FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / AtravÃs da cromatografia lÃquida de alta eficiÃncia com detecÃÃo por espectrometria de massa no modo MS/MS, desenvolveu-se um mÃtodo sensÃvel e altamente seletivo para determinar os nÃveis de acetato de megestrol no plasma humano, usando a betametasona como padrÃo interno. O analito e o padrÃo interno foram extraÃdos das amostras do plasma atravÃs da soluÃÃo de extraÃÃo hexano-acetato de etila (1:1 v/v), e cromatografados em uma coluna C18. A fase mÃvel consistiu de acetonitrila-Ãgua (80:20 v/v), contendo 0,1% de Ãcido fÃrmico. A detecÃÃo foi realizada em um triplo-quadrupolo, atravÃs de um espectrÃmetro de massa no modo de monitoramento de reaÃÃo mÃltipla via eletrospray. O mÃtodo tem um tempo de corrida de 3 minutos e limite de quantificaÃÃo de 2 ng/mL. As curvas de calibraÃÃo foram obtidas utilizando uma faixa de concentraÃÃo de 2 a 150 ng/mL. As precisÃes intralote foram 3,16%, 4,65% e 2,68%, e a acurÃcia intralote foi de 6,77%, 6,23% e 5,73% para 6, 60 e 120 ng/mL, respectivamente. As precisÃes interlote foram 7,76%, 6,23% e 6,37%, e a acurÃcia interlote foi de 0,08%, 1,55% e 2,11% para as mesmas concentraÃÃes. Este mÃtodo validado foi aplicado com sucesso para a determinaÃÃo dos parÃmetros farmacocinÃticos dos comprimidos de acetato de megestrol administrados a 30 voluntÃrios sadios. / A sensitive and highly selective liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS-MS) method was developed to determine megestrol acetate in human plasma using betamethazone as the internal standard. The analyte and internal standard were extracted from plasma samples by hexane/ethyl acetate (1:1 v/v), and chromatographed on a C18 column. The mobile phase consisted of acetonitrila-water (80:20 v/v) including formic acid 0.1%. Detection was performed on a triple quadropole tandem mass spectrometer by multiple reaction mode via electrospray source. The method has a chromatographic run time of 3 min and a limit of quantification of 2 ng/mL. The linear calibration curves were obtained in the concentration range 2 â 150 ng/mL. The intra-batch precisions were 3.16%, 4.65%, and 2.68%; and the intra-batch accuracy was 6.77%, 6.23%, and 5.73% for 6, 60 and 120 ng/mL, respectively. The inter-batch precision was 7.76%, 6.23%, and 6.37% and the inter-batch accuracy was 0.08%, 1.55%, and 2.11% for the same concentrations. This validated method was successfully applied for the determination of pharmacokinetic profiles of megestrol acetate tablets administered to 30 healthy volunteers.