e local por meio do hemograma, análises bioquímicas e do proteinograma avaliados simultaneamente no sangue e no líquido peritoneal (LP) de bovinos acometidos com desordens digestivas. Utilizou-se 27 bovinos adultos, mestiços de aptidão leiteira e de criação semi-intensiva atendidos na Clínica de Bovinos de Garanhuns, hospital escola da UFRPE. Os animais foram distribuídos em dois grupos de acordo com a enfermidade que os acometiam: (GI: desordens intestinais) (n=14) e (GII: reticulites) (n=13). Primeiramente realizou-se o exame clínico e posteriormente foram colhidas amostras de sangue para realização do hemograma, determinação plasmática da proteína e do fibrinogênio e obtenção do soro para realização das análises bioquímicas e do proteinograma em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE). Ao mesmo tempo, amostras de LP foram colhidas para avaliação física, citológica, mensuração de analitos bioquímicos e realização do perfil eletroforático (SDS-PAGE). As determinações bioquímicas no sangue e no LP foram: proteína total (PT), albumina, globulina, relação albumina/globulina (A/G), glicose, L-lactato, ureia, creatinina, triglicérides, colesterol, as atividades enzimáticas da aspartato aminotransferase (AST), gama glutamiltransferase (GGT), creatino quinase (CK) e lactato desidrogenase (LDH), os íons sódio, cálcio e potássio e cloretos. Foi utilizada análise de variância com nível de 5% de probabilidade para comparar os grupos quanto a resposta hematológica, citológica, valores de relação [PT] LP / [PT] soro sanguíneo e análises bioquímicas, as quais também foram comparadas entre os dois fluídos corpóreos analisados
(sangue e LP). Ambos os grupos apresentaram comprometimento clínico, no entanto, a apatia, a inapetência, a desidratação e a hipomotilidade gastrointestinal foram mais frequentes nos animais do GI. À análise citológica do LP, observou-se predomínio de PMN em ambos os grupos (P>0,05). A resposta hematológica revelou leucocitose por neutrofilia com desvio a esquerda regenerativo e hiperfibrinogenemia em ambos os grupos (P>0,05). Identificou-se no sangue e no LP as proteínas albumina (ALB), transferrina, ceruloplasmina, haptoglobina, α1-glicoproteína ácida (α1-GPA), PM 23.000 Da, α1-anti-tripsina, IgA e IgG. Observou-se que
os valores da relação das proteínas identificadas em ambos fluídos corpóreos estavam elevados e demonstraram diferença estatística entre os grupos (P<0,05), sendo a PT, ALB, transferrina, α1-GPA e a IgG mais elevadas no GI, demonstrando que a resposta de fase aguda foi mais evidente nos animais com desordens intestinais. A avaliação bioquímica do sangue demonstrou que a PT, globulina, colesterol e GGT foram maiores significativamente no GII (P<0,05), enquanto que a relação A/G foi maior no GI (P<0,05). Já no LP, a albumina e a CK foram maiores significativamente no GI (P<0,05). Quando comparou-se as
concentrações sanguíneas e no LP, ressalta-se o aumento significativo do L-lactato no LP em ambos os grupos (P<0,05), o que demonstrou estar relacionado à gravidade das alterações presentes na cavidade abdominal. Diante dos resultados, pode-se observar que as desordens intestinais e as reticulites induziram resposta sistêmica e local caracterizada pelas alterações clínicas, hematológicas, citológicas, bioquímicas e do proteinograma tanto no sangue quanto no LP. As proteínas α1-GPA, haptoglobina e a transferrina, mensuradas no LP se mostraram bons biomarcadores. Além disso, a avaliação simultânea no sangue e no LP da concentração proteica e do L-lactato pode ser recomendada como ferramenta de auxílio diagnóstico e
prognóstico das desordens digestivas dos bovinos.
