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Estudio de las toxinas de la anémona de mar Anthothoe chilensis (Lesson, 1830) (Actiniaria: Sagartiidae)

Quiroz Garrido, Yojana Mercedes January 2005 (has links)
En esta investigación se han estudiado las toxinas del veneno de la anémona de mar Anthothoe chilensis (Lesson, 1830), a partir de los tentáculos y cuerpos de animales vivos recolectados entre 8 y 10 metros de profundidad en las Isla Cabinza-San Lorenzo. Se utilizaron tres fracciones precipitadas con sulfato de amonio y tres fracciones precipitadas con acetona para realizar ensayos in vitro y un ensayo in vivo. Se observó que las proteínas contenidas en el veneno de A. chilensis tienen un peso molecular entre 14 y 94 kDa. Se evidenció la presencia de carbohidratos en todas las fracciones evaluadas y mediante tinción PAS de geles PAGE-SDS se detectó la presencia de glicoproteínas. Todas las fracciones mostraron tener actividad hemolítica, fosfolipásica y proteolítica. La fracción Ach1at tuvo la actividad hemolítica más alta, la fracción acetónica Ach3at tuvo la mayor actividad fosfolipásica. Cuando las fracciones se probaron sobre el desarrollo embrionario de huevos de erizo de mar, éstas mostraron efectos en la morfología tales como blástulas lisadas, exogastrulación, prismas y larvas pluteus anormales. Entre los efectos citológicos se observaron gástrulas con menos configuraciones mitóticas, núcleos heteropicnóticos, cariorresis y núcleos gigantes. Las fracciones ensayadas mostraron producir hipersensibilidad tipo I en ratones albinos, sin llegar a desencadenar shock anafiláctico. / --- In this investigation toxins of the venom of the sea anemone Anthothoe chilensis (Lesson, 1830) have been studied, from the tentacles and bodies of alive animals collected between 8 and 10 meters of depth in the Island Cabinza-San Lorenzo. Three precipitated fractions with ammonium sulfate and three precipitated fractions with acetone were used to make assays in vitro and one assay in vivo. It was observed that the proteins contained in the venom of A. chilensis have a molecular weight between 14 and 94 kDa. The presence of carbohydrates was evidenced in all the evaluated fractions and by stain PAS of gels SDS-PAGE the glycoproteins presence were detected. All the fractions showed to have hemolytic, phospholipase and proteolytic activities. The acetonic fraction I had the higher hemolytic activity, the acetonic fraction III had the greater phospholipasic activity. When the fractions were assayed on the sea urchin eggs embryonic development, they showed to have morphologic effects like lisated blastules, early exogastrulation, and abnormal prisms and pluteus larvae. Cytological effects like gastrulaes with less mitotic configurations, heteropycnotic nuclei, karyorrhexis and giant nuclei were observed. The evaluated fractions showed to produce hypersensitivity type I in mice, without getting to trigger anaphylactic shock.
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Estudio de las toxinas de la anémona de mar Anthothoe chilensis (Lesson, 1830) (Actiniaria: Sagartiidae)

Quiroz Garrido, Yojana Mercedes January 2005 (has links)
En esta investigación se han estudiado las toxinas del veneno de la anémona de mar Anthothoe chilensis (Lesson, 1830), a partir de los tentáculos y cuerpos de animales vivos recolectados entre 8 y 10 metros de profundidad en las Isla Cabinza-San Lorenzo. Se utilizaron tres fracciones precipitadas con sulfato de amonio y tres fracciones precipitadas con acetona para realizar ensayos in vitro y un ensayo in vivo. Se observó que las proteínas contenidas en el veneno de A. chilensis tienen un peso molecular entre 14 y 94 kDa. Se evidenció la presencia de carbohidratos en todas las fracciones evaluadas y mediante tinción PAS de geles PAGE-SDS se detectó la presencia de glicoproteínas. Todas las fracciones mostraron tener actividad hemolítica, fosfolipásica y proteolítica. La fracción Ach1at tuvo la actividad hemolítica más alta, la fracción acetónica Ach3at tuvo la mayor actividad fosfolipásica. Cuando las fracciones se probaron sobre el desarrollo embrionario de huevos de erizo de mar, éstas mostraron efectos en la morfología tales como blástulas lisadas, exogastrulación, prismas y larvas pluteus anormales. Entre los efectos citológicos se observaron gástrulas con menos configuraciones mitóticas, núcleos heteropicnóticos, cariorresis y núcleos gigantes. Las fracciones ensayadas mostraron producir hipersensibilidad tipo I en ratones albinos, sin llegar a desencadenar shock anafiláctico. / In this investigation toxins of the venom of the sea anemone Anthothoe chilensis (Lesson, 1830) have been studied, from the tentacles and bodies of alive animals collected between 8 and 10 meters of depth in the Island Cabinza-San Lorenzo. Three precipitated fractions with ammonium sulfate and three precipitated fractions with acetone were used to make assays in vitro and one assay in vivo. It was observed that the proteins contained in the venom of A. chilensis have a molecular weight between 14 and 94 kDa. The presence of carbohydrates was evidenced in all the evaluated fractions and by stain PAS of gels SDS-PAGE the glycoproteins presence were detected. All the fractions showed to have hemolytic, phospholipase and proteolytic activities. The acetonic fraction I had the higher hemolytic activity, the acetonic fraction III had the greater phospholipasic activity. When the fractions were assayed on the sea urchin eggs embryonic development, they showed to have morphologic effects like lisated blastules, early exogastrulation, and abnormal prisms and pluteus larvae. Cytological effects like gastrulaes with less mitotic configurations, heteropycnotic nuclei, karyorrhexis and giant nuclei were observed. The evaluated fractions showed to produce hypersensitivity type I in mice, without getting to trigger anaphylactic shock.
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Caracterización bioquímica y acción biológica del veneno de la anémona de mar Phymactis papillosa var. rubra - viridis

