Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2009. / Submitted by Raquel Viana (tempestade_b@hotmail.com) on 2010-04-26T18:08:43Z No. of bitstreams: 1 2009_MarianaLaundrydeMesquita.pdf: 3836459 bytes, checksum: 40c6d759f70183b5eb5f4a819e5d7976 (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-05-19T06:20:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_MarianaLaundrydeMesquita.pdf: 3836459 bytes, checksum: 40c6d759f70183b5eb5f4a819e5d7976 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-05-19T06:20:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_MarianaLaundrydeMesquita.pdf: 3836459 bytes, checksum: 40c6d759f70183b5eb5f4a819e5d7976 (MD5) / O Câncer é uma doença, que atinge mais ou menos 200 tipos de células, caracterizada pelo desvio no controle da proliferação, diferenciação e morte celular, com multiplicação desordenada das células, podendo invadir órgãos e tecidos. As dificuldades encontradas no seu tratamento são a resistência medicamentosa, toxicidade, baixa especificidade, além da maioria das formulações serem injetáveis, pois são moléculas insolúveis em água, causando edemas e necrose. As substâncias de plantas do Cerrado podem constituir modelos interessantes para o desenvolvimento de novas moléculas anticancerígenas. Neste estudo foi realizada uma triagem com quatrocentos e doze extratos de plantas do bioma Cerrado sobre três linhagens celulares de câncer humano: MDA-MB- 435 (melanoma), HCT-8 (cólon), e SF-295 (glioblastoma). Como resultados, 28 extratos inibiram significativamente as células, a uma concentração de 50 µ g/mL, e tiveram seus valores de CI50 (concentração inibitória para 50% das células) sobre as células MDA-MB- 435, HCT-8, SF-295 e HL-60 (leucemia promielocítica) determinados. Os extratos que apresentaram CI50 < 20 µ g/mL, em no mínimo três linhagens, foram considerados muito ativos, dentre eles os extratos hexânicos da casca da raiz de Kielmeyera coriacea e Simarouba versicolor e o extrato diclorometânico das folhas de Schinus terebinthifolius var. radiannus. Estes extratos foram submetidos a estudo químico biomonitorado, e substâncias com atividade anticancerígena foram isoladas. Do extrato hexânico da casca da raiz de Simarouba versicolor obteve-se a glaucarubinona substância com atividade anticancerígena importante. O fracionamento químico do extrato diclorometânico de Schinus terebinthifolius var. radiannus resultou no isolamento de cinco compostos, em fase de elucidação estrutural, além de um alquil resorcinol isolado pela primeira vez desta espécie, e do beta-sitosterol. Do extrato hexânico da casca da raiz de Kielmeyera coriacea foi obtida uma mistura contendo o derivado da vitamina E, δ-tocotrienol e seu peróxido-dímero. Estudos de mecanismo de ação com essa mistura sobre a linhagem HL-60 foram conduzidos. A mistura demonstrou possuir efeito citotóxico e antiproliferativo sobre essas células, causando alterações no ciclo celular como inibição na síntese de DNA e indução de morte por apoptose e necrose, sendo dessa forma uma amostra promissora para a investigação da relação estrutura-atividade. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Cancer is an ailment that affects more or less 200 different types of cells. Its major characteristic is the lack of proliferation control, differentiation and apoptosis, with an uncontrolled multiplication of cells, with the ability of invading organs and tissues. There are many difficulties in the cancer treatment, with the most frequent being the drug resistance, toxicity and low specificity. As most of the molecules are water insoluble, the administration of the drug in the blood stream may cause edema and necrosis. The substances obtained from the Brazilian Cerrado plants are interesting models for the development of new anticancer molecules. The present study investigated the cytotoxic potential of 412 Cerrado plant extracts against three human cancer cell lines: MDA-MB-435 (melanoma), HCT-8 (colon) and SF-295 (glioblastome). Of the tested extracts, 28 demonstrated a substantial antiproliferative effect, inhibiting significantly the tumor cell proliferation at 50 μg/ml. Complete dose-response curves were generated and IC50 values (concentration causing 50% inhibition of parasite growth) were calculated for these extracts against four cell lines MDA-MB-435, HCT-8, SF-295 and HL-60 (Promielocitic Leukemia). The extracts that showed IC50 values < 20 µg/ml, in at least three cell lines were considered very actives. Among them, the hexane extracts of Kielmeyera coriacea and Simarouba versicolor root bark, and the dichloromethane extract of Schinus terebinthifolius var. raddianus leaves. These extracts were submitted to a bioassay-guided fractionation and anticancer substances were isolated. From the hexane extract of Simarouba versicolor root bark we isolated the glaucarubinone, a substance with remarked anticancer activity. The bioassay-guided fractionation of the dichloromethane extract of Schinus terebinthifolius var. raddianus leaves resulted in the isolation of five compounds, including an alkyl resorcinol obtained for the first time from this species, and beta-sytosterol. From the hexane extract of Kielmeyera coriacea root bark were obtained a mixture of the vitamin E derivative, δ-tocotrienol and its peroxydimer. This mixture showed antiproliferative and cytotoxic effects against the cells, through DNA synthesis inhibition and induction of cell death by apoptosis and necrosis. It is a promising sample to have its structure-activity relationship investigated.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Ecologia, 2011. / Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros (tania@bce.unb.br) on 2012-03-20T14:33:00Z No. of bitstreams: 1 2011_MarinaNevesDelgado_Parcial.pdf: 219331 bytes, checksum: c425e96f9bb1b024b9d71ab1217c248f (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2012-03-21T12:21:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_MarinaNevesDelgado_Parcial.pdf: 219331 bytes, checksum: c425e96f9bb1b024b9d71ab1217c248f (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-21T12:21:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_MarinaNevesDelgado_Parcial.pdf: 219331 bytes, checksum: c425e96f9bb1b024b9d71ab1217c248f (MD5) / Nesse trabalho foi constatada a existência de variações nos atributos de defesas anti-herbivoria direta e indireta, e de tolerância em duas espécies nativas do cerrado brasileiro: Maprounea brasiliensis St. Hil. (Euphorbiaceae) e Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (Fabaceae - Mimosoideae). As defesas examinadas foram concentração de compostos fenólicos totais, taninos hidrolisáveis e taninos condensados, número e tamanho dos nectários extraflorais, volume do néctar extrafloral, quantidade relativa de açúcares do néctar e tamanhos de folhas. Apesar de indivíduos das duas espécies terem sido submetidos às mesmas condições ambientais e estarem distribuídos na mesma área de coleta, sob o mesmo tipo de solo e clima, eles apresentaram na maioria das vezes respostas distintas ao mesmo estímulo. Por exemplo, plantas de M. brasiliensis não produziram nectários adicionais quando submetidas a queimadas periódicas a cada dois anos durante 18 anos. Entretanto, plantas de S. adstringens responderam ao fogo freqüente, produzindo NEFs adicionais. Também houve resposta diferenciada entre as duas espécies quando o estímulo foi estações do ano, representadas pelo período seco do inverno e pelo período chuvoso do verão. Folhas de M. brasiliensis produzidas no período seco investiram mais em defesa do que em crescimento, apresentando mais NEFs e menor área foliar. Em S. adstringens não houve diferença nos atributos de defesa induzida após herbivoria artificial (número de NEFs) e entre as folhas produzidas no período seco e as produzidas no período chuvoso; entretanto, S. adstringens também investiu mais em crescimento no verão, uma vez que suas folhas foram mais largas