Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2018. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2018-05-02T18:43:13Z No. of bitstreams: 1 2018_WanessadeSouzaCardosoQuintão.pdf: 2735530 bytes, checksum: 9642af8380e33a37bcee80efcf354c2e (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-05-28T16:57:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2018_WanessadeSouzaCardosoQuintão.pdf: 2735530 bytes, checksum: 9642af8380e33a37bcee80efcf354c2e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-28T16:57:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018_WanessadeSouzaCardosoQuintão.pdf: 2735530 bytes, checksum: 9642af8380e33a37bcee80efcf354c2e (MD5) Previous issue date: 2018-05-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). / Brosimum gaudichaudii é uma planta do Cerrado brasileiro que possui furanocumarinas com potencial terapêutico para tratamento do vitiligo, com destaque ao bergapteno e psoraleno. Nesse sentido, este trabalho teve como objetivo desenvolver nanoemulsões, formulações capazes de incorporar ativos vegetais e modular a permeação através da pele, a partir de extratos de Brosimum gaudichaudii, para tratamento tópico do vitiligo. Os compostos bergapteno e psoraleno foram quantificados por Cromatógrafo Líquido de Alta Eficiência (HPLC). Extratos etanólicos do pó (EXT1) e da casca da raiz (EXT2) de Brosimum gaudichaudii foram preparados e caracterizados por triagem fotoquímica. Apresentaram poucas diferenças na detecção de compostos, mas houve formação de diferentes cristais. Nanoemulsões óleo-em-água (O/A) de cada extrato foram preparadas utilizando Labrasol® e Plurol® para incorporar o EXT1 e o EXT2, obtendo NE1 e NE2. O tamanho de gotícula, o potencial zeta, pH e teor de ativos nas nanoemulsões foram avaliados. Os efeitos dos extratos e padrões sobre a viabilidade, migração e proliferação celular foram analisados em melanócitos e queratinócitos humanos. Além disso, o potencial de irritabilidade das nanoemulsões foi avaliado por ensaio de HET-CAM. No estudo de estabilidade, as nanoemulsões apresentaram pH em torno 4,0. As nanoemulsões apresentaram tamanho de gotícula tamanho ideal, entre 50 e 200 nm. Houve aumento do tamanho de gotícula das nanoemulsões armazenadas em câmara climática, o que pode ser atribuído ao aumento da temperatura. O potencial zeta das nanoemulsões foi negativo, menor que -10 mV. Nos estudos de permeação in vitro, as nanoemulsões reduziram a permeação dos ativos bergapteno e psoraleno. Os extratos demonstraram certa citotoxicidade em melanócitos e queratinócitos, mas estimularam migração celular. As duas nanoemulsões foram classificadas como irritantes leves nos ensaios de HET-CAM e adequadas para uso tópico. As nanoemulsões desenvolvidas nesse trabalho, portanto, apresentaram-se estáveis, com aspectos físicos e características organolépticas adequadas para aplicação tópica, e foram capazes de concentrar os ativos na pele, reduzindo a permeação através da pele, o que poderia causar um impacto negativo na segurança do tratamento do vitiligo. / Brosimum gaudichaudii is a Brazilian Cerrado plant which has furanocumarinas with therapeutic potential for vitiligo treatment, like bergapteno and psoralen. Considering its therapeutic potential, this work aimed to develop nanoemulsions, which are formulations capable of incorporating plant compounds and regulate the permeation through the skin, using Brosimum gaudichaudii extracts, for topical treatment of vitiligo. Bergapteno and psoralen compounds were quantified by high efficiency liquid chromatograph (HPLC). Ethanolics extracts of the Powder (EXT1) and the root bark (EXT2) of Brosimum gaudichaudii were prepared and characterized by photochemical screening. They showed few differences in the detection of compounds, but they produced different crystals conformations. Oil-in-water nanoemulsions (O/A) of each extract were prepared using Labrasol ® and Plurol ® to incorporate EXT1 and EXT2, obtaining NE1 and NE2. The droplet size, the zeta potential, pH and contente of bergapten and psoralen in the nanoemulsions were evaluated. The effects of the extracts and standards on the viability, migration and cellular proliferation were analyzed in human melanocytes and keratinocytes. In