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Exposição ao fungicida Cerconil WP®: efeitos sobre a reprodução em modelo experimental e estrutura química do látex de seringueira / Exposure to fungicide Cerconil WP®: reproductive effects in experimental model and chemistry structure latex of rubber treeSilva, Jaqueline Nascimento da 25 April 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-04-25 / Brazil produces approximately 1% of natural rubber derived from rubber tree (Hevea brasiliensis) in the world, and Sao Paulo state is the major producer. The plantation of rubber tree might be stricken by fungal diseases, specially Antracnose. This fact requires the necessity of agriculture defenders as Cerconil WP®, composed by thiophanate methyl and chlorothalonil, one of the most used. Facing the large exposure to these compounds of workers and population that live near plantations, it is extremely important evaluate its possible toxicity and health impacts. Once that, the present work had as objective identify potential teratogenic effects and maternal toxicity of exposure to Cerconil WP® fungicide in different doses, using rat as an experimental model. Moreover, the study also aimed to identify effects of this fungicide on the chemistry structure latex of rubber tree, via Raman Spectroscopy. Therefore, Winstar female rats, adults and pregnant were divided into 4 experimental groups, that received 0 (control), 400 (EA), 800 (EB) or 1200mg/kg/day (EC) of Cerconil WP®, via gavage, from 6º to 15º gestational day (GD). In GD20, pregnant rats were euthanized and submitted to laparotomy for collection of uterus and maternal organs. The fetuses were collect, processed to skeletal and visceral analysis. Rats that were exposure to the fungicide presented clinical signs of toxicity. Reduction in weight evidenced in all groups in comparison to the Control group in GD12. Weight of maternal liver was lower in group EC than Control and histopathologic analysis of hepatic tissue presented areas of focal necrosis, inflammatory infiltrate, picnotic nuclei in hepatocytes and microvesicular fat degeneration areas moderated in groups EB and EC. The percentage of fetuses with adequate weight for gestational age was lower in groups EA and EB, in relation to the Control and EC groups. Porcentage of little fetuses increased in group EA, in relation to the other experimental groups, and in group EB in comparison to Control. In addition, there was an increase of total incidence of skeletal anomalies in groups exposure in relation to the control. Skeletal alterations observed in higher frequency were: decrease in esternal centres, absence of xiphoid process and caudal vertebrae, malformation of suppra-occiptal and reduction on number of anterior and metatarsus phalanges. Measures of Raman Spectroscopy (laser island of 514,5 nm, 25 seconds of exposure and 3 to 5 accumulations) did not show significant chemistry alterations on the latex exposure in vitro to 2g/L of Cerconil WP®. Results demonstrated that the oral exposure of pregnant rats to Cerconil WP®, during organogenesis, might affect on the embrio-fetal development and cause low toxicity to general maternal health. However, the molecular structure of latex exposed to the fungicide was not affect on the experimental study conditions. / O Brasil produz aproximadamente 1% da borracha natural derivada de seringueira (Hevea brasiliensis) no mundo, sendo o estado de São Paulo o maior produtor. O plantio de seringueira pode ser acometido por doenças fúngicas, especialmente a Antracnose. Isto leva à necessidade do uso de defensivos agrícolas, sendo o Cerconil WP®, composto por tiofanato metílico e clorotalonil, um dos mais utilizados. Diante da ampla exposição de trabalhadores rurais e da população do entorno das plantações a estes compostos, torna-se extremamente importante avaliar a sua possível toxicidade e impactos à saúde. Assim, o presente trabalho teve como objetivo identificar os potenciais efeitos teratogênicos e de toxicidade materna da exposição ao fungicida Cerconil WP® em diferentes doses, utilizando o rato como modelo experimental. Além disso, o estudo também pretendeu identificar os efeitos deste composto sobre a estrutura química do látex de seringueira, via Espectroscopia de Espalhamento Raman. Para tanto, ratas Wistar adultas prenhes foram divididas em 4 grupos experimentais, que receberam 0 (controle), 400 (EA), 800 (EB) ou 1200mg/kg/dia (EC) de Cerconil WP®, via gavagem, do 6º ao 15º dia gestacional (DG). No DG20, as ratas prenhes foram mortas e submetidas à laparotomia para coleta do útero gravídico e órgãos maternos. Os fetos coletados foram processados para análise esquelética e visceral. Ratas expostas ao fungicida apresentaram sinais clínicos de toxicidade. Houve redução no peso das ratas no DG12 em todos os grupos expostos em relação ao grupo controle. O peso do fígado materno foi reduzido no grupo EC em relação ao controle e a análise histopatológica do tecido hepático apresentou áreas com necrose focal, infiltrado inflamatório, presença de hepatócitos com núcleo picnótico e área com formação de degeneração gordurosa microvesicular de moderada intensidade nos grupos EB e EC. A porcentagem de fetos com peso adequado para a idade gestacional foi menor nos grupos EA e EB, em relação aos grupos controle e EC. Além disso, a porcentagem de fetos pequenos aumentou no grupo EA, em relação aos demais grupos experimentais, e no grupo EB em relação ao controle. Foi observado um aumento na incidência total de anomalias esqueléticas nos grupos expostos em relação ao grupo controle. As alterações esqueléticas observadas em maior frequência foram: diminuição dos centros esternais, ausência de processo xifoide e vertebras caudais, malformação do supra-occipital e redução no número de falanges anteriores e metatarsos. As medidas de Espectroscopia de Espalhamento Raman (linha de laser de 514,5 nm, 25 segundos de exposição e 3 a 5 acumulações) não apresentaram alterações químicas significativas no látex exposto in vitro a 2g/L de Cerconil WP®. Os resultados demonstram que a exposição oral de ratas prenhes ao Cerconil WP®, durante a organogênese, pode afetar o desenvolvimento embrio-fetal e causar toxicidade leve sobre a saúde geral materna. No entanto, a estrutura molecular do látex exposto ao fungicida não foi afetada nas condições experimentais do estudo.