nessa época. As plantas das duas espécies apresentaram respostas diferentes quando submetidas aos resíduos de fertilização de um experimento conduzido durante nove anos. M. brasiliensis foi mais responsiva aos resíduos de fertilização do que S. adstringens . As concentrações de nutrientes foliares e de taninos condensados foram alteradas em M. brasiliensis devido às modificações das características do solo determinadas por uma fertilização de médio prazo. Por outro lado, em S. adstringens, a concentração de metabólicos secundários não foi modificada, mas a concentração de nutrientes foliares também sofreu mudanças devido aos resíduos da fertilização. O experimento com diferentes níveis de herbivoria nos ramos marcados em plantas de M. brasiliensis demonstrou que as folhas novas produzidas após o estímulo formaram a mesma quantidade e tamanho de NEFs do que as folhas produzidas antes do estímulo. O mesmo tipo de experimento com diferentes níveis de 2 herbivoria nos ramos marcados em plantas de S. adstringens resultou em aumento no volume do néctar secretado. Portanto, em M. brasiliensis, as defesas anti-herbivoria, como número e tamanho dos NEFs e área foliar, variaram ao longo do ano e a concentração de taninos condensados se modificou devido aos resíduos da adição de fertilizantes. Já em S. adstringens , a presença de fogo freqüente aumentou o número de NEFs e as diferentes taxas de herbivoria artificial em ramos marcados aumentaram a quantidade de néctar produzido, além de que a área foliar variou ao longo do ano. No presente estudo foi constatada a não existência de trade-offentre defesas diretas e indiretas em M. brasiliensis e a variação da produção de néctar e da ultraestrutra e anatomia dos NEFs em diferentes fases ontogênicas da folha. Nosso estudo também mostrou que a fase ontogênica da planta em S. adstringensinfluencia a qualidade da folha para os herbívoros. Por isso, nesse trabalho nós comprovamos a plasticidade fenotípica de defesas anti-herbivoria de duas espécies de cerrado,Maprounea brasiliensis e Stryphnodendron adstringens, submetidas a experimentos controlados no campo que simulavam diferentes condições ambientais. Mostramos também que a expressão dos atributos de defesa é dependente da idade da folha e da idade do indivíduo. Tal estudo evidencia a importância de se estudar as conseqüências das variações nos atributos de defesa nas plantas devido às mudanças ambientais, uma vez que tais caracteres, como tamanho e número de NEFs, produção e qualidade de néctar extrafloral, concentração de fenólicos totais, taninos condensados e taninos hidrolisáveis, mediam interações ecológicas, podendo desencadear mudanças nas interações tri-tróficas. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / In this work it was found that there are variations in directly and indirectly anti- herbivore defenses traits and tolerance in two native species of Brazilian Cerrado: Maprounea brasiliensis St. Hil. (Euphorbiaceae) and Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (Fabaceae - Mimosoideae). The examined defenses were concentration of total phenolics, condensed tannins and hydrolysable tannins, size and number of extrafloral nectaries, extrafloral nectar volume, the relative amount of nectar sugars and leaf sizes. Although both species have been subjected to the same environmental conditions and are distributed in the same area, under the same kind of soil and climate, they presented different answers to the same stimulus. For example, plants of M. brasiliensis produced no additional nectaries when subjected to periodic burning for each two years during 18 years. However, plants of S. adstringens produced additional EFNs (extrafloral nectaries) in the same conditions. Leaves of M. brasiliensis produced in the dry season spent more on defense than growing, with more EFNs and smaller leaf area. In S. adstringens there was no difference in the induced defense traits after artificial herbivory and in the leaves produced during the dry season and those produced during the rainy season. However, S. adstringensalso invested more in growth in the summer, since their leaves are wider this time. Plants of both species showed different responses when exposed to fertilizer residues of a fertilization experimentconducted for nine years. M. brasiliensis was more responsive to fertilizer residues than S. adstringens. Nutrient concentrations and foliar condensed tannins were altered in M. brasiliensis due to changes in soil characteristics determined by medium-term fertilization. On the other hand, in S. adstringens, the concentration of secondary metabolites was not modified, but the concentration of foliar nutrients also changed due to residues of fertilization. The experiment with different levels of herbivory on plants in the fields demonstrated that the new leaves of M. brasiliensis produced after the stimulus formed the same amount and size of EFNs than leaves produced before the stimulus. The same type of experiment with different levels of herbivory in the fields in marked plants of S. adstringens resulted in an increase in the volume of nectar secreted. Therefore, in M. brasiliensis, the anti-herbivore defenses, such as number and size of EFNs and leaf area varied throughout the year and the concentration of condensed tannins has changed due to the addition of fertilizer residues. In S. adstringens, the presence of frequent fire increased the number of EFNs and the different artificial4 herbivory rates on marked branches increased the amount of nectar, and the leaf area varied over the years. The present study found that there is no trade-off between direct and indirect defenses in M. brasiliensis and there are variations in nectar production and ultra-structure and anatomy of EFNs in different leaf ontogenetic stages. Our study also showed that the ontogenetic stage of the plant in S. adstringens influences the quality of the leaf for herbivores. Therefore, in this work we proved the phenotypic plasticity of anti-herbivore defenses in two species of Cerrado, Maprounea brasiliensis and Stryphnodendron adstringens, submitted to field experiments that simulated different environmental conditions. We also show that expression of the attributes of defense is dependent on leaf and individual age. This work highlights the importance of studying the consequences of variations in the defense attributes of plants due to environmental changes. Such traits, as size and number of EFNs, extrafloral nectar production and quality, concentration of total phenolics, condensed tannins and hydrolysable tannins, mediate ecological interactions and can trigger changes in tri-trophic interactions.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Ecologia, 2008. / Submitted by Thaíza da Silva Santos (thaiza28@hotmail.com) on 2011-02-10T18:45:42Z No. of bitstreams: 1 2008_MarisaAraujoMamede.pdf: 4823530 bytes, checksum: e2f6723f827d2f9709bc96ef26971353 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2011-02-10T23:17:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_MarisaAraujoMamede.pdf: 4823530 bytes, checksum: e2f6723f827d2f9709bc96ef26971353 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-02-10T23:17:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_MarisaAraujoMamede.pdf: 4823530 bytes, checksum: e2f6723f827d2f9709bc96ef26971353 (MD5) / Este trabalho teve como objetivo estudar alguns aspectos relacionados com a reprodução e a persistência de Syagrus flexuosa, uma palmeira clonal encontrada em abundância em áreas de cerrado na região do DF. Foram abordados especificamente os temas de fenologia reprodutiva e sucesso reprodutivo de um conjunto de seis amostras localizadas na Fazenda Água Limpa (quatro parcelas) e na Reserva Ecológica do IBGE (duas parcelas) durante um período de 16 meses, entre setembro de 2006 e dezembro de 2007. Ambas as áreas experimentais estão situadas no Distrito Federal, a cerca de 30 km do Campus