addition, the irritability potential of the nanoemulsions was evaluated by HET-CAM assay. In the stability study, the nanoemulsions presented PH around 4.0. The nanoemulsions presented an optimal droplet size between 50 and 200 nm. There was an increase in the droplet size of the nanoemulsions stored in the climate chamber, which can be attributed to the increase in temperature. The nanoemulsions’ zeta potential was negative, less than -10 mV. In the in vitro permeation studies, nanoemulsions reduced the permeation of bergapteno and psoralen compounds. The extracts demonstrated a certain cytotoxicity in melanocytes and keratinocytes, but they stimulated cellular migration. The nanoemulsions were classified as mild irritants in the HET-CAM assay and suitable for topical use. The nanoemulsions developed in this work, therefore, were stable, with physical aspects and organoleptic characteristics suitable for topical application, and were able to concentrate the compounds on the skin, reducing the permeation through the skin, the That could cause a negative impact on the safety of vitiligo treatment.

Brosimum gaudichaudii Trécul. é uma planta da família Moreaceae, encontrada na região do cerrado do Brasil e tradionalmente usada para o tratamento de pacientes com vitiligo. OBJETIVO: As atividades antimicrobianas do extrato etanólico das cascas do tronco e das folhas de Brosimum gaudichaudii Trécul. foram avaliadas contra 68 cepas multirresistentes de bactérias isoladas de lesões nos pés de pacientes diabéticos, e também 6 cepas ATCC, Escherichia coli (25922), Pseudomonas aeruginosa (27853), Proteus mirabilis (12453), Citrobacter yougae (29935), Staphylococcus aureus (25923), Streptococcus pyogenes (0015). MÉTODOS: A susceptibilidade das cepas bacterianas frente aos diferentes extratos foi avaliado atravésdo método de difusão em disco eda microdiluição em caldo, utilizando a determinação da Concentração Inibitória Mínima e a Concentração Bactericida Mínima. A eficácia dos extratos e da metodologia utilizada foram analisadas por métodos estatísticos. RESULTADOS E DISCUSSÃO: A maior atividade antibacteriana contra a maioria das especies bacterianas foi encontrada nos extratos dascascas de Brosimum gaudichaudii Trécul. No entanto, os extratos de folhas também apresentaram uma alta atividade antibacteriana contra S. aureus e Pseudomonas aeruginosa, bactérias que se tornaram resistentes aos antibióticos mais comumente utilizados para tratar as infecções no pé de pacientes diabéticos. A metodologia de microdiluição em caldofoi mais eficaz para determinar a atividade antimicrobiana do que a difusão em disco, tanto para os extratos das cascas do caule como para as folhas de Brosimum gaudichaudii Trécul.,o sugere a necessidade de vários métodos para determinar aatividade antimicrobiana de extratos vegetais. Houve uma interação estatisticamente significativa entre antibióticos e extratos de cascas contra bactérias gram-positivas e também entre as combinações das cascas do caule e extratos de folhas contra bactérias gram positivas e gram negativas. Esses resultados sugerem a presença de compostos bioativos que podem sinergicamente contribuírem para a atividade antibacteriana. CONCLUSÕES: Baseado nos resultados encontrados, os extratos das cascas do caule e das folhas de Brosimum gaudichaudii Trécul. podem ser um bom candidato na busca de um agente antimicrobiano natural contra cepas de bactérias multirresistentes. / INTRODUCTION: Brosimum gaudichaudiiTrécul. isa plant of the Moreaceae family, found in the Cerradoregion of Brazil and tradionally used for the treatment of patients with vitiligo. OBJECTIVE: In our study, antimicrobial activities of the ethanol stem bark and leaf extracts of Brosimum gaudichaudiiTrécul. were evaluated against 68 multiresistant bacterial strains, which were isolated from diabetic foot patients, and 6 ATCC strain of Escherichia coli (25922), Pseudomonas aeruginosa (27853), Proteus mirabilis (12453), Citrobacter yougae (29935), Staphylococcus aureus (25923), Streptococcus pyogenes (0015). METHODS: The susceptibilities of the microbial strains to different plants extracts were tested using Disc Diffusion Method, Determination of Minimum Inhibitory Concentrationusing broth microdilution