Made available in DSpace on 2014-06-12T18:28:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1008_1.pdf: 716170 bytes, checksum: faf19841928aef100ae340cda214e7b3 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Em vigilância epidemiológica, um grande desafio é encontrar a melhor forma de monitorar a incidência do vírus da imunodeficiência humana do tipo1 (HIV-1). A Organização Mundial de Saúde (OMS) aprovou em 2001 uma metodologia laboratorial que permite identificar infecções recentes. O estudo foi desenhado para comparar o ensaio automatizado Axsym HIV 1/2gO modificado pela Guanidina que avalia o Índice de Avidez, com o ensaio imunoenzimático de captura de IgG BED-CEIA, na identificação de infecções recentes pelo HIV-1 de usuários de dois Centros de Testagem e Aconselhamento (CTA) do estado de Pernambuco. Foram utilizadas 364 amostras de soro que tiveram diagnósticos positivos para o HIV-1 de indivíduos que procuraram de forma espontânea, os Centros de Testagem e Aconselhamento (CTA) da cidade do Cabo de Santo Agostinho e da cidade do Paulista, ambas localizadas na região metropolitana do Recife, no período de 2006 a 2009. Os resultados dos dois testes foram comparados utilizando o BED como Padrão Ouro. Das 364 amostras, 103 (28,29%) foram identificadas como infecção recente pelo BED; pelo índice de avidez, com ponto de corte 0,8 e 0,9 foram identificadas 76 amostras (20,87%) e 148 (40,7%), respectivamente. para um ponto de corte de 0,9. A curva ROC mostrou que o ponto de corte para o IA com a melhor sensibilidade e especificidade em relação ao BED foi de 0,9, no qual a sensibilidade foi de 85,4% e especificidade de 77%. O presente estudo permite concluir que o IA obtido pela metodologia Axsym-HIV- 1/2gO com adição de Guanidina, possui boa performance comparado ao BED na detecção das infecções recentes pelo HIV, sendo de grande utilidade em regiões com recursos limitados

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:28:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1056_1.pdf: 696530 bytes, checksum: 532eab78df74c2501e296062c2f79675 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Universidade Federal de Pernambuco / Métodos sorológicos como o enzimaimunoensaio de captura HIV-1 BED (BED CEIA) tornaram-se disponíveis para a determinação da infecção recente do HIV-1, e portanto de sua incidência em populações. O presente trabalho propôs-se a estimar a incidência anual do HIV-1, pelo BED CEIA, em dois Centros de Testagem e Aconselhamento (CTA) da Região Metropolitana do Recife Pernambuco (Brasil) no período de 2006 a 2009 utilizando amostras de soros congeladas. Foram analisadas 375 amostras de soro (217 do CTA-Cabo e 158 do CTA-Paulista), onde encontrouse uma incidência média de 0.90/100/pessoas/ano (IC95%: 0.73-1.08) no CTA-Cabo e de 0.51/100/pessoas/ano (IC95%: 0.35-0.67) no CTA-Paulista; verificou-se uma maior taxa de incidência entre os homens, sendo de 1.34 (IC95%: 1.00-1.69), e de apenas 0.55 (IC95%: 0.43-0.68) em mulheres. A proporção de infecção recente foi de 28%. Em ambos os locais verificou-se uma maior incidência entre usuários do sexo masculino. A elevada taxa de infecções recentes, principalmente entre indivíduos do sexo masculino, aponta para a necessidade de reforço nos programas de prevenção, principalmente dirigidos a grupos de população com maior vulnerabilidade às infecções decorrentes de agentes sexualmente transmissíveis, incluindo o HIV

In dieser Arbeit wurden zwei serologische Teste zur Unterscheidung inzidenter und prävalenter Proben etabliert und validiert, welche auf der Reifung des Immunsystems in der frühen HIV-Infektion basieren. Im BED-ELISA werden anhand von anti-HIV-gp41-spezifischen IgG-Antikörperspiegeln die Proben klassifiziert. Die Aviditäts-Methode (AI) unterscheidet die Bindungsfähigkeit der Antikörper an spezifische Antigene. Das Probenpanel wurde in einem weiteren Inzidenztest, dem IDE-V3-ELISA (Kooperation F. Barin), gemessen welcher den Anstieg der Antikörperreaktivität gegen zwei verschiedene immundominante Epitope nutzt. Wirtsspezifische Marker und virale Eigenschaften wurden untersucht, um Merkmale zu identifizieren, welche die Sensitivität und Spezifität der Teste verbessern könnten. Mit dem BED-ELISA wurde eine Pilotstudie unter Berliner HIV-Patienten durchgeführt. Zur Vereinfachung des Probentransports in Studien wurde der Einfluss einer Filtertrocknung der Plasmaproben auf die Infektiosität von HIV, Stabilität der HIV-RNA und die Antikörperreaktivität im BED-ELISA untersucht. In den Testen wurden inzidente Plasmaproben mit folgenden Sensitivitäten und Spezifitäten richtig klassifiziert: 80% und 86% (BED-ELISA); 74% und 82% (AI); 73% und 84% (IDE-V3). Von allen untersuchten wirtsspezifischen Faktoren korrelierte nur der Gehalt an Antikörpern der IgG3-Subklasse mit der Fehlklassifikation der Proben. Für die Pilotstudie wurden zwischen Feb. 2005 und Nov. 2007 von 132 erstmalig HIV-1 positiv diagnostizierten Patienten Proben genommen und im BED-ELISA analysiert (51% Anteil inzidente Infektionen). Die Antikörperreaktivitäten blieben nach der Filtertrocknung erhalten, so das auf der Grundlage der Ergebnisse eine deutschlandweite Inzidenzstudie mit Filter-getrockneten Plasmaproben geplant wurde, die seit Januar 2008 im Auftrag des BMG zur Verbesserung der Datenlage zur HIV-Inzidenz in Deutschland durchgeführt wird. / In this PhD thesis two methods that can differentiate between incident and prevalent infections were established and validated. Both tests are based on the maturation of the immune system during early HIV-infection. The BED-ELISA uses anti-HIV-gp41 specific IgG-antibody levels for differentiation. The avidity method (AI) is based on the binding-capacity of the antibodies to specific antigens in the presence of a chaotropic agent. The sample panel was also evaluated using an additional incidence ELISA, the IDE-V3-ELISA (cooperation with F. Barin). This test is also based on the antibody''s reactivity to two different immune dominant epitopes, allowing incident and prevalent infections to be differentiated. Host specific factors and viral determinants were analysed to provide information that could lead to improvements in the sensitivity and specificity of the incidence tests. With the BED-ELISA a pilot study with HIV-infected patients in Berlin was carried out. The inactivation of HIV-1 after filter-drying of samples, the stability of viral RNA and reactivity of antibodies in the BED-ELISA were analysed to simplify the transport of samples in future studies. Incident plasma samples were identified correctly with following sensitivities and specificity’s: 80% and 86% (BED-ELISA); 74% and 82% (AI); 73% and 84% (IDE-V3). Of all host factors analysed, only the titre of IgG3-antibodies correlated with the incorrect classification of samples. In the pilot study samples from 132 newly diagnosed HIV-positive patients were obtained between February 2005 and November 2007 and analysed in the BED-ELISA (51% proportion of incident infections). It could be shown that filter-drying of plasma samples rendered HIV non-infectious but did not influence antibody reactivity. Based on these results, a German HIV incidence study using filter-dried plasma samples, designed to improve knowledge of HIV-incidence in Germany, was sponsored by the BMG and has been ongoing since January 2008.