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Supressão de brusone nas folhas de arroz com Cladosporium cladosporioides. / Rice leaf blast suppression by Cladosporium cladosporioides

Chaibub, Amanda Abdallah 21 February 2014 (has links)
Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2015-10-27T14:25:17Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Amanda Abdallah Chaibub - 2014.pdf: 1263990 bytes, checksum: 48328d656f5321ae2882086283462be4 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-10-29T10:11:31Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Amanda Abdallah Chaibub - 2014.pdf: 1263990 bytes, checksum: 48328d656f5321ae2882086283462be4 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-29T10:11:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Amanda Abdallah Chaibub - 2014.pdf: 1263990 bytes, checksum: 48328d656f5321ae2882086283462be4 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Rice blast (Magnaporthe oryzae Couch, anamorph-Pyricularia oryzae Cav.) is the major disease of rice causing yield losses up to 100%, in the world. Its control, currently held by integrating genetic resistance, cultural practices and chemical control, requires the inclusion of biological agents. The objectives of this study were to evaluate the in vitro antagonism between C. cladosporioides and four different rice pathogens; to verify the ability of C. cladosporioides in suppressing leaf blast and to study the mechanisms involved during disease suppression. The bioassays were conducted in a completely randomized design with three replications. The antagonism in vitro was evaluated by pairing-up, in Petri dishes containing PDA medium, nine different isolates of C. cladosporioides with the rice pathogens Sarocladium oryzae (sheath rot), Monographella albescens (scald), Cochliobolus miyabeanus (brown stain) and M. oryzae. All C. cladosporioides isolates reduced colonies mycelia growth up to 53.84% in addition to hallo formation. Among the nine tested isolates, four were selected for in vivo studies. Under controlled greenhouse conditions, three different concentrations were tested, in two different applications way; 1) 48 hours before challenger inoculation with M. oryzae; 2) mixture of M. oryzae and C. cladosporioides conidia suspensions. The isolated C24 C. cladosporioides (5x105) sprayed 48 hours, before challenger inoculation reduced 97.1% of leaf blast severity, and the spray mixture of conidial suspensions of C24 C. cladosporioides (5x101) and M. oryzae 3x105 spray of decreased leaf blast severity by 88.6%. Subsequently, the mechanisms involved in leaf blast suppression were investigated by using the same isolate, both applications methods and by collecting rice plants leaves sprayed with C. cladosporioides and M. oryzae. The application of C. cladosporioides 48 hours before challenger inoculation with M. oryzae and the conidial suspensions of mixture of M. oryzae and C. cladosporioides reduced to 83.9% and 78.6% of leaf blast severity, respectively. It was detected that, in the presence of C. cladosporioides and absence of the pathogen activity of enzymes GLU, LIPOX, PAL and POX increased significantly. In the presence of, C. cladosporioides and M. oryzae, POX and PAL activity and AS content also significantly increased, in both application forms. Scanning electron microscopy confirmed the physical interaction between plant/biological agent/pathogen during the penetration phase. It was proved that C. cladosporioides is a biological agent efficient in activating biochemical defense mechanisms of the rice plant during leaf blast suppression. / A brusone (Magnaporthe oryzae Couch, anamorfo - Pyricularia oryzae Cav.) é a principal doença do arroz no mundo causando perdas na produtividade de até 100%. Seu controle, atualmente realizado pelo manejo que integra resistência genética, práticas culturais e controle químico, requer a inserção de agentesbiológicos. Os objetivos do presente trabalho foram avaliar o antagonismo in vitro entre Cladosporium cladosporioides e os patógenos do arroz; verificar a capacidade de C. cladosporioides em suprimir a brusone foliar e estudar os mecanismos envolvidos na supressão da doença. Todos os ensaios foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado, com três repetições. O antagonismo, in vitro, foi avaliado pareando-se, em placas de Petri contendo meio de cultura BDA, nove diferentes isolados de C. cladosporioides com os patógenos do arroz, Sarocladium oryzae (Podridão da bainha), Monographella albescens (Escaldadura), Cochliobolus miyabeanus (Mancha parda) e M. oryzae. Todos os isolados de C. cladosporioides reduziram, em até 53,84% o crescimento micelial das colônias além de apresentarem halo; entre os nove, quatro foram selecionados para os estudos in vivo. Em condições controladas de casa de vegetação, foram testadas, em três diferentes concentrações, a aplicação antecipada, 48 horas antes da inoculação desafiadora com M. oryzae, e a aplicação da mistura das suspensões de conídios de M. oryzae e C. cladosporioides. A pulverização antecipadado isolado C24 de C. cladosporioides (5x105) promoveu 97,1% de redução da severidade de brusone foliar e a pulverização da mistura das suspensões do isolado C24 de C. cladosporioides (5x101) e M. oryzae (3x105) reduziu em 88,6%. Posteriormente, os mecanismos envolvidos na supressão da brusone foliar foram investigados com o mesmo isolado e os dois métodos de aplicação com coletas de plantas, realizadas antes e após o desafio com M. oryzae. As aplicações, antecipada e em mistura, reduziram em 83,9% e 78,6% a severidade da brusone foliar, respectivamente. Observou-se que, na ausência do patógeno a atividade de GLU, LIPOX, PAL e POX aumentaram significativamente. Na presença de M. oryzae, a atividade de POX e PAL e o teor do AS aumentaram destacadamente, em ambas as formas de aplicação. Por microscopia eletrônica de varredura confirmou-se a interaçãofísica entre planta/agente biológico/patógeno, durante a fase de penetração. C. cladosporioidesrevelou-se um agente biológico capaz de suprimira brusone foliar ativando os mecanismos bioquímicos de defesa da planta de arroz.

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