Cuya Olivares, Antony Francisco January 2017 (has links)
Estudia bioquímicamente el veneno de Phymactis papillosa var. rubra-viridis, una de las 8 variedades de esta especie. Las anémonas son colectadas en la bahía de Ancón y luego trasladadas al laboratorio, donde el veneno es obtenido mediante shock hipotónico, colocando 7 ejemplares en un beaker con 30 ml de agua destilada, durante 60 minutos. Luego, el material es filtrado en papel Whatman y centrifugado a 12000 rpm por 30 minutos. El sobrenadante es liofilizado. El análisis electroforético del veneno soluble de Phymactis papillosa var. rubra-viridis muestra la presencia de 5 bandas proteicas con pesos moleculares entre 5 y 25.1 kDa. El veneno soluble es fraccionado por cromatografía de filtración en una columna de Sephadex G-50, obteniéndose cuatro picos de proteína (I, II, III y IV). Tanto en el veneno soluble como en las fracciones colectadas se mide actividad proteolítica, hialuronidasa, fosfolipasa, fosfatasa ácida y fosfatasa alcalina; así como, actividad hemolítica y neurotóxica. Se evidencia actividad proteolítica sobre caseína, en el veneno soluble y en los picos I y III. No se detecta actividad de hialuronidasa, fosfolipasa, fosfatasa ácida y fosfatasa alcalina. La actividad hemolítica, ensayada sobre eritrocitos humanos, se encuentra en el veneno soluble y en el pico II. Finalmente, tanto el veneno soluble como el pico III muestran ser neurotóxicos al ser inyectados intraperitonealmente en ratones albinos. Se concluye que el veneno soluble de P. papillosa var. rubra-viridis tiene actividad proteolítica, hemolítica y neurotóxica. / Tesis
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Determinación de biotoxina marina veneno paralizante de molusco en Aulacomya ater “choro común” y Argopecten purpuratus “concha de abanico” provenientes del litoral central peruano

Reyes Chavez, Julio Manuel January 2012 (has links)
Determina la presencia de la biotoxina VPM en Aulacomya ater (choro común) y Argopecten purpuratus (concha de abanico) comercializados en el terminal Pesquero de Ventanilla y el Desembarcadero Pesquero Artesanal de Ancón. Procesa muestras de moluscos para la detección de VPM mediante, el método normalizado de la Asociación Oficial de Químicos Analistas (AOAC 959.08.2005) conocido como el método del bioensayo en ratón. De las 79 muestras analizadas, 37 eran concha de abanico y 42 choro común, este último presentó niveles detectables de VPM en tres ocasiones. Siendo la concentración máxima detectada de 48 µg Saxitoxina equivalente/100 g que está por debajo del límite legal que en nuestro país es de 80 µg Saxitoxina equivalente/100 g de carne. En Argopecten purpuratus no se detectó la presencia de toxinas VPM o estas se encontraban por debajo del límite de cuantificación del bioensayo que en nuestro caso fue de 37 µg STX/100 g-1. Concluye que existe un riesgo ostensible para la salud del consumidor debido a la presencia de las toxinas VPM en muestras de moluscos comercializados en el mercado local. / Tesis

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