and Minimum Bactericidal Concentration. The efficacy of these extracts and of methodology used were analyzed by statistical methods. RESUSTS AND DISCUSSION: The highest antibacterial activity against most bacterial specieswas shown by bark extracts of Brosimum gaudichaudii Trecul. However, the leaf extracts also showed high antibacterial activity against S. aureus and Pseudomonas aeruginosa, bacteria that became resistant to the antibiotics most commonly used to treat Diabetic Foot Infections. Compared with disk diffusion, broth microdilution was more appropriate for quantitatively determining the antimicrobial activity of stem bark and leaf extracts of Brosimum gaudichaudii Trecul. However, our study suggested that the need to apply multiple methods when conducting in vitro antimicrobial susceptibility testing of plants extracts. There was a statistically significant interaction between antibiotics and bark extracts against gram positive bacteriaand between the combinations of stem bark and leaf extracts against gram positive and gram negative bacteria. These results suggest the presence of bioactive compounds that may synergistically contribute to activity anti bacterial. CONCLUSIONS: On the basis of the present finding, Brosimum gaudichaudii Trecul. stembarkand leafextract might be a good candidate in the search for a natural antimicrobial agent against the multiresistant bacterial strains.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-06-05T12:51:35Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1056418 bytes, checksum: a4f83dbd4ba9d8c5874aa1cc1d9000d5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-05T12:51:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1056418 bytes, checksum: a4f83dbd4ba9d8c5874aa1cc1d9000d5 (MD5) Previous issue date: 2018-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A obtenção de mudas de qualidade é fundamental para o sucesso da implantação de um projeto florestal, pois o crescimento e a sobrevivência das plantas estarão atrelados à sua qualidade. A nutrição mineral e a seleção de microrganismos simbiontes a serem adicionados ao substrato de cultivo são de grande importância e influenciam a qualidade de uma muda. Contudo, para grande parte das espécies arbóreas nativas do Cerrado, esse conhecimento ainda não foi obtido, podendo dificultar ou inviabilizar a produção das mudas. O presente estudo teve como objetivo avaliar o crescimento inicial e a qualidade de mudas de Hancornia speciosa (mangabeira) e Brosimum gaudichaudii (mama-cadela) em resposta a doses de P e inoculação de microrganismos simbiontes provenientes do solo próximo às plantas matrizes e inóculo de fungos micorrízicos arbusculares (FMA). Foram avaliados dois experimentos, sendo ambos conduzidos no delineamento inteiramente casualizado (DIC). O experimento um foi composto por cinco doses de P (0, 100, 200, 300 e 400 mg dm -3 ), com seis repetições, totalizando 30 unidades experimentais por espécie, sendo o substrato uma mistura do solo rizosférico de plantas matrizes (SRPM) das espécies em estudo + horizonte subsuperficial de um Latossolo Vermelho-Amarelo distrófico autoclavado (LVAd-Aut) + substrato comercial Tropstrato Florestal® autoclavado (1:1:1,v:v:v). O experimento dois foi composto por quatro formulações de substrato contendo SRPM, LVAd-Aut e substrato comercial autoclavados (SC-Aut), onde esses receberam ou não a adição de inóculo de FMA (Mix), composto pelas espécies Gigaspora decipiens, Rhizophagus clarus e Scutellospora heterogama. Os tratamentos deste experimento consistiram de: T1 (LVAd-Aut + SC-Aut), T2 (LVAd-Aut + SC-Aut + Mix), T3 (LVAd-Aut + SC-Aut + SRPM) e T4 (LVAd-Aut + SC-Aut + SRPM + Mix), com seis repetições, totalizando 24 unidades experimentais por espécie. Ao final de cada experimento, realizou-se a determinação da taxa de colonização micorrízica (CM), a abundância de esporos presentes no substrato (AE) e as medições da altura total da parte aérea (H), diâmetro do coleto (DC), volume do sistema radicular (VR), massa de matéria seca da parte aérea (MSPA), raízes (MSR) e total (MST); relações H/DC, H/MSPA, MSPA/MSR, Índice de Qualidade de Dickson (IQD) e, para o experimento dois, foi quantificada, também, a dependência micorrízica (DM). No experimento