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Produção de bebida mista de extrato hidrossolúvel de soja e suco de uva submetida a diferentes doses de radiação gama / Production of mixed beverage of soybean hidrosoluble extract and grape juice submitted to different gamma radiation dosesBarros, Érica Amanda de [UNESP] 21 January 2016 (has links)
Submitted by ÉRICA AMANDA DE BARROS null (erica27ab@gmail.com) on 2016-03-17T21:03:52Z
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Previous issue date: 2016-01-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A irradiação é uma técnica de conservação ainda pouco aceita para alimentos e bebidas no Brasil, devido a grande parte da população desconhecer seus mecanismos de ação. Dessa forma, o objetivo desse estudo foi avaliar os aspectos físico-químico, bioquímico, microbiológico e sensorial de bebida mista de extrato hidrossolúvel de soja (EHS) e suco de uva, submetida à radiação gama. Neste estudo, foram realizados quatro experimentos, visando selecionar o melhor cultivar de soja (BRS-213, BRS-258 e EMBRAPA-48) em relação às características bioativas após a aplicação de diferentes doses de radiação gama (experimento 1). No segundo experimento, selecionou-se o método mais apropriado de produção do EHS a partir de duas formas de extração; determinou-se também a dose de radiação adequada para se aplicar ao EHS (etapa 1) e ao suco de uva (etapa 2), no experimento 3. No experimento 4 foi determinada a temperatura ideal de armazenamento e a adição ou não do conservante ácido benzoico em bebida mista de EHS e suco de uva. Para o experimento 1, realizou-se análises bioquímicas, sendo que nos demais, foram realizadas análises físico-químicas, bioquímicas, microbiológicas e sensoriais. No experimento 4, realizou-se também o teste de vida de prateleira. A partir dos resultados submetidos à estatística descritiva e inferencial (testes paramétricos - t e ANOVA; e testes não paramétricos -Kruskall-Wallis e Friedmann) constatou-se que a elevação da dose de radiação gama aumentou o teor dos compostos fenólicos para os cultivares de soja BRS-213 e BRS-258, bem como a atividade da enzima superóxido dismutase no cultivar BRS-213 (experimento 1). O EHS extraído a frio apresentou maior teor de proteína, lipídios e compostos fenólicos que o EHS extraído a quente. Por outro lado, a segunda extração apresentou melhores resultados na análise sensorial (experimento 2). No experimento 3 o EHS (etapa 1) submetido a 8 kGy apresentou menor teor de proteína e de compostos fenólicos. O EHS e o suco de uva (etapa 2) submetidos a 8 kGy demonstraram variação na cor e redução das notas do atributo sabor quando comparados aos demais tratamentos. A partir da dose de 2 kGy eliminou-se os bolores e leveduras do suco de uva. A bebida mista refrigerada e com adição de ácido benzoico apresentou maior vida de prateleira (9 meses). Concluiu-se que a dose de 4 kGy associada a refrigeração e ao conservante foi indicada para bebida mista de EHS com suco de uva, preservando suas características fitossanitárias, físico-químicas, bioquímicas e sensoriais. / The gamma irradiation is a conservation technique still not accepted for food and beverages in Brazil, due to much of the population ignore their mechanisms of action. Thus, the aim of this study was to evaluate the physic-chemical, biochemical, microbiological and sensory aspect of mixed beverage of soybean hydrosoluble extract and grape juice, submitted to gamma radiation. In this study, four experiments were conducted in order to select the best soybean cultivar regarding the bioactive characteristics (BRS-213, BRS 258 and EMBRAPA-48) after application of different doses of gamma radiation (experiment 1). In the second experiment, we selected the most appropriate method of producing soybean soybean hydrosoluble extract (EHS) from two forms of extraction. Also determined the adequate dosage of radiation to be applied to the EHS (step 1) and grape juice (step 2), in experiment 3. And the experiment 4 was determined the ideal storage temperature and with or without addition of the preservative benzoic acid in the mixed beverage of EHS and grape juice. For the experiment 1 was performed biochemical analyzes, and in the other were conducted in physical-chemical, biochemical, microbiological and sensory analiyses. In experiment 4, it was also carried shelf life test. When results submitted to descriptive and inferential statistics (tests parametric- t and ANOVA, and nonparametric tests -Kruskall-Wallis and Friedman) it was found that the elevation of gamma radiation dose increased the content of phenolic compounds for the soybean cultivars BRS-213 and BRS-258 and SOD activity in cultivar BRS-213 (experiment 1). The EHS cold extraction has a higher protein, lipid and phenolic compounds content that the EHS hot extraction. On the other hand, the second extraction showed better results in sensory analysis (experiment 2). In experiment 3 EHS (step 1) submitted to 8 kGy showed lower protein and phenolic compounds content. The EHS and grape juice (step 2) submitted to 8 kGy showed variation in color and reduction of notes of flavor attribute when compared to other treatments. From the dose of 2 kGy eliminates molds and yeast of grape juice. The refrigerated mixed beverage and with the addition of benzoic acid had longer shelf life (9 months). It was concluded that the dose of 4 kGy associated with refrigeration and preservative was nominated for mixed beverage of EHS with grape juice, preserving their phytosanitary characteristics, physical-chemical, biochemical and sensory.