Universitário Darcy Ribeiro da UnB. Adicionalmente, verificou-se o efeito do fogo sobre estes aspectos, e ainda sobre a atividade de rebrota vegetativa dos indivíduos; através da comparação entre os resultados obtidos em parcela experimental submetida a queima bienal e em parcelas não-queimadas. Os resultados indicaram um padrão fenológico de agregação das fenofases reprodutivas de S. flexuosa. O processo completa dura aproximadamente um ano, sendo que a floração ocorre próxima ao auge do período chuvoso e a dispersão de frutos ocorre durante a transição entre os períodos seco e chuvoso. O fogo não exerceu efeito significativo sobre a fenologia dos indivíduos. Baixos valores de sucesso reprodutivo (cerca de 11%) foram verificados, assim como a ocorrência de altas taxas de abortamento de frutos e predação de sementes. Do total de frutos iniciados, 42% foram abortados e 28 tiveram as suas sementes predadas pelas larvas de Pachymerus sp. O fogo exerceu um efeito significativo sobre o sucesso reprodutivo dos indivíduos, que foi superior na área queimada, comparativamente às demais áreas experimentais. Tal efeito é explicado pela observação de taxas de predação significativamente inferiores na área queimada, em comparação com as demais. Finalmente, foi possível observar que a atividade de rebrota vegetativa dos indivíduos é influenciada de forma positiva pela passagem do fogo, pois se observou um aumento significativo do número de rebrotas vegetativas por indivíduo após a queima. Juntos, estes resultados indicam que S. flexuosa aparenta ser uma espécie bem adaptada ao regime de fogo comum na região do cerrado brasileiro. Esta palmeira clonal apresenta o potencial de se beneficiar da ocorrência de queima, pelo menos em curto prazo; através da estimulação da atividade de rebrota dos indivíduos e ainda da diminuição da predação de suas sementes. Os efeitos em longo prazo de um regime de queima freqüente sobre a reprodução e a persistência da espécie permanecem ainda desconhecidos. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The objective of this study was to evaluate aspects related to reproduction and persistence of Syagrus flexuosa Mart. Becc., an abundant clonal palm in the cerrados near Brasília, DF. Specifically the reproductive phenology and reproductive success were studied during a 16 month period, from September 2006 through December 2007, in six plots located on the Fazenda Água Limpa (four plots) and the Reserva Ecológica of IBGE (two plots). Both areas are located in the Federal District of Brazil approximately 30 km from the campus of the University of Brasilia. The effect of fire on these aspects was also studied along with the resprouting capacity of the individuals through a comparison of results obtained in an experimentally burned plot and a control plot on the Reserva Ecológica do IBGE. The results showed an aggregated phenological pattern for all reproductive phenophases of S. flexuosa. The entire process lasts approximately one year with the height of the flowering period at the peak of the rainy season and dispersal of the ripe fruits during the transition between the dry and rainy seasons. Fire did not have a significant effect on the phonological pattern. Reproductive success was considered low (around 11%) with a high percentage of fruit abortion and predation. From the total number of initiated fruits, 42% were aborted and 28% were predated by larva of Pachymerus sp. Fire had a significant effect on reproductive success that was higher in the burnt plot compared with the unburnt plots. This effect may be explained by the fact that seed predation in the burnt plot was significantly lower than in the other plots. Finally, it was possible to observe that vegetative resprouting was positively influenced by fire since the number of resprouts per individual in the burnt plot was significantly higher than in the unburnt plot. Overall, these results indicate that S. flexuosa is adapted to the fire regime of this area. This clonal palm has the potential to benefit from the passage of a fire, at least in the short term, through stimulus of resprouting and reduction in seed predation, however, the long term effects of fire on reproduction and persistence of this species are still unknown.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Ecologia, 2010. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2011-03-03T13:34:34Z No. of bitstreams: 1 2010_CamilaMesquitaLopes.pdf: 3692099 bytes, checksum: f63a278e0dd01f5bc2fc55e7a8f1e2a5 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2011-03-18T00:39:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_CamilaMesquitaLopes.pdf: 3692099 bytes, checksum: f63a278e0dd01f5bc2fc55e7a8f1e2a5 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-03-18T00:39:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_CamilaMesquitaLopes.pdf: 3692099 bytes, checksum: f63a278e0dd01f5bc2fc55e7a8f1e2a5 (MD5) / Com o crescente desmatamento sofrido pelo Cerrado, a restauração de áreas perturbadas deste bioma torna-se assunto de relevante interesse na atualidade. Espécie facilitadora (nurse plant) é aquela que propicia significativa melhoria nas qualidades ambientais, de modo a aumentar a probabilidade de ocupação deste ambiente por outras espécies. Se por um lado estudos anteriores em laboratório demonstraram caráter alelopático das folhas da espécie Solanum lycocarpum A. St-Hil. (Solanaceae), a lobeira, na germinação e estabelecimento de espécies agrícolas, outros estudos indicaram maior diversidade de espécies vegetais nativas e exóticas ocorrendo embaixo da sua copa em relação a áreas abertas. No presente estudo buscou-se ampliar as informações sobre esse papel facilitador de indivíduos plantados em 2005 da espécie S. lycocarpum, analisando modificações nas condições ambientais sob a sua copa e sua influência na ocupação deste ambiente por outras espécies vegetais, em uma área desmatada de Cerrado Típico na área do INMET em Brasília, Distrito Federal (DF). Assim, o microambiente sob e fora da copa dos dez indivíduos plantados de S. lycocarpum considerados no estudo anterior, foram analisados, assim como áreas controle (sem qualquer influência de copa de árvores), para diferentes variáveis ambientais: nos primeiros 05 cm da superfície do solo – resistência à penetração, umidade, textura, densidade aparente, condutividade hidráulica saturada (Ks médio) e conteúdo de nutrientes (Ca, Mg, Al, H+Al, pH, matéria orgânica, K e P); ao nível do solo - interceptação de luz e espessura da camada de serapilheira. Além disso, para comparação com área nativa, também foram selecionados dez pontos aleatórios no fragmento do Cerrado adjacente, analisando-se a textura, densidade aparente, Ks médio e conteúdo de nutrientes do solo. Nas áreas embaixo e fora da copa dos indivíduos de S. lycocarpum foi também avaliada a distribuição da cobertura de estratos vegetais, através do método da interceptação de linha. Para tal, foi mensurada a porcentagem de cobertura da biomassa dos estratos vegetais (invasora/ruderal, gramínea nativa, herbáceo/arbustivo e lenhoso) e de cobertura de solo (solo exposto e serapilheira). Ao todo, em cada uma de oito linhas partindo do tronco de cada indivíduo de S. lycocarpum em direção à área externa e foram separadas em quatro seções: SI 1 – porção mais próxima ao tronco; SI 2 – porção adjacente à SI 1, ainda sob a copa; SE 1 – primeira porção fora da copa de S. lycocarpum; SE 2 – porção mais externa a linha. Com o auxílio de uma fita métrica, foi mensurada, em centímetro, a interceptação dos seis estratos nas oito linhas de cada indivíduo para o cálculo da porcentagem de cobertura dos estratos em cada seção. Os resultados mostraram que a área embaixo da copa de S. lycocarpum apresentou alteração em diversos parâmetros ambientais, tais como maior interceptação de luz, maior umidade, menor resistência à penetração, maior conteúdo de Ca, Mg e K, maior pH e menor conteúdo de Al e