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L’anémie de Fanconi (FA) est une maladie rare et les patients présentent des malformations congénitales, des problèmes hématologiques et une prédisposition à certains cancers. Jusqu’à maintenant, 13 protéines FA ont été identifiées, dont 8 (FANC- A, B, C, E, F, G, L, M) s’associent pour former un complexe qui permet l’ubiquitination de FANCD2 et FANCI. Les autres protéines FA sont impliquées au niveau de la réparation de l’ADN ce qui ne permet pas d’expliquer en totalité le phénotype des patients. Récemment, HES1, effecteur de la voie de Notch, a été identifié comme un partenaire essentiel à la formation du complexe FA. HES1 est connue pour être impliquée dans le développement et l’hématopoïèse. L’interaction d’HES1 avec le complexe FA altérée pourrait expliquer en partie le phénotype des patients. L’objectif principal est de créer un peptide inhibiteur visant à altérer la liaison d’HES1 avec le complexe FA, sans toutefois modifier les autres fonctions d’HES1 dans la cellule. Un deuxième objectif est d’identifier de nouveaux partenaires au complexe FA afin de mieux comprendre le lien génotype-phénotype. L’identification d’un peptide inhibiteur a été réalisée premièrement par la sélection de quatre régions d’HES1 (les acides aminés 90-123, 86-121, 76-111 et 152-190) et deuxièmement par le criblage d’une banque de peptides aléatoires avec FANCG1-112+390-622. Le système double hybride en levure a été utilisé pour vérifier les interactions directes entre les peptides et les membres du complexe FA et ces interactions ont été testées dans un modèle cellulaire par la technique de co-immunoprécipitation. L’identification de nouveau partenaire au complexe FA a été réalisée par le criblage d’une banque d’ADNc de moelle osseuse avec FANCE. Le criblage avec FANCG1-112+390-622 a permis d’identifier deux peptides, mais leur activité inhibitrice n’a pas été évaluée. Les quatre régions d’HES1 semblent n’avoir aucun effet sur la liaison entre HES1 et le complexe FA. Le criblage de la banque d’ADNc n’a pas permis d’identifier de nouveaux partenaires à FANCE. Des études approfondies sont nécessaires pour confirmer les effets des peptides sur la liaison entre HES1 et le complexe FA.

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Les analogues nucléosidiques sont des antimétabolites utilisés depuis longtemps dans le traitement de plusieurs cancers. Due aux similarités de leurs structures chimiques à celles des nucléosides, ils sont assimilés, métabolisés et incorporés à l’ADN comme les nucléosides. Pourtant, quelques remplacements d’atomes dans leurs structures provoquent l’arrêt de la synthèse de l’ADN. Parmi les analogues nucléosidiques les plus utilisés dans la clinique, on retrouve la cytarabine et la gemcitabine, le premier étant important dans les traitements des cancers hématopoïétiques, tandis que le dernier est plus utilisé dans le traitement des tumeurs solides. La cytarabine a été utilisée dans le traitement de la leucémie myéloïde chronique (LMC) en combinaison avec l’interféron jusqu’en 2001, lorsqu’on a approuvé l’inhibiteur de kinase imatinib comme première ligne de traitement pour cette maladie. L’imatinib se lie au site ATP de la protéine BCR-ABL, qui provient d’une translocation entre deux gènes, et leur présence dans les cellules leucémiques caractérise la Leucémie myéloïde chronique. Environ 80% des patients répondent très bien au traitement avec l’imatinib, mais 20% développent de la résistance ou de l’intolérance après quelques années de traitement. Pour ces patients, quelques thérapies alternatives sont à l’étude, comme par exemple, l’utilisation de la cytarabine en combinaison avec l’imatinib. On a travaillé sur l’hypothèse que les inhibiteurs de kinase interfèrent dans le transport des analogues nucléosidiques. Les objectifs de cette étude était de 1) mesurer l’assimilation des analogues nucléosidiques en présence des inhibiteurs de kinases, 2) vérifier si ces derniers ont un rôle dans le transport et la cytotoxicité des analogues nucléosidiques et 3) démontrer qu’une thérapie utilisant ces deux médicaments de façon successive peut être plus efficace qu’un traitement qui les utilise simultanément. Pour ce faire, on a mesuré l’assimilation des nucléosides et des analogues nucléosidiques en utilisant la [3H] thymidine et la [3H] gemcitabine et on a utilisé la méthode d’effet de proximité pour vérifier l’effet de l’inhibiteur de kinase nilotinib sur la cytotoxicité des cellules. Nos résultats ont montré que les inhibiteurs de kinases bloquent l’assimilation des nucléosides et analogues nucléosidiques. Les inhibiteurs de kinases utilisés dans le traitement de la LCM, l’imatinib et surtout le nilotinib, protègent les cellules de la cytotoxicité de l’analogue nucléosidique gemcitabine lorsqu’on les utilise simultanément, mais ils peuvent aussi augmenter la cytotoxicité de la gemcitabine après un traitement successif de l’analogue nucléosidique suivi de l’inhibiteur de kinase nilotinib