En esta investigación se han estudiado las toxinas del veneno de la anémona de mar Anthothoe chilensis (Lesson, 1830), a partir de los tentáculos y cuerpos de animales vivos recolectados entre 8 y 10 metros de profundidad en las Isla Cabinza-San Lorenzo. Se utilizaron tres fracciones precipitadas con sulfato de amonio y tres fracciones precipitadas con acetona para realizar ensayos in vitro y un ensayo in vivo. Se observó que las proteínas contenidas en el veneno de A. chilensis tienen un peso molecular entre 14 y 94 kDa. Se evidenció la presencia de carbohidratos en todas las fracciones evaluadas y mediante tinción PAS de geles PAGE-SDS se detectó la presencia de glicoproteínas. Todas las fracciones mostraron tener actividad hemolítica, fosfolipásica y proteolítica. La fracción Ach1at tuvo la actividad hemolítica más alta, la fracción acetónica Ach3at tuvo la mayor actividad fosfolipásica. Cuando las fracciones se probaron sobre el desarrollo embrionario de huevos de erizo de mar, éstas mostraron efectos en la morfología tales como blástulas lisadas, exogastrulación, prismas y larvas pluteus anormales. Entre los efectos citológicos se observaron gástrulas con menos configuraciones mitóticas, núcleos heteropicnóticos, cariorresis y núcleos gigantes. Las fracciones ensayadas mostraron producir hipersensibilidad tipo I en ratones albinos, sin llegar a desencadenar shock anafiláctico. / --- In this investigation toxins of the venom of the sea anemone Anthothoe chilensis (Lesson, 1830) have been studied, from the tentacles and bodies of alive animals collected between 8 and 10 meters of depth in the Island Cabinza-San Lorenzo. Three precipitated fractions with ammonium sulfate and three precipitated fractions with acetone were used to make assays in vitro and one assay in vivo. It was observed that the proteins contained in the venom of A. chilensis have a molecular weight between 14 and 94 kDa. The presence of carbohydrates was evidenced in all the evaluated fractions and by stain PAS of gels SDS-PAGE the glycoproteins presence were detected. All the fractions showed to have hemolytic, phospholipase and proteolytic activities. The acetonic fraction I had the higher hemolytic activity, the acetonic fraction III had the greater phospholipasic activity. When the fractions were assayed on the sea urchin eggs embryonic development, they showed to have morphologic effects like lisated blastules, early exogastrulation, and abnormal prisms and pluteus larvae. Cytological effects like gastrulaes with less mitotic configurations, heteropycnotic nuclei, karyorrhexis and giant nuclei were observed. The evaluated fractions showed to produce hypersensitivity type I in mice, without getting to trigger anaphylactic shock.

En esta investigación se han estudiado las toxinas del veneno de la anémona de mar Anthothoe chilensis (Lesson, 1830), a partir de los tentáculos y cuerpos de animales vivos recolectados entre 8 y 10 metros de profundidad en las Isla Cabinza-San Lorenzo. Se utilizaron tres fracciones precipitadas con sulfato de amonio y tres fracciones precipitadas con acetona para realizar ensayos in vitro y un ensayo in vivo. Se observó que las proteínas contenidas en el veneno de A. chilensis tienen un peso molecular entre 14 y 94 kDa. Se evidenció la presencia de carbohidratos en todas las fracciones evaluadas y mediante tinción PAS de geles PAGE-SDS se detectó la presencia de glicoproteínas. Todas las fracciones mostraron tener actividad hemolítica, fosfolipásica y proteolítica. La fracción Ach1at tuvo la actividad hemolítica más alta, la fracción acetónica Ach3at tuvo la mayor actividad fosfolipásica. Cuando las fracciones se probaron sobre el desarrollo embrionario de huevos de erizo de mar, éstas mostraron efectos en la morfología tales como blástulas lisadas, exogastrulación, prismas y larvas pluteus anormales. Entre los efectos citológicos se observaron gástrulas con menos configuraciones mitóticas, núcleos heteropicnóticos, cariorresis y núcleos gigantes. Las fracciones ensayadas mostraron producir hipersensibilidad tipo I en ratones albinos, sin llegar a desencadenar shock anafiláctico. / In this investigation toxins of the venom of the sea anemone Anthothoe chilensis (Lesson, 1830) have been studied, from the tentacles and bodies of alive animals collected between 8 and 10 meters of depth in the Island Cabinza-San Lorenzo. Three precipitated fractions with ammonium sulfate and three precipitated fractions with acetone were used to make assays in vitro and one assay in vivo. It was observed that the proteins contained in the venom of A. chilensis have a molecular weight between 14 and 94 kDa. The presence of carbohydrates was evidenced in all the evaluated fractions and by stain PAS of gels SDS-PAGE the glycoproteins presence were detected. All the fractions showed to have hemolytic, phospholipase and proteolytic activities. The acetonic fraction I had the higher hemolytic activity, the acetonic fraction III had the greater phospholipasic activity. When the fractions were assayed on the sea urchin eggs embryonic development, they showed to have morphologic effects like lisated blastules, early exogastrulation, and abnormal prisms and pluteus larvae. Cytological effects like gastrulaes with less mitotic configurations, heteropycnotic nuclei, karyorrhexis and giant nuclei were observed. The evaluated fractions showed to produce hypersensitivity type I in mice, without getting to trigger anaphylactic shock.

Estudia bioquímicamente el veneno de Phymactis papillosa var. rubra-viridis, una de las 8 variedades de esta especie. Las anémonas son colectadas en la bahía de Ancón y luego trasladadas al laboratorio, donde el veneno es obtenido mediante shock hipotónico, colocando 7 ejemplares en un beaker con 30 ml de agua destilada, durante 60 minutos. Luego, el material es filtrado en papel Whatman y centrifugado a 12000 rpm por 30 minutos. El sobrenadante es liofilizado. El análisis electroforético del veneno soluble de Phymactis papillosa var. rubra-viridis muestra la presencia de 5 bandas proteicas con pesos moleculares entre 5 y 25.1 kDa. El veneno soluble es fraccionado por cromatografía de filtración en una columna de Sephadex G-50, obteniéndose cuatro picos de proteína (I, II, III y IV). Tanto en el veneno soluble como en las fracciones colectadas se mide actividad proteolítica, hialuronidasa, fosfolipasa, fosfatasa ácida y fosfatasa alcalina; así como, actividad hemolítica y neurotóxica. Se evidencia actividad proteolítica sobre caseína, en el veneno soluble y en los picos I y III. No se detecta actividad de hialuronidasa, fosfolipasa, fosfatasa ácida y fosfatasa alcalina. La actividad hemolítica, ensayada sobre eritrocitos humanos, se encuentra en el veneno soluble y en el pico II. Finalmente, tanto el veneno soluble como el pico III muestran ser neurotóxicos al ser inyectados intraperitonealmente en ratones albinos. Se concluye que el veneno soluble de P. papillosa var. rubra-viridis tiene actividad proteolítica, hemolítica y neurotóxica. / Tesis