H+Al do que a área externa à copa e o controle. Em relação à área do Cerrado Típico adjacente, o solo embaixo da copa de S. lycocarpum apresentou menor condutividade hidráulica saturada, maior densidade aparente, maior pH, conteúdo de alumínio quatro vezes menor, maior conteúdo de nutrientes (K, Ca e Mg), menor conteúdo de H+Al e de matéria orgânica. Em relação à cobertura, os estratos herbáceo/arbustivos apresentaram diferenças entre a SI 1 e a SE 2 e o lenhoso, entre a SI 2 e a SE 1, com maior cobertura nas porções fora da copa do que embaixo desta para ambos os estratos. Pela análise de correlação entre variáveis ambientais e os estratos vegetais, observou-se que a serapilheira (estrato) se relacionou negativamente com a resistência à penetração e, positivamente, com umidade, interceptação de luz, potássio, magnésio e densidade de indivíduos; o solo exposto se relacionou positivamente com a resistência à penetração e, negativamente com umidade, serapilheira (espessura), interceptação de luz, potássio e densidade de indivíduos. Os demais estratos não apresentaram correlação tão elevada com as variáveis ambientais, sugerindo que ainda não houve tempo suficiente para que essas variáveis pudessem influenciar na distribuição de estratos embaixo da copa de S. lycocarpum e fora dela. Entretanto, a modificação do ambiente sob a copa S. lycocarpum através de um possível enriquecimento do solo com nutrientes, diminuição da compactação e da acidez do solo e produção de sombra e serapilheira, deve contribuir para facilitar o futuro estabelecimento de espécies do estrato lenhoso nesse local. A maior diversidade de espécies encontrada embaixo da copa de S. lycocarpum observada em estudo anterior e a modificação do ambiente observada neste estudo conferem à espécie as características de facilitadora ou nurse plant. Tal status contrasta com o caráter alelopático observado em laboratório com espécies cultivadas e demonstra que tal característica não se aplica em ambiente natural e com espécies nativas. Assim, a espécie S. lycocarpum pode ser fortemente recomendada para a restauração de áreas perturbadas de Cerrado considerando não apenas o benefício ambiental, mas o baixo custo desta utilização. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The restoration of disturbed areas of Cerrado is a subject of considerable interest nowadays due to increasing deforestation or loss of this biome. Facilitation is understood as the ability of a species in providing a significant improvement in environmental conditions allowing increased probability of occupation of this environment by other species. Previous studies in laboratory showed an allelopathic character of the leaves of Solanum lycocarpum A. St-Hil. (Solanaceae), popularly known as wolf apple, on germination and establishment of agricultural species. In a study conducted in 2008, however, there was greater diversity of native and exotic plant species occurring under the canopy of individuals of S. lycocarpum, grown from seed in November 2005, than outside the canopy and control (area without the influence of individual trees). This study sought to evaluate the role of facilitator (nurse plant) of the same individuals of the species S. lycocarpum studied in 2008, by changing the environment conditions under its canopy, so as to allow occupation of other plant species and influencing the distribution of plant strata, in a disturbed area of Cerrado sensu stricto in Brasília, Distrito Federal (DF). The ten individuals of S. lycocarpum analyzed in that previous study were studied in this work to achieve the intended goals. Some environmental factors were compared between the area beneath and outside canopy of the planted individuals of S. lycocarpum and between the control (area with no effect of canopy trees) and the adjacent Cerrado fragment. The following environmental variables were analyzed: in the first 05 cm of the soil surface – penetration resistance, moisture, texture, bulk density, saturated hydraulic conductivity (average ks) and nutrient contents (Ca, Mg, Al, H Al, pH, organic matter, K and P); at ground level – light interception, thickness of the litter. The distribution of plant cover strata was evaluated in the areas under and outside canopy of the planted individuals of S. lycocarpum. To this end, the percentage of coverage of the strata biomass plant (weed / ruderal, native grass, herbaceous / shrub and woody) and ground cover (bare soil and litter) was measured through the method of trapping line. Eight lines from the trunk of each individual of S. lycocarpum toward the outer area and were separated into four sections, namely: SI 1 - closest to the trunk portion; SI 2 - SI portion adjacent to one, still under the canopy , SE 1 - first outside portion of the crown of S. lycocarpum; SE 2 - outer portion the line. The interception of the six strata in the eight lines of each individual of S. lycocarpum was measured in centimeter, using a tape measure and then calculated the percentage of coverage for each section of the strata. The results showed that the canopy of S. lycocarpum changed several environmental variables, such as increased light interception, increased humidity, lower resistance to penetration, increased content of Ca, Mg and K, higher pH and lower Al contents of Al and H than the area outside the canopy and control. Compared to typical Cerrado area, the soil beneath the canopy of S. lycocarpum had lower hydraulic conductivity, higher density, higher pH, four times lower aluminum content, higher nutrient content (K, Ca and Mg), and lower content of H+Al and organic matter. Regarding coverage, the herbaceous / shrubs strata showed differences between SI 1 and SE 2 and the woody one, between SE 1 and SI 2, with greater coverage in portions outside the canopy than below for both strata. For the correlation analysis between environmental variables and plant strata, it was observed that the litter (coverage) correlated negatively with the penetration resistance and positively with humidity, light interception, potassium, magnesium and density of individuals; the exposed soil is positively correlated with penetration resistance and negatively with moisture, litter (thickness), light interception, potassium and plant abundance. The other layers were not as high a correlation with environmental variables and may indicate that there wasn‟t enough time for these variables influenced the distribution of strata beneath the canopy of S. lycocarpum and beyond. However, modifying the environment under the canopy S. lycocarpum by enriching the soil with nutrients, reduced soil compaction and soil acidity and the production of shade and litter, should contribute to facilitate the establishment of woody strata in the future. The greatest diversity of species found underneath the canopy of S. lycocarpum observed in a previous study and modification of the environment showed in this study reinforce that this is a facilitator species or a nurse plant. This status contrasts with the allelopathic character reported in laboratory with cultivated species, and demonstrates that this feature does not apply in natural environment and with native species. Thus, the species S. lycocarpum can be strongly recommended for the restoration of disturbed areas of Cerrado at low cost.