La línea celular HT-29 M6 es una línea tumoral humana derivada de adenocarcinoma de colon, con capacidad de diferenciación in vitro hacia un fenotipo mucosecretor, obtenida por selección con 10-7 M y 10-6 M de metotrexato, en tratamientos sucesivos, de la línea parental indiferenciada HT-29 (Lesuffleur T, et al, 1990). Nosotros utilizamos esta línea celular como modelo para estudiar el proceso de diferenciación in vitro que ocurre de manera espontánea durante el crecimiento hacia confluencia. Los resultados que presentamos en este trabajo aportan evidencias sólidas acerca del papel del calcio extracelular como modulador no sólo de la epitelialización, sino también del ciclo celular y de la expresión génica durante la diferenciación in vitro. Aunque puede existir más de un mecanismo por el que el calcio extracelular sea responsable de los efectos observados, los resultados obtenidos son consistentes con el requerimiento de contactos de adhesión para la diferenciación epitelial. Además, los resultados sugieren que reguladores del ciclo celular, concretamente ciclina D1 y p27, desempeñan un papel determinante en el control del programa de expresión génica durante la diferenciación. Este resultado es muy relevante ya que: (1) su función parece tener lugar de manera general sobre el programa de expresión génica, y (2) al estar estas proteínas implicadas en la progresión tumoral, su mecanismo de acción emerge como una diana para manipular el fenotipo de diferenciación celular y con ello la tumorigenicidad. Por otro lado, hemos descubierto que parte del proceso de diferenciación in vitro es independiente de la formación de contactos de adhesión y de la epitelialización, concretamente niveles basales de expresión génica asociada a diferenciación y la producción de vesículas de moco. Asimismo, en condiciones de no adherencia celular, las células no adquieren capacidad invasiva, lo cual nos está indicando que la desdiferenciación celular observada en tumores y la adquisición de capacidad invasiva podría tener lugar por vías separadas. Finalmente, hemos obtenido evidencias preliminares acerca de la existencia de una vía de regulación de APC sobre p21CIP1 cuya inactivación podría estar relacionada con la reversibilidad del programa de diferenciación in vitro y con su incapacidad para llevar a término un programa de diferenciación terminal.

In pathological states such as osteoarthritis, the complex metabolic balance of cartilage is disrupted, leading to a loss in the integrity and biomechanical function of cartilage. Osteoarthritis affects more than 20 million Americans, costing the United States economy over $60 billion yearly. Risk factors for osteoarthritis include age, excessive joint loading, and joint injury. Tissue engineering offers a potential solution for the replacement of diseased and/or damaged cartilage. Unfortunately, plentiful donor cell populations are difficult to assemble, as chondrocytes have a well characterized lack of expansion potential. Mesenchymal progenitor cells offer an alternative with a high expansion potential capable of supplying large quantities of cells. Using an immature bovine model, the chondrogenic differentiation of articular chondrocytes and bone marrow stromal cells was found to be scaffold, media and mechanical stimulation dependent. TGF-beta signaling participated in the response of articular chondrocytes to dynamic compressive loading, as well as enhanced the chondrogenesis of bovine BMSCs, through interactions between loading and TGF-beta/Smad signaling. Also, dynamic loading altered gene expression, matrix synthesis rates and intracellular phosphorylation for bovine BMSCs. However the response of the cells to dynamic loading depends on both media supplementation and the duration of unloaded culture. These studies establish signaling through the TGF-beta pathway as a mechanotransduction pathway for chondrocytes and chondroprogenitors in 3D culture.

Thesis (Ph. D.)--University of Missouri-Columbia, 2000. / Typescript. Vita. Includes bibliographical references (leaves 201-225). Also available on the Internet.

Thesis (Ph. D.)--University of Hong Kong, 2010. / Includes bibliographical references (p. 180-205). Also available in print.

Thesis (Ph. D.)--University of Hong Kong, 2010. / Includes bibliographical references (p. 180-205). Also available online.

Thesis (Ph.D.)--University of Central Florida, 2009. / Adviser: Kiminobu Sugaya. Includes bibliographical references (p. 45-50).

Thesis (Ph. D.)--University of Missouri-Columbia, 2000. / Typescript. Vita. Includes bibliographical references (leaves 201-225). Also available on the Internet.

Thesis (Ph. D.)--University of Washington, 2003. / Vita. Includes bibliographical references (leaves 103-119).

Thesis (Ph. D.)--University of Missouri-Columbia, 2002. / Typescript. Vita. Includes bibliographical references (leaves 134-137). Also available on the Internet.

Thesis (Ph. D.)--University of Missouri-Columbia, 2002. / Typescript. Vita. Includes bibliographical references (leaves 134-137). Also available on the Internet.