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Expressão diferencial do gene FLA 14 em tegumento de sementes de soja / Differential expression of the gene FLA 14 in soybean seed tegument

Monzón, Daisy Leticia Ramirez 07 February 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T13:44:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_daisy_leticia-ramirez_monzon.pdf: 495372 bytes, checksum: 4109f5d12e44f58ba6cd6d0affc3d675 (MD5) Previous issue date: 2012-02-07 / The soybean (Glycine max L. Max) is one of the main crops grown in Brazil, the second largest world producer. Its evolution has been strongly supported by the development of technologies that allowed the acreage increase. Currently, the use of biotechnology tools aims to contribute to the development of new genotypes with characteristics that can continue increase the production. The identification of genes responsible for characters that can assist in developing varieties with improved seed quality may constitute something innovative. The seed tegument has an important function as for the seeds resistance to deterioration. In this sense, the partial characterization of the protein expression FLA 14 (Arabinogalactan), directly related to the cell wall synthesis in the seed tegument may contribute to the advancement of these studies. The aim of this work was to generate and validate primers capable of quantifying the gene expression of the FLA 14 protein in four soybean genotypes, two with black tegument (TP and IAC 222) and higher lignin content and two with yellow tegument (CD 202 and Potência) and lower lignin content. The plant tissue (tegument) was collected 50 days after the anthesis. In order to obtain the gene expression among genotypes, it was used the qRT-PCR technique, where it was tested four combinations of primers, constructed from sequence models of soybeans ESTs. With the validation results, the primers that were found within the standards were the FLA 14p1, FLA 14p2 and β-Actina. They were all used at the expression studies. The results of the relative expression showed that soybean genotypes with black tegument and higher lignin content express the FLA 14 protein quantitatively superior to the genotypes with yellow tegument and lower lignin content. / A soja (Glycine max L. Merr.) é uma das principais culturas produzidas no Brasil, sendo considerado o segundo maior produtor mundial. Sua evolução foi fortemente amparada pelo desenvolvimento de tecnologias que possibilitaram o aumento da área cultivada. Atualmente o emprego de ferramentas da biotecnologia busca contribuir para o desenvolvimento de novos genótipos com características que possam continuar incrementando a produção. A identificação de genes responsáveis por caracteres que possam auxiliar no desenvolvimento de variedades com melhor qualidade da semente, pode se constituir em algo inovador. O tegumento apresenta uma função importante quanto à resistência das sementes à deterioração. Nesse sentido, a caracterização parcial da expressão do gene da proteína FLA 14 (Arabinogalactano), relacionadas diretamente com a síntese da parede celular no tegumento da semente pode contribuir para o avanço dos estudos. O objetivo do trabalho foi gerar e validar primers capazes de quantificar a expressão gênica da proteína FLA 14 em quatro genótipos de soja, dois desses com tegumento preto (TP e IAC 222) e maior conteúdo de lignina, e outros dois com tegumento amarelo (CD 202 e Potência) e menor conteúdo de lignina. O tecido vegetal (tegumentos) foi coletado aos 50 dias após a antese. Para a análise da expressão gênica entre os genótipos, utilizou-se a técnica de qRT-PCR, onde foram testadas quatro combinações de primers construídos a partir de modelos de sequência de ESTs da soja. Com os resultados da validação, os primers que se encontraram dentro dos padrões foram os FLA 14p1, FLA 14p2 e β-Actina utilizando-se no estudo de expressão. Os resultados da expressão relativa permitiram concluir a expressão do gene da proteína FLA 14 é quantitativamente superior nos genótipos de soja com tegumento preto e conteúdo superior de lignina em relação aos genótipos com tegumento amarelo e menos teor de lignina.

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