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, Programa de Pós-Graduação em Fitopatologia, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-05-13T16:33:42Z No. of bitstreams: 1 2016_SergioMiguelVélezZambrano_Parcial.pdf: 6771626 bytes, checksum: 2830fed5ee5c131a9b1916181d9c468e (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2016-05-20T12:47:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_SergioMiguelVélezZambrano_Parcial.pdf: 6771626 bytes, checksum: 2830fed5ee5c131a9b1916181d9c468e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-20T12:47:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_SergioMiguelVélezZambrano_Parcial.pdf: 6771626 bytes, checksum: 2830fed5ee5c131a9b1916181d9c468e (MD5) / Foi analisado um total de 80 exsicatas provenientes principalmente de Mato Grosso (Parques Estaduais Ricardo Franco e Serra Azul) e outras aréas de Cerrado do Distrito Federal. Descreveu-se um total de 42 fungos, sendo estes: 7 hifomicetos (Periconiella campo-grandensis, P. qualea-grandiflorae, Phaeoidiomyces sp., Parastenella sp., Trichomatomyces byrsonimae, Vesiculohyphomyces sp. e um provável gênero novo de hifomiceto; 3 celomicetos (Asterostomella dillenicola, Geastrumia polystigmatis, e um provável gênero novo); 32 ascomicetos teleomórficos (Asterina sp., A. banisteriae, A. diplocarpa, A. indecora, Irenopsis banisteriae, Johansonia sp., Lembosia sp. em Miconia sp., Lembosia sp. em Pouteria torta, L. dominguensis, Meliola sp. em Bahunia sp., M. alibertiae, M. desmodii – laxiflori, M. kernii, M. sorindeiae, M. stizolobii, M. voacangae, Micropeltis sp., Nematostigma sp., Pallawaniella orbiculata, Phaeodimeriella guarapaiensis, Phillipsiella sp., Phyllachora spp., P. astronii, P. maprouneae, P. puncta subs. dalbergiicola, P. qualeae, P. pouteriae, Rhynchomeliola lomatiae. Assim, foram estudadas 27 espécies conhecidas, 13 prováveis espécies novas e 2 prováveis gêneros novos. / A total of 80 herbarium specimens of fungi collected in the Distrito Federal, and Mato Grosso (State Parks: Ricardo Franco and Serra Azul), were studied. A total of 42 fungi were detected being 7 hyphomycetes (Periconiella campo-grandensis, P. qualea-grandiflorae, Phaeoidiomyces sp., Parastenella sp. , Trichomatomyces byrsonimae, Vesiculohyphomyces sp. and a probably new genus; 3 coelomycetes (Asterostomella dillenicola, Geastrumia polystigmatis, and a probably new genus); 32 ascomycete sexual morphs (Asterina banisteriae, A. diplocarpa, Asterina sp, A. indecora, Irenopsis banisteriae, Johansonia sp., Lembosia dominguensis, Lembosia spp. in Miconia sp., Lembosia sp. in Pouteria torta, Meliola alibertiae, M. desmodii -laxiflori, M. kernii, M. sorindeiae, Meliola sp. in Bauhinia sp., M. stizolobii, M. voacangae, Micropeltis spp., Nematostigma sp., Pallawaniella orbiculata, Phaeodimeriella guarapaiensis, Phillipsiella sp., Phyllachora astronii, P. maprouneae, P. puncta subs. dalbergiicola, P. qualeae, P. pouteriae, Phyllachora spp., Rhynchomeliola lomatiae. Thus, this study covered a total of 27 known fungal species, 13 provably new species, and 2 probably new genera.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, 2008. / Submitted by Ângela Christina (angelchris@bce.unb.br) on 2009-04-29T18:19:44Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_2008_GustavoRibeiroMontoro.pdf: 10132628 bytes, checksum: 3bbc4047cb788249413d85ae3a52b7a0 (MD5) / Submitted by Ângela Christina (angelchris@bce.unb.br) on 2009-05-05T18:13:37Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_2008_GustavoRibeiroMontoro.pdf: 10132628 bytes, checksum: 3bbc4047cb788249413d85ae3a52b7a0 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2009-05-06T12:26:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_2008_GustavoRibeiroMontoro.pdf: 10132628 bytes, checksum: 3bbc4047cb788249413d85ae3a52b7a0 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-05-06T12:26:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_2008_GustavoRibeiroMontoro.pdf: 10132628 bytes, checksum: 3bbc4047cb788249413d85ae3a52b7a0 (MD5) Previous issue date: 2008-10 / Rejected by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br), reason: Ângela, Favor incluir referência e data de publicãção. Grata, Jacqueline on 2009-04-30T11:33:46Z (GMT) / A fase de plântula é momento após a germinação crítico para o estabelecimento das espécies vegetais em seus ambientes naturais e/ou em viveiros. Deve-se, portando, conhecer as estratégias adotadas pelas espécies para seu estabelecimento. A compreensão e diferenciação das plântulas em determinada região podem levar ao melhor conhecimento dos mecanismos de manutenção desta vegetação, contribuindo nos trabalhos de inventário, conservação e recuperação. Atualmente, as plântulas são classificadas com base principalmente na exposição, posição e textura dos cotilédones durante seu crescimento inicial. No presente trabalho foram coletadas sementes de cinco matrizes para 14 espécies do Cerrado sentido restrito, entre outubro de 2006 e novembro de 2007. Após aplicação de tratamentos adequados para a germinação das sementes para cada espécie, 20 sementes foram semeadas a 1 cm de profundidade em sacos de polietileno para a formação das plântulas. O substrato utilizado foi o Latossolo vermelho com esterco curtido de gado na proporção 1:3. (analisado quimicamente pela Escola de Agronomia-UFG). Os saquinhos foram colocados a pleno sol e irrigados diariamente as 06:00 e as 16:00 hs, com cerca de ± 20 ml de água por saquinho. Para tal irrigação utilizou-se pulverizadores e temporizador. Após a emergência, as plântulas foram classificadas em fanerocotiledonares (cotilédones expostos) ou criptocotiledonares (cotilédones mantidos no tegumento); com cotilédones epígeos (cotilédones elevados acima da superfície do solo) ou hipógeos (cotilédones mantidos abaixo ou sobre a superfície); cotilédones foliáceos (finos e fotossintéticos) ou de reserva (carnosos armazenadores). De acordo com esta classificação Aspidosperma tomentosum Mart., Lafoensia pacari A.St.-Hil., Pseudobombax longiflorum (Mart. & Zucc.) A. Robyns e Tabebuia aurea (Manso) Benth. & Hook. f. ex S. Moore apresentam plântulas fanero-epígeas-foliáceas (FEF), Aeghiphila lhotskiana Cham, Caryocar brasiliense Cambess. e Sterculia striata A.St.-Hil. & Naudin. são cripto-hipógeo-de reserva (CHR); Copaifera langsdorffi Desf., Dalbergia miscolobium Benth., Enterolobium gummiferum (Mart.) J. F. Macbr., Hymenaea stigonocarpa Mart. ex Hayne e Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville são fanero-epígeas-de reserva (FER), enquanto que Eriotheca pubescens (Mart. & Zucc.) Schott & Endl. e Magonia pubescens A.St.-Hil. são fanero-hipógea-de reserva (FHR). Dos cinco grupos morfofuncionais possíveis apenas o criptocotiledonar-epígeo-de reserva não foi encontrado. Assim como em outras floras tropicais, as plântulas do Cerrado sentido restrito em geral apresentam seus cotilédones expostos do tipo FER e FEF. Os resultados obtidos demonstram as diferentes estratégias adotadas pelas espécies para se estabelecerem em ambiente tão heterogêneo como o do Cerrado sentido restrito, que anualmente passa por longo período muito seco e outro período úmido. As espécies com cotilédones carnosos retidos na sementes e/ou frutos como C. brasiliense dispersam suas sementes na estação chuvosa, de forma a maximizar a sobrevivência de suas plântulas no período seco. Já espécies com cotilédones foliáceos em geral dispersam suas sementes na estação seca, germinando e se estabelecendo na estação chuvosa. Esta característica é fortalecida com a formação de frutos ou sementes aladas, leves e de fácil dispersão pelo vento. A diferenciação morfológica entre protofilos e metafilos foi observada entre as espécies estudadas. Três formas relacionadas com a heterofilia foram encontradas: plântulas Tipo-I: protofilos e metafilos de igual morfologia; Tipo II: protofilo inicial diferente dos metafilos; Tipo-III: protofilos iniciais só modificam a forma em nós posteriores, caracterizando a formação dos metafilos. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The seedling stage is an important moment between germination and establishment of a plant species in natural environments and/or in nursery. The better comprehension of this stage may improve knowledge about species and community fitness as well as an important tool for vegetation inventary and conservation issues. Currently seedlings are mainly classified according to their cotyledons exposure, position and textures during this early stage of growth. This work was designed to assess 14 cerrado woody species seedlings. Five matrix of each species were marked in field to colect seeds or fruits from October (2006) to November (2007). After adequate pregermination treatments 20 seeds of each species were sawed in plastic bags filled with a substrat including a mix, 3:1, red latossoil and tanned cattle manure. This mix was analysed on its physical nad chemical properties. The olastic bags were placed under open sun and recieved two daily irrigations, 6:00 a.m and 4:00 p.m, giving c.a ± 20 ml water per bag. After germination seedlings were classified as phanerocotylar when showing cotyledons or cryptocotylar, cotyledons hidden inside seed coat; epigeal, cotyledons placed above soil surface, or hipogeal, cotyledons under or over soil surface; as well as foliaceous, thin and photosynthetic cotyledons, or reservouir, fleshy keepers cotyledons. According to this classification, Aspidosperma tomentosum Mart., Lafoensia pacari A. St.-Hil., Pseudobombax longiflorum (Mart. & Zucc.) A. Robyns and Tabebuia aurea (Manso) Benth. & Hook. f. ex S. Moore were classified as phanerocotylar-epigeal-foliaceous, PEF-seedlings; Aeghiphila lhotskiana Cham, Caryocar brasiliense Cambess. and Sterculia striata A.St.-Hil. & Naudin. were cryptocotylar-hypogeal-reserve, CHR; Copaifera langsdorffii Desf., Dalbergia miscolobium Benth., Enterolobium gummiferum (Mart.) J. F. Macbr., Hymenaea stigonocarpa Mart. ex Hayne and Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville were phanerocotylar-epigeal-reserve, PER, and finally, Eriotheca pubescens (Mart. & Zucc.) Schott & Endl. and Magonia pubescens A. St.-Hil. were phanerocotylar-hypogeal-reserve, PHR-seedlings. Out of five morpho-functional seedlings group, only cryptocotiledonarepigeous- reservouir, CER was not found, just like in other paleotropical and neotropical floras. Results here obtained showed species distinct strategies in order to establishment in a region under seasonal climate and heterogeneous soil environment. CHR species as C. brasiliense disperses seeds during the rainy season, in order to assure seedlings surviving in the next dry season. On the other hand, PEF species disperses seeds during the dry season, which would germinate and establish during the rainy season. This behaivour is strengthened by the occurence of winged fruits or seeds. Heterophylly was determined for 6 (43%) out of the 14 species and divided in three categories: Type I: protophyll and metaphyll showing equal morphology Type II: earlier protophyll distinct form later metaphyll; Type III: earlier protophyll change much later in metaphyll.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2018. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2018-05-02T18:43:13Z No. of bitstreams: 1 2018_WanessadeSouzaCardosoQuintão.pdf: 2735530 bytes, checksum: 9642af8380e33a37bcee80efcf354c2e (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-05-28T16:57:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2018_WanessadeSouzaCardosoQuintão.pdf: 2735530 bytes, checksum: 9642af8380e33a37bcee80efcf354c2e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-28T16:57:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018_WanessadeSouzaCardosoQuintão.pdf: 2735530 bytes, checksum: 9642af8380e33a37bcee80efcf354c2e (MD5) Previous issue date: 2018-05-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). / Brosimum gaudichaudii é uma planta do Cerrado brasileiro que possui furanocumarinas com potencial terapêutico para tratamento do vitiligo, com destaque ao bergapteno e psoraleno. Nesse sentido, este trabalho teve como objetivo desenvolver nanoemulsões, formulações capazes de incorporar ativos vegetais e modular a permeação através da pele, a partir de extratos de Brosimum gaudichaudii, para tratamento tópico do vitiligo. Os compostos bergapteno e psoraleno foram quantificados por Cromatógrafo Líquido de Alta Eficiência (HPLC). Extratos etanólicos do pó (EXT1) e da casca da raiz (EXT2) de Brosimum gaudichaudii foram preparados e caracterizados por triagem fotoquímica. Apresentaram poucas diferenças na detecção de compostos, mas houve formação de diferentes cristais. Nanoemulsões óleo-em-água (O/A) de cada extrato foram preparadas utilizando Labrasol® e Plurol® para incorporar o EXT1 e o EXT2, obtendo NE1 e NE2. O tamanho de gotícula, o potencial zeta, pH e teor de ativos nas nanoemulsões foram avaliados. Os efeitos dos extratos e padrões sobre a viabilidade, migração e proliferação celular foram analisados em melanócitos e queratinócitos humanos. Além disso, o potencial de irritabilidade das nanoemulsões foi avaliado por ensaio de HET-CAM. No estudo de estabilidade, as nanoemulsões apresentaram pH em torno 4,0. As nanoemulsões apresentaram tamanho de gotícula tamanho ideal, entre 50 e 200 nm. Houve aumento do tamanho de gotícula das nanoemulsões armazenadas em câmara climática, o que pode ser atribuído ao aumento da temperatura. O potencial zeta das nanoemulsões foi negativo, menor que -10 mV. Nos estudos de permeação in vitro, as nanoemulsões reduziram a permeação dos ativos bergapteno e psoraleno. Os extratos demonstraram certa citotoxicidade em melanócitos e queratinócitos, mas estimularam migração celular. As duas nanoemulsões foram classificadas como irritantes leves nos ensaios de HET-CAM e adequadas para uso tópico. As nanoemulsões desenvolvidas nesse trabalho, portanto, apresentaram-se estáveis, com aspectos físicos e características organolépticas adequadas para aplicação tópica, e foram capazes de concentrar os ativos na pele, reduzindo a permeação através da pele, o que poderia causar um impacto negativo na segurança do tratamento do vitiligo. / Brosimum gaudichaudii is a Brazilian Cerrado plant which has furanocumarinas with therapeutic potential for vitiligo treatment, like bergapteno and psoralen. Considering its therapeutic potential, this work aimed to develop nanoemulsions, which are formulations capable of incorporating plant compounds and regulate the permeation through the skin, using Brosimum gaudichaudii extracts, for topical treatment of vitiligo. Bergapteno and psoralen compounds were quantified by high efficiency liquid chromatograph (HPLC). Ethanolics extracts of the Powder (EXT1) and the root bark (EXT2) of Brosimum gaudichaudii were prepared and characterized by photochemical screening. They showed few differences in the detection of compounds, but they produced different crystals conformations. Oil-in-water nanoemulsions (O/A) of each extract were prepared using Labrasol ® and Plurol ® to incorporate EXT1 and EXT2, obtaining NE1 and NE2. The droplet size, the zeta potential, pH and contente of bergapten and psoralen in the nanoemulsions were evaluated. The effects of the extracts and standards on the viability, migration and cellular proliferation were analyzed in human melanocytes and keratinocytes. In addition, the irritability potential of the nanoemulsions was evaluated by HET-CAM assay. In the stability study, the nanoemulsions presented PH around 4.0. The nanoemulsions presented an optimal droplet size between 50 and 200 nm. There was an increase in the droplet size of the nanoemulsions stored in the climate chamber, which can be attributed to the increase in temperature. The nanoemulsions’ zeta potential was negative, less than -10 mV. In the in vitro permeation studies, nanoemulsions reduced the permeation of bergapteno and psoralen compounds. The extracts demonstrated a certain cytotoxicity in melanocytes and keratinocytes, but they stimulated cellular migration. The nanoemulsions were classified as mild irritants in the HET-CAM assay and suitable for topical use. The nanoemulsions developed in this work, therefore, were stable, with physical aspects and organoleptic characteristics suitable for topical application, and were able to concentrate the compounds on the skin, reducing the permeation through the skin, the That could cause a negative impact on the safety of vitiligo treatment.