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Estudo do teste rÃpido imunoenzimÃtico atravÃs do antÃgeno recombinante rk39 para diagnÃstico de leishmaniose visceral americana. correlaÃÃo clÃnico-terapÃutica / Study of rapid immunoenzymatic test with recombinant antigen rK39 to diagnosis American Visceral Leishmaniasis: clinical therapeutic correlations.

Josà Nivon da Silva 16 January 2004 (has links)
FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / RESUMO A confirmaÃÃo diagnÃstica de leishmaniose visceral ou calazar à realizada atravÃs da detecÃÃo do parasito por mÃtodos diretos, atravÃs do encontro de formas amastigotas no interior de macrÃfagos ou monÃcitos, em aspirado esplÃnico, hepÃtico, medula Ãssea, histopatolÃgico de linfonodo e esfregaÃo do sangue perifÃrico, com ampla variaÃÃo de sensibilidade de acordo com o sÃtio pesquisado, constituindo-se o padrÃo-ouro a visualizaÃÃo de Leishmania sp. A pesquisa de anticorpos especÃficos para triagem diagnÃstica da leismaniose visceral atravÃs do ELISA, reaÃÃo de imunofluorescÃncia indireta e os testes de aglutinaÃÃo direta possuem sensibilidade alta e especificidade limitada pelas reaÃÃes cruzadas com tripanosomatÃdeos e micobactÃrias, incluindo-se tuberculose, hansenÃase, doenÃa de Chagas, e ainda, leishmaniose tegumentar e histoplasmose. O teste intradÃrmico de Montenegro à sempre negativo durante a fase ativa da doenÃa, e baseia-se na memÃria imunolÃgica dependente de linfÃcitos Th1. O ojetivo deste trabalho foi evidenciar a relevÃncia do teste rÃpido para detecÃÃo de anticorpo anti-leishmania chagasi utilizando o antÃgeno recombinante rK39 que apresentou sensibilidade de 99,2%. Foram realizados testes sorolÃgicos pelo ELISA que apresentou sensibilidade de 80%, e a reaÃÃo de imunofluorescÃncia indireta para calazar com sensibilidade de 82%. O gold-standard diagnÃstico empregado para todos exames foi a pesquisa microscÃpica direta do parasito no aspirado de medula Ãssea e a positividade foi de 71%, em uma pesquisa realizada em hospitais terciÃrios de Fortaleza-CE. A reaÃÃo imunoenzimÃtica para teste rÃpido em fita contendo antÃgeno rK39 apresentou elevada sensibilidade e especificidade permitindo diagnÃstico imediato e inÃcio precoce do tratamento, alÃm de confirmar alta densidade de epÃtopos exclusivamente para o gÃnero Leishmania, pois nÃo houve reaÃÃes cruzadas dentre vÃrias doenÃas testadas. Detectamos tÃtulos de anticorpos IgG anti-leishmania chagasi persistentemente positivos em pacientes tratados adequadamente para calazar, corroborando com evidÃncias de que o rK39 nÃo define doenÃa em atividade e nem estabelece critÃrios de cura, fortalecendo que outras possibilidades diagnÃsticas sejam investigadas mediante um resultado positivo em indivÃduo procedente de zona endÃmica para calazar, em paciente portador de hepatoesplenomegalia febril e pancitopenia. O teste rÃpido rk39 deverà ter sua leitura imediatamente relizada e interpretada em atà no mÃximo 10 minutos, objetivando tomada de decisÃes clÃnicas, e que sua implantaÃÃo como mÃtodo auxiliar de diagnÃstico deveria fazer parte da rotina laboratorial, particularmente de serviÃos secundÃrios e terciÃrios de saÃde em regiÃes endÃmicas para leshmaniose visceral. / ABSTRACT The visceral leishmaniasis diagnostic confirmation or Kala-azar is performed by detection of the parasite through direct methods of amastigotes within macrophages or monocytes, spleen aspirated, hepatic, bone marrow, lymph node histopathological and peripheral blood smear, with wide variation in sensitivity in accordance with the site searched, being the gold standard of Leishmaniasis sp . The specific antibodies for diagnostic of visceral leishmaniasis by ELISA, indirect immunofluorescence reaction and direct agglutination tests have high sensitivity and specificity cross reactions with limited by trypanosomatids and mycobacterium, including tuberculosis, leprosy, Chagas disease , leishmaniasis cutaneous and histoplasmosis. The Montenegro intradermal test is always negative during the active phase of the disease, and is based on immune memory bound on lymphocyte Th1. The purpose of this work was to highlight the importance of quick test for the detection of antibody anti-leishmania chagasi using recombinant rK39 antigen that presented sensitivity of 99.2%. There were serological by ELISA tests that presented sensitivity of 80%, and the indirect immunofluorescence reaction to Kala-azar with sensitivity of 82%. The gold-standard diagnosis made for all examinations was the direct microscopic search on parasite bone marrow aspirated and positivity was 71%, in a survey in tertiary hospitals in Fortaleza-CE. The immunoenzymatic reaction to quick test in tape containing rK39 Antigen has high sensitivity and specificity allowing immediate diagnosis and in the early beginning of treatment, in addition to confirm high-density epitopes exclusively for the Leishmaniasis genus, because there was no cross reactions among several diseases tested. We found evidence of IgG anti-leishmaniasis chagasi antibodies persistently -positive in patients treated appropriately for kala-azar, supporting with evidence that rK39 does not define disease activity and establishes criteria for cure, strengthening that other homogenizing are investigated by a positive result in individual from endemic area of Kala-azar, in disease carrier of febrile hepatosplenomegaly and pancytopenia . The quick test Rk39 must be read and interpreted immediately up to a maximum of 10 minutes driving clinical decision-making, and that its deployment as diagnostic helper method should be part of the laboratorial routine services, particularly in secondary and tertiary health endemic regions of visceral leshmaniasis . Keywords: American visceral leishmaniasis. Kala-azar. Recombinant K39 Antigen. Kala-azar through rK39 antigen diagnostic.

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