um, plantas de mangabeira sofreram redução da CM em resposta aos níveis de P testados e tiveram resposta linear positiva à aplicação de P ao analisar as relações H/MSPA e MSPA/MSR, enquanto a relação H/DC não sofreu efeito do P. As demais variáveis em mudas de H. speciosa foram influenciadas negativamente pela aplicação de P. Em relação ao experimento dois, as espécies em estudo tiveram DM variando de moderada a alta quando o SRPM foi adicionado ao substrato de cultivo. A adição do SRPM gerou incremento na H, DC, VR, MSPA, MSR, MST e aumento da qualidade de mudas de H. speciosa e B. gaudichaudii, em comparação às plantas do tratamento controle. Para a produção de mudas de qualidade de H. speciosa e B. gaudichaudii, ao usar o substrato utilizado neste ensaio, a adubação fosfatada é desnecessária, sendo recomendada a utilização de solo rizosférico da planta matriz e, ou inoculação com FMA para garantir a produção de mudas de mangabeira e mama-cadela. / Obtaining seedlings of quality is essential to the successful implementation of a forestry project, because the growth and survival of plants will be tied to its quality. Mineral nutrition and selection of symbionts microorganisms to be added to the substrate of seedling production are of great importance and influence the quality of the seedlings. However, for most of the native tree species of Cerrado, this knowledge has not yet been obtained, and may hinder or derail the production of seedlings. The present study aimed to evaluate the initial growth and the quality of seedlings of Hancornia speciosa (mangabeira) and Brosimum gaudichaudii (mama-cadela) in response to P and inoculation doses of microorganisms symbionts from the soil around the plants and inoculum of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF). Two experiments were evaluated, both being conducted in completely randomized design (CRD). The experiment was composed of five doses of P (0, 100, 200, 300 and 400 mg dm -3 ), with six repetitions, totalizing 30 experimental units per species, being the substrate a mixture of rhizospheric soil coming from the mother plant species (RSMP) + subsurface horizon of a Latossolo Vermelho-Amarelo distrófico (Oxisol) autoclaved (LVAd-Aut) + commercial Forest substrate autoclaved (SC-Aut) (1:1:1, v:v:v). The experiment two was composed of four substrate formulations containing RSMP, LVAd-Aut and SC-Aut, where these had or had not received the addition of AMF inoculum (Mix), composed by the species Gigaspora decipiens, Rhizophagus clarus and Scutellospora heterogama. The treatments evaluated in experiment two were T1 (LVAd-Aut + SC-Aut), T2 (LVAd-Aut + SC-Aut + Mix), T3 (LVAd-Aut + SC-Aut + RSMP) and T4 (LVAd-Aut + SC-Aut + RSMP + Mix), with six repetitions, totalizing 24 experimental units per species. At the end of each experiment, the determination of the rate of mycorrhizal colonization (CM), the abundance of spores present in the substrate (AE) and measurements of the total height of shot (H), stalk diameter (DC), volume of the root system (VR), mass of shoot dry matter (MSPA), mass of roots dry matter (MSR), and total dry matter (MST),beyond their relationships, and the Dickson’s quality index (IQD) and, for the experiment two, was quantified also the mycorrhizal dependence (DM). In one experiment, plants of mangabeira suffered reduction of CM in response to P levels tested and had positive linear response to P application to analyze relations H/MSPA and MSPA/MSR, while the ratio H/DC suffered no effect of P. The other variables in seedlings of H. speciosa were influenced negatively by applying P. compared to experiment two, the studied species had DM ranging from moderate to high when the RSMP was added to the substrate. The addition of the RSMP generated increase in H, DC, VR, MSPA, MSR, and MST, and increased the quality of seedlings of H. speciosa and B. gaudichaudii, as compared to the control treatment seedlings. For the production of quality seedlings of H. speciosa and B. gaudichaudii, when using the substrate used in this test, the phosphate fertilization it is recommended to use of rhizospheric soil of the mother plant and, or inoculation with AMF for guarantee the seedling production of mangabeira and mama- cadela.