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Supressão de brusone nas folhas de arroz com Cladosporium cladosporioides. / Rice leaf blast suppression by Cladosporium cladosporioidesChaibub, Amanda Abdallah 21 February 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Rice blast (Magnaporthe oryzae Couch, anamorph-Pyricularia oryzae Cav.) is
the major disease of rice causing yield losses up to 100%, in the world. Its control,
currently held by integrating genetic resistance, cultural practices and chemical control,
requires the inclusion of biological agents. The objectives of this study were to evaluate the
in vitro antagonism between C. cladosporioides and four different rice pathogens; to verify
the ability of C. cladosporioides in suppressing leaf blast and to study the mechanisms
involved during disease suppression. The bioassays were conducted in a completely
randomized design with three replications. The antagonism in vitro was evaluated by
pairing-up, in Petri dishes containing PDA medium, nine different isolates of C.
cladosporioides with the rice pathogens Sarocladium oryzae (sheath rot), Monographella
albescens (scald), Cochliobolus miyabeanus (brown stain) and M. oryzae. All C.
cladosporioides isolates reduced colonies mycelia growth up to 53.84% in addition to hallo
formation. Among the nine tested isolates, four were selected for in vivo studies. Under
controlled greenhouse conditions, three different concentrations were tested, in two
different applications way; 1) 48 hours before challenger inoculation with M. oryzae; 2)
mixture of M. oryzae and C. cladosporioides conidia suspensions. The isolated C24 C.
cladosporioides (5x105) sprayed 48 hours, before challenger inoculation reduced 97.1% of
leaf blast severity, and the spray mixture of conidial suspensions of C24 C. cladosporioides
(5x101) and M. oryzae 3x105 spray of decreased leaf blast severity by 88.6%.
Subsequently, the mechanisms involved in leaf blast suppression were investigated by
using the same isolate, both applications methods and by collecting rice plants leaves
sprayed with C. cladosporioides and M. oryzae. The application of C. cladosporioides 48
hours before challenger inoculation with M. oryzae and the conidial suspensions of mixture
of M. oryzae and C. cladosporioides reduced to 83.9% and 78.6% of leaf blast severity,
respectively. It was detected that, in the presence of C. cladosporioides and absence of the
pathogen activity of enzymes GLU, LIPOX, PAL and POX increased significantly. In the
presence of, C. cladosporioides and M. oryzae, POX and PAL activity and AS content also
significantly increased, in both application forms. Scanning electron microscopy confirmed
the physical interaction between plant/biological agent/pathogen during the penetration
phase. It was proved that C. cladosporioides is a biological agent efficient in activating
biochemical defense mechanisms of the rice plant during leaf blast suppression. / A brusone (Magnaporthe oryzae Couch, anamorfo - Pyricularia oryzae Cav.) é
a principal doença do arroz no mundo causando perdas na produtividade de até 100%. Seu
controle, atualmente realizado pelo manejo que integra resistência genética, práticas
culturais e controle químico, requer a inserção de agentesbiológicos. Os objetivos do
presente trabalho foram avaliar o antagonismo in vitro entre Cladosporium cladosporioides
e os patógenos do arroz; verificar a capacidade de C. cladosporioides em suprimir a
brusone foliar e estudar os mecanismos envolvidos na supressão da doença. Todos os
ensaios foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado, com três repetições.
O antagonismo, in vitro, foi avaliado pareando-se, em placas de Petri contendo meio de
cultura BDA, nove diferentes isolados de C. cladosporioides com os patógenos do arroz,
Sarocladium oryzae (Podridão da bainha), Monographella albescens (Escaldadura),
Cochliobolus miyabeanus (Mancha parda) e M. oryzae. Todos os isolados de C.
cladosporioides reduziram, em até 53,84% o crescimento micelial das colônias além de
apresentarem halo; entre os nove, quatro foram selecionados para os estudos in vivo. Em
condições controladas de casa de vegetação, foram testadas, em três diferentes
concentrações, a aplicação antecipada, 48 horas antes da inoculação desafiadora com M.
oryzae, e a aplicação da mistura das suspensões de conídios de M. oryzae e C.
cladosporioides. A pulverização antecipadado isolado C24 de C. cladosporioides (5x105)
promoveu 97,1% de redução da severidade de brusone foliar e a pulverização da mistura
das suspensões do isolado C24 de C. cladosporioides (5x101) e M. oryzae (3x105) reduziu
em 88,6%. Posteriormente, os mecanismos envolvidos na supressão da brusone foliar
foram investigados com o mesmo isolado e os dois métodos de aplicação com coletas de
plantas, realizadas antes e após o desafio com M. oryzae. As aplicações, antecipada e em
mistura, reduziram em 83,9% e 78,6% a severidade da brusone foliar, respectivamente.
Observou-se que, na ausência do patógeno a atividade de GLU, LIPOX, PAL e POX
aumentaram significativamente. Na presença de M. oryzae, a atividade de POX e PAL e o
teor do AS aumentaram destacadamente, em ambas as formas de aplicação. Por
microscopia eletrônica de varredura confirmou-se a interaçãofísica entre planta/agente
biológico/patógeno, durante a fase de penetração. C. cladosporioidesrevelou-se um agente
biológico capaz de suprimira brusone foliar ativando os mecanismos bioquímicos de
defesa da planta de arroz.
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