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2016. / Submitted by Aline Mequita (alinealmeida@bce.unb.br) on 2016-11-21T16:28:26Z No. of bitstreams: 1 2016_GabrielaCorezziWerneck.pdf: 1385523 bytes, checksum: c2833d3a8449c2a1c2ac26e1daebbd63 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2017-01-06T18:37:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_GabrielaCorezziWerneck.pdf: 1385523 bytes, checksum: c2833d3a8449c2a1c2ac26e1daebbd63 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-06T18:37:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_GabrielaCorezziWerneck.pdf: 1385523 bytes, checksum: c2833d3a8449c2a1c2ac26e1daebbd63 (MD5) / Proteases são enzimas, que catalisam a hidrolise das ligações peptídicas. Estas enzimas são aplicadas em diversas indústrias como a alimentícia, farmacêutica, cosmética, de couro e de detergente. São produzidas por animais, plantas e microrganismos. Entre seus produtores encontram-se os fungos endofíticos, que são microrganismos que vivem no interior de plantas de forma simbiótica. Sabendo disso, o objetivo principal deste trabalho foi isolar fungos endofíticos de plantas do cerrado, avalia-los quanto á produção de proteases extracelulares, visando aplicação industrial. Foram isolados 58 fungos de 13 espécies de plantas endêmicas do cerrado. Primeiramente, foi realizada uma triagem para avaliar quais fungos eram produtores de protease, 36 fungos demonstraram halo indicando produção de protease em meio de cultura ágar-leite. Foi realizado ensaio enzimático utilizando azocaseína 0,5% como substrato para avaliar quantitativamente a produção de proteases. Os produtores que demonstraram maior atividade de protease foram os fungos endofíticos codificados como BR, OH03, PT02, PEQ03 e KC01. O fungo BR, apresentou 41 UI/mL de atividade proteolítica, pH ótimo 7,0 e temperatura ótima de 60°C e foi escolhido para dar continuidade ao trabalho. Visando a otimização da produção de protease foram testados meios com diferentes fontes de nitrogênio e carbono, a maior produção de proteases ocorreu no meio contendo peptona, extrato de levedura e glicose. A curva de crescimento mostrou que o melhor dia de produção da enzima foi o 9° dia. A protease foi parcialmente purificada utilizando cromatografia de troca iônica. A fração parcialmente purificada foi caracterizada com atividade ótima em pH 7,0 e 60°C e manteve 100% desta atividade a 60°C por 1 hora. A enzima foi testada como removedor de manchas para a indústria de detergentes melhorando a remoção de manchas quando adicionada a um detergente comercial e demonstrou ser compatível com marcas de detergente para roupas comerciais. ___________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Proteases are enzymes which catalyze the hydrolysis of peptides bonds. These enzymes are applied in various industries such as food, pharmaceutical, cosmetics, leather and detergent. They are produced by animals, plants and microorganisms. Among its producers are the endophytic fungi, which are microorganisms that live inside plants symbiotically. Thus, the aim of this study was to isolate endophytic fungi of the Cerrado biome plants and evaluate the production of extracellular proteases for an industrial application. It was isolated 58 endophytic fungi from 13 different species of endemic plants. First, a screening was performed to evaluate fungi protease producing. 36 fungi has shown halo production using milk agar culture. Enzyme assay was performed using azocasein 0.5% as substrate to evaluate quantitatively the production of proteases. The best producers were endophytes encoded as BR, OH03, PT02, PEQ03 and KC01. Since then BR fungus stood out among them. BR showed 41 IU / mL of proteolytic activity, optimum pH 7.0 and optimum temperature of 60 °C and was chosen. To optimize protease production the medium were tested with different carbon and nitrogen sources. The best production of proteases occurred in a medium containing peptone, yeast extract and glucose. The best day of the enzyme production, based on growth curve curve, was the 9th day. The protease was partially purified using ion exchange chromatography. The partially purified fraction was characterized and showed highest activity at pH 7.0, 60 °C and maintained 100% stability at 60 °C for 1 hour. The enzyme was tested as stain remover detergent industry to improve the spot removal. When added to a commercial detergent, the enzyme demonstrated to be compatible with commercial brands of detergent clothes.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Ciências Farmacêuticas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas, 2014. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2014-10-24T12:35:11Z No. of bitstreams: 1 2014_BeatrizTaynaraAraujodosSantos.pdf: 1308928 bytes, checksum: 18a4b7400f101f75567293bfe0231ec4 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-11-03T11:25:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_BeatrizTaynaraAraujodosSantos.pdf: 1308928 bytes, checksum: 18a4b7400f101f75567293bfe0231ec4 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-03T11:25:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_BeatrizTaynaraAraujodosSantos.pdf: 1308928 bytes, checksum: 18a4b7400f101f75567293bfe0231ec4 (MD5) / Introdução: Feocromocitomas são tumores altamente vascularizados derivados da medula adrenal. A maioria dos casos é benigna, mas formas malignas já foram descritas. A ressecção cirúrgica é a única forma definitiva de cura para tumores benignos, enquanto tumores malignos ainda não possuem tratamento eficaz. Os sintomas da forma maligna usualmente são tratados com quimioterapia e bloqueadores adrenérgicos, mas vários outros alvos terapêuticos estão sendo estudados recentemente. Grande parte dos medicamentos quimioterápicos comercializados é obtida por semissíntese de componentes químicos de plantas e fungos, e a biodiversidade brasileira pode auxiliar no desenvolvimento de novas drogas para esta patologia. Objetivo: Investigar a atividade antitumoral de extratos de plantas e fungos do Cerrado em linhagem celular de feocromocitoma. Métodos: A PC-12 Adh foi adquirida do BCRJ (Banco de Células do Rio de Janeiro), e cultivada em meio HAM-F12 suplementado com soro de cavalo, soro fetal bovino, bicarbonato de sódio, 10% de penicilina/estreptomicina, encubada a 37°C e 5% de CO2. Para os experimentos, as células foram plaqueadas na densidade de 5 x103 células por poço em placas de 96 poços, em triplicata. Após 24 horas de incubação, o ensaio de citotoxicidade foi realizado com avaliação de 24 e 48 horas de tratamento com concentrações de 500 e 1000 μg/mL das frações dos extratos (aquosa, etanólica e hexânica) dos 65 extratos obtidos de plantas e fungos do Cerrado diluídos em meio de cultura. Os extratos que demonstraram atividade citotóxica foram submetidos ao ensaio de curva dose-resposta em concentrações entre 125 e 2000 μg/mL. Após os tratamentos, a viabilidade celular foi mensurada utilizando o método colorímetro MTT (brometo de 3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,3-difeniltetrazólio). Os experimentos foram realizados em três análises independentes e a atividade citotóxica foi comparada na linhagem celular não tumoral de queratinócitos HaCat. Os dados foram analisados no GraphPad Prism 5® pelos testes estatísticos one-way ANOVA com teste pós-hoc de Tukey para os ensaios de citotoxicidade, e regressão não-linear e determinação do IC50 para os ensaios de dose-resposta. Os extratos que apresentaram atividade citotóxica similar ou inferior na linhagem celular não tumoral foram submetidos aos ensaios de flavonoides, polifenóis totais e cromatografia de camada delgada para determinar e quantificar os compostos químicos. Resultados: Os extratos etanólicos da folha e do fruto da Allamanda blanchetti ADC, e o extrato hexânico da folha e sua fração hexano:acetato de Etila do Erytroxylum subrotundum demonstraram atividade inibitória da viabilidade celular ≥ 50%, efeito dose dependente, e toxicidade similar ou inferior em HaCat. Os extratos de Allamanda blanchetti ADC e os extratos do Erytroxylum subrotundum apresentaram flavonoides e terpenos, respectivamente. Conclusão: Nesta triagem biológica do Bioma Cerrado, 04 dos 65 extratos de plantas e fungos demonstraram capacidade de controlar a proliferação celular do Feocromocitoma in vitro. Esses achados sugerem que os compostos químicos ativos encontrados possuem atividade citotóxica, corroborando com estudos de bioprospecção para o desenvolvimento de drogas antitumorais. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: Pheochromocytomas are highly vascularized tumors arising from adrenal medulla. The majority of cases are benign, but malignant forms have been described. Surgical resection is the only definitive healing for benign tumors, while malignant tumors still have no effective treatment. Symptoms from malignant disease are usually managed with cytotoxic chemotherapy and adrenergic blockers, but several new therapeutic targets have been studied recently. Most chemotherapy commercialized drugs are obtained by semi-synthesis from chemical compounds of plants and fungi, and Brazilian biodiversity could support on new drugs development for this pathology. Aim: investigate antitumoral activity of extracts from Cerrado plantas and fungi in pheochromocytoma cell line. Methods: The PC-12 Adh was purchased from BCRJ (Banco de Células do Rio de Janeiro), and maintained in HAM-F12 Medium supplemented with horse serum, fetal bovine serum, sodium bicarbonate, 10% penicillin/streptomycin stored at 37°C and 5% CO2. For the experiments, cells were seeded at a density of 5 x103 cell/well in 96-well plates, in triplicate. After 24h of incubation, cytotoxicity assay was performed after 24h and 48h of exposition to 500 and 1000μg/mL of each fraction (aqueous, ethanolic and hexanic) of 65 extracts obtained from Cerrado plants and fungi diluted in cell culture medium. The extracts that demonstrated cytotoxic activity were submitted to a dose response curve assay with concentrations varying from 125 to 2000μg/mL. After treatment, cell viability was measured using MTT (3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide) colorimetric assay. Experiments were performed on three independent analysis and the cytotoxic activity were compared in non tumoral keratinocytes cell line Hacat. Data were analyzed on GraphPad Prism 5® by one-way ANOVA with Tukey pos-hoc test for cytotoxicity assays, and non-linear regression and IC50 determination. The extracts that presented similar or lower cytotoxic activity in non tumoral cell line were submitted to flavonoids, total polyphenols and thin layer chromatography to determine and quantify chemical compounds. Results: The ethanolics extracts of leaf and fruit from Allamanda blanchetti ADC, and hexanic extract and its Hexane:Ethyl Acetate of leaf from Erytroxylum subrotundum demonstrated a inhibitory activity of cell viability ≥ 50% on cytotoxicity assays, dose response effect, similar or lower cytotoxic activity on Hacat. The Allamanda blanchetti ADC extracts presented flavonoids and Erytroxylum subrotundum extracts terpenes. Conclusion: On this biological trial of Cerrado Biome, 04 of 65 plant and fungi extracts demonstrated the ability to control pheochromocytoma cell line proliferation. These findings suggest the presence of active chemical compounds with cytotoxic activity, corroborating bioprospecting studies for the development of new antitumoral drugs.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Tecnologia, Departamento de Engenharia Florestal, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2014-12-10T11:17:52Z No. of bitstreams: 1 2014_FernandoCesarMagalhaesdeMedeiros.pdf: 3126502 bytes, checksum: 11fdc44195c33deeb75fbdf02c8a5f13 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-12-29T11:32:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_FernandoCesarMagalhaesdeMedeiros.pdf: 3126502 bytes, checksum: 11fdc44195c33deeb75fbdf02c8a5f13 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-29T11:32:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_FernandoCesarMagalhaesdeMedeiros.pdf: 3126502 bytes, checksum: 11fdc44195c33deeb75fbdf02c8a5f13 (MD5) / Os componentes voláteis de seis plantas do Cerrado foram investigados. Os óleos essenciais foram extraídos pelo método de hidrodestilação, por duas horas, e o rendimento dos óleos foi: 0,14% (Psidium myrsinites Mart. ex DC.), 0,75% (Hyptis sp.), 0% (Hyptis saxatilis A.St.-Hil. ex Benth.), 0,33% (Psidium laruotteanum Cambess.), 0,46% (Lippia lacunosa Mart. & Schauer) e 2,92% (Lippia origanoides Kunth). Os principais componentes dos óleos são: óxido de cariofileno (26,1%), epóxido de humuleno II (8,8%) e ß-cariofileno (7,4%) (P. myrsinites); ß-pineno (17,6%), espatulenol (11,3%) e a-pineno (10,0%) (Hyptis sp.); p-cimeno (34,8%), 1,8-cineol (11,9%) e a-pineno (11,4%) (P. laruotteanum); linalol (38,7%), ß-elemeno (18,3%) e ß-cariofileno (5,4%) (L. lacunosa) e timol (71,1%), p-cimeno (9,6%) e ß-cariofileno (4,8%) (L. origanoides). Este é o primeiro trabalho em que a composição química dos óleos de P. myrsinites, Hyptis sp. e P. laruotteanum é descrita e a primeira descrição do óleo de L. lacunosa coletado de indivíduos nativos do Cerrado. Todos os óleos foram utilizados em testes de inibição de fungos apodrecedores de madeira, Trametes versicolor (podridão branca) e Gloeophyllum trabeum (podridão parda), pelo método da difusão em ágar com algumas modificações. O óleo de cravo também foi utilizado nos ensaios com fungos. Como esperado os óleos de L. origanoides e de cravo foram bastante efetivos contra ambos os fungos. O óleo de L. lacunosa também apresentou boa atividade, porém, os demais óleos não demonstraram efeito significativo. Esse resultado pode ser explicado pela dificuldade de difusão desses óleos, visto que são compostos por monoterpenos não oxigenados ou sesquiterpenos. A metodologia usada mostrou algumas vantagens quando comparada às técnicas tradicionais. __________________________________________________________________________________ ABSTRCT / The volatiles components of six plants from Brazilian Cerrado were investigated. The essential oils were extracted by hydrodestillation during two hours and the oil yields were: 0.14% (Psidium myrsinites Mart. ex DC.), 0.75% (Hyptis sp.), 0% (Hyptis saxatilis A.St.- Hil. ex Benth.), 0.33% (Psidium laruotteanum Cambess.), 0.46% (Lippia lacunosa Mart. & Schauer) and 2.92% (Lippia origanoides Kunth). The principal chemical components were caryophyllene oxide (26.1%), humulene epoxice II (8.8%) and β-caryophyllene (7.4%) (P. myrsinites); β-pinene (17.6%), spathulenol (11.3%) and α-pinene (10.0%) (Hyptis sp.); pcymene (34.8%), 1,8-cineole (11.9%) and α-pinene (11.4%) (P. cambess); linalool (38.7%), β-elemene (18.3%) and β-caryophyllene (5.4%) (L. lacunose) and thymol (71.1%), p-cimene (9.6%) and β-caryophyllene (4.8%) (L. origanoides). It’s the first time the oils from P. myrsinites, Hyptis sp. and P. laruotteanum are chemically characterized and it’s the first description of the oil of L. lacunosa collected from specimens belonging to the Brazilian Cerrado. All these oils were used to inhibit de development of some wood decay fungi, Trametes versicolor (white rot) and Gloeophyllum trabeum (brown rot), by the well-diffusion method with some modifications. Clove oil was also used in the fungi essay. As expected the oils from L. origanoides and clove were very effective against both rot fungi. The oil from L. lacunosa also showed a good activity, but the others didn’t demonstrate any significant effect. This might be due to the difficult of the oils to diffuse into the culture medium as the chemical components of those oils with low activity show monoterpenes without oxygen or sesquiterpenes. The methodology used showed some advantages when compared to the current methods.