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Padrão nutricional do atleta adulto amazonenseNascimento, Ozanildo Vilaça do 30 August 2006 (has links)
Submitted by Kamila Costa (kamilavasconceloscosta@gmail.com) on 2015-06-12T18:44:46Z
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Previous issue date: 2006-08-30 / BASA - Banco da Amazônia / The present study evaluated Athletes Amazonenses Nutritional State, participants of the program Amazon Champion 2005. The descriptive and traverse research was constituted of 90 voluntary adult athletes of the masculine gender of different sporting modalities classified as athletes of high income. In the diagnosis of the nutritional state they were used measured anthropometrics and of the body composition. To diagnose the anemia the hemoglobin dosage it was used. In the obtaining of the information of the basic pattern of the feeding addressed questionnaire was used, to the frequency of the daily, weekly and monthly alimentary consumption trying to identify the dietary behavior. In the analysis of IMC the overweight presence was evidenced in 47,8%, mainly among the youngest athletes. For to you varied related with the caloric reservation, 94, .4% of the athletes presented deficits, having declined of his/her intensity in function of the ages. In the reservation protease 34, 4% presented an inadequacy profile among the athletes having a lineal influence in function of the ages. Those results evidence divergence in the values of the variables anthropometrics in function of the different modalities. Anemia occurrence was not verified. independently of the investigated age group. The investigation of the socioeconomic factors evidenced that the athletes in his/her majority are constituted by bachelors, studying the fundamental teaching gaining an income monthly medium equal or superior to 2 minimum wages. In the decisive factors of the athletes' relatives' health significant values of occurrence of degenerative chronic diseases were registered. The alimentary pattern characterized as main foods of origin protein and carbohydrate, being incorrect his/her consumption, delineating like this a diet that can interfere in the health and those athletes' performance / O presente estudo avaliou do Estado Nutricional dos Atletas Adultos Amazonenses, participantes do programa Amazonas Campeão 2005. A pesquisa descritiva e transversal foi constituída de 90 atletas adultos voluntários do gênero masculino de diferentes modalidades esportivas classificados como atletas de alto rendimento. No diagnóstico do estado nutricional foram utilizadas medidas antropométricas e da composição corporal. Para diagnosticar a anemia utilizou-se a dosagem de hemoglobina. Na obtenção das informações do padrão básico da alimentação foi utilizado questionário direcionado, à freqüência do consumo alimentar diário, semanal e mensal procurando identificar o comportamento dietético. Na análise do IMC ficou evidenciado a presença de sobrepeso em 47,8%, principalmente entre os atletas mais jovens. Para as variáveis relacionadas com a reserva calórica, 94,4% dos atletas apresentaram déficits, havendo declíneo da sua intensidade em função das idades. Na reserva protéica 34, 4% apresentaram um perfil de inadequação entre os atletas havendo uma influência linear em função das idades. Esses resultados evidenciam divergências nos valores das variáveis antropométricas em função das diferentes modalidades. Não se constatou ocorrência de anemia, independentemente da faixa etária investigada. A investigação dos fatores socioeconômicos evidenciou que os atletas na sua maioria é constituída por solteiros, cursando o ensino fundamental auferindo uma renda média mensal igual ou superior a 2 salários mínimos. Nos fatores determinantes da saúde dos familiares dos atletas foram registrados valores significativos de ocorrência de doenças crônicas degenerativas. O padrão alimentar caracterizou como principais alimentos os de origem protéica e carboidratos, sendo incorreto seu consumo, delineando assim uma dieta que pode interferir na saúde e performance desses atletas.
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