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Ispitivanja odabranih predstavnika podfamilije Polygonoideae (Polygonaceae A.L. de Jussieu 1789) sa područja centralnog i zapadnog Balkana. Fitohemijski i biohemijski aspekti / Phytochemical and biochemical analysis of selected species of subfamily Polygonoideae (Polygonaceae A. L. de Jussieu 1789) from Central and Western Balkan regions.Svirčev Emilija 24 September 2014 (has links)
<p>U ovoj doktorskoj disertaciji prikazani su rezultati istraživanja 15 vrsta biljaka koje pripadaju rodovima <em>Rumex, Polygonum, Bistorta, Persicaria i Fagopyrum,</em> podfamilije Polygonoideae, familije Polygonaceae, sakupljenih na teritoriji centralnog i zapadnog Balkana u periodu od 2009-2011. godine. Sprovedena istraživanja su se odvijala u dva pravca: fitohemijska i biohemijsko-biološka ispitivanja. Predmet analiza bili su ekstrakti herbi i rizoma ispitivanih biljaka. Fitohemijska ispitivanja obuhvatila su, pored spektrofotometrijskog određivanja ukupnih fenola, ukupnih flavonoida i ukupnih antrahinonskih jedinjenja, i određivanje sadržaja 51 komponente iz standardne smeše različitih klasa fenolnih jedinjenja LC-MSMS metodom, odnosno hromatografsko profilisanje ekstrakata LC-DAD-MS metodom. Odabirom nekoliko različitih model sistema za merenje antioksidantne aktivnosti (neutralizacija DPPH radikala, redoks kapacitet - FRAP test, skevindžer aktivnost prema superoksidanjon radikalu, NO radikalu i OH radikalu, kao i inhibicija lipidne peroksidacije) procenjen je antioksidantni potencijal ekstrakata, dok je za procenu njihove antiinflamatorne aktivnosti korišćen potencijal inhibicije biosinteze medijatora inflamacije u humanim trombocitima (kao model sistemu). Mikrobiološka ispitivanja su obuhvatila određivanje potencijala ovih vrsta u inhibiciji rasta serije gram pozitivnih i gram negativnih sojeva batkerija. Konačno, urađena je analiza korelacije hemijskog sastava, biološke aktivnosti i pripadnosti taksonomskim grupama.</p> / <p>Phytochemical and biochemical analysis of herbal and root ethanol extracts of 15 species belonging to different genera (<em>Rumex, Polygonum, Bistorta, Persicaria and Fagopyrum</em>) of subfamily Polygonoideae, was examined. Phytochemical characterization included spectrophotometric determination of total phenolic, total flavonoids and total anthraquinone contents, quantification of 51 secondary metabolites by LC/MS/MS analysis and chromatographic fingerprinting by LC/DAD/MS technique, of prepared extracts. The antioxidant activity was evaluated by measuring ferric reducing ability (FRAP) of the extracts and their radical scavenging capacity towards DPPH, OH, NO and O<sub>2</sub><sup>– </sup>radicals, and inhibition of lipid peroxidation). Antiinflammatory activity was evaluated by LC/MS/MS monitoring of selected metabolites (12-(S)-HHT, 12(S)-HETE, PGE<sub>2 </sub>, PGF<sub>2α</sub>, and TXB<sub>2</sub>) formed in cyclooxygenase and lipoxygenase pathways of arachidonic acid metabolism. Human platelets were used as a source of enzymes, while inflammation was induced by calcimycin. The antibacterial activity of prepared extracts against nine bacterial strains was evaluated by microtiter assay with resazurin as a colorimetric growth indicator.</p>
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Phytochemical investigation of Acronychia species using NMR and LC-MS based dereplication and metabolomics approaches / Etude phytochimique d’espèces du genre Acronychia en utilisant des approches de déréplication et métabolomique basées sur des techniques RMN et SMKouloura, Eirini 28 November 2014 (has links)
Les plantes médicinales constituent une source inexhaustible de composés (des produits naturels - PN) utilisé en médecine pour la prévention et le traitement de diverses maladies. L'introduction de nouvelles technologies et méthodes dans le domaine de la chimie des produits naturels a permis le développement de méthodes ‘high throughput’ pour la détermination de la composition chimique des extraits de plantes, l'évaluation de leurs propriétés et l'exploration de leur potentiel en tant que candidats médicaments. Dernièrement, la métabolomique, une approche intégrée incorporant les avantages des technologies d'analyse moderne et la puissance de la bioinformatique s’est révélé un outil efficace dans la biologie des systèmes. En particulier, l'application de la métabolomique pour la découverte de nouveaux composés bioactifs constitue un domaine émergent dans la chimie des produits naturels. Dans ce contexte, le genre Acronychia de la famille des Rutaceae a été choisi sur la base de son usage en médecine traditionnelle pour ses propriétés antimicrobienne, antipyrétique, antispasmodique et anti-inflammatoire. Nombre de méthodes chromatographiques modernes, spectrométriques et spectroscopiques sont utilisées pour l'exploration de leur contenu en métabolites suivant trois axes principaux constituant les trois chapitres de cette thèse. En bref, le premier chapitre décrit l’étude phytochimique d’Acronychia pedunculata, l’identification des métabolites secondaires contenus dans cette espèce et l'évaluation de leurs propriétés biologiques. Le deuxième chapitre vise au développement de méthodes analytiques pour l'identification des dimères d’acétophénones (marqueurs chimiotaxonomiques du genre) et aux stratégies utilisées pour la déréplication de ces différents extraits et la caractérisation chimique des composés par UHPLC-HRMSn. Le troisième chapitre se concentre sur l'application de méthodologies métabolomique (RMN et LC-MS) pour l'analyse comparative (entre les différentes espèces, origines, organes), pour des études chimiotaxonomiques (entre les espèces) et pour la corrélation des composés contenus avec une activité pharmacologique. / Medicinal plants constitute an unfailing source of compounds (natural products – NPs) utilised in medicine for the prevention and treatment of various deceases. The introduction of new technologies and methods in the field of natural products chemistry enabled the development of high throughput methodologies for the chemical composition determination of plant extracts, evaluation of their properties and the exploration of their potentials as drug candidates. Lately, metabolomics, an integrated approach incorporating the advantages of modern analytical technologies and the power of bioinformatics has been proven an efficient tool in systems biology. In particular, the application of metabolomics for the discovery of new bioactive compounds constitutes an emerging field in natural products chemistry. In this context, Acronychia genus of Rutaceae family was selected based on its well-known traditional use as antimicrobial, antipyretic, antispasmodic and anti-inflammatory therapeutic agent. Modern chromatographic, spectrometric and spectroscopic methods were utilised for the exploration of their metabolite content following three basic axes constituting the three chapters of this thesis. Briefly, the first chapter describes the phytochemical investigation of Acronychia pedunculata, the identification of secondary metabolites contained in this species and evaluation of their biological properties. The second chapter refers to the development of analytical methods for the identification of acetophenones (chemotaxonomic markers of the genus) and to the dereplication strategies for the chemical characterisation of extracts by UHPLC-HRMSn. The third chapter focuses on the application of metabolomic methodologies (LC-MS & NMR) for comparative analysis (between different species, origins, organs), chemotaxonomic studies (between species) and compound-activity correlations.
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