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Avaliação in vitro do efeito pró-inflamatório e oxidativo dos pesticidas mancozebe, clorotalonil e tiofanato metílico / In vitro evaluation of pro-inflammatory and oxidative effect of mancozeb, chlorothalonil and thiophanate methyl pesticidesWeis, Grazielle Castanha Cezimbra 02 March 2017 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Pesticides are widely used in agriculture and public health for pest control and prevention. The indiscriminate use of these compounds can trigger environmental contamination by pesticides and increase the risk of human exposure. Human exposure to pesticides can occur directly, through occupational activity, or indirectly, through the environment and food. Chronic exposure to pesticides may result in neurological, reproductive, teratogenic and immunological disorders. Mancozeb, chlorothalonil and thiophanate methyl are fungicides widely used in the world. Despite their characteristics of low acute toxicity and low persistence in the environment, in vitro and in vivo studies demonstrate the cytotoxic effects of these compounds. However, the immunological effects that these pesticides can trigger are unexplored. Therefore, the objective of this study was to evaluate in vitro the pro-inflammatory and oxidative effects of mancozeb, chlorothalonil and thiophanate methyl pesticides. RAW 264.7 (ATCC® TIB-71™) macrophages were exposed to different concentrations (0.1-100 μg/mL) of each pesticide for 72 hours, and maintained in 5% CO2 atmosphere at 37°C. The pesticides were dissolved in dimethylsulfoxide, which was used as negative control. Phytohemagglutinin was used as positive control for inflammatory activation. The evaluation of cell proliferation, oxidative metabolism and pro-inflammatory cytokines (IL-1β, IL-6, TNF-α and IFN-γ), anti-inflammatory cytokine (IL-10) and caspases (Casp1, Casp3, Casp8) levels were performed by fluorimetric and molecular tests. The results showed a significant pro-inflammatory effect of mancozeb, chlorothalonil and thiophanate methyl pesticides at respective concentrations of 1, 3 and 100 μg/mL, with increase in cell proliferation and pro-inflammatory cytokines and caspases levels. However, the oxidative effect was only observed in macrophages exposed to chlorothalonil at 3 μg/mL. Thus, in these analysis conditions, the studied pesticides acted by activation of the immune system. The results found contribute to better understanding of immunological effects caused by exposure to these pesticides. / Os pesticidas são amplamente utilizados na agricultura e na saúde pública para o controle e prevenção de pragas. O uso indiscriminado desses compostos pode desencadear a contaminação ambiental por agrotóxicos e aumentar o risco de exposição dos seres humanos. A exposição aos agrotóxicos pelos humanos pode ocorrer de forma direta, através de atividade ocupacional, ou de forma indireta, pelo ambiente e pela alimentação. A exposição crônica aos pesticidas pode resultar em distúrbios neurológicos, reprodutivos, teratogênicos e imunológicos. Os pesticidas mancozebe, clorotalonil e tiofanato metílico são fungicidas amplamente utilizados no mundo. Apesar de suas características de baixa toxicidade aguda e baixa persistência no ambiente, estudos in vitro e in vivo demonstram os efeitos citotóxicos desses compostos. Entretanto, os efeitos imunológicos que esses pesticidas podem desencadear são pouco explorados. Diante disso, o objetivo deste estudo foi avaliar in vitro o efeito pró-inflamatório e oxidativo dos pesticidas mancozebe, clorotalonil e tiofanato metílico. Os macrófagos RAW 264.7 (ATCC® TIB-71™) foram expostos a diferentes concentrações (0,1 – 100 μg/mL) de cada pesticida por 72 horas, sendo mantidos em atmosfera com 5% CO2 a 37oC. Os pesticidas foram dissolvidos em dimetilsulfóxido, o qual foi utilizado como controle negativo. Como controle positivo para a ativação inflamatória, utilizou-se a fitohemaglutinina. A avaliação da proliferação celular, do metabolismo oxidativo e dos níveis das citocinas pró-inflamatórias (IL-1β, IL-6, TNF-α e IFN-γ), da citocina anti-inflamatória (IL-10) e das caspases (Casp1, Casp3, Casp8) foi realizada por testes fluorimétricos e moleculares. Os resultados obtidos demonstraram efeito pró-inflamatório significativo dos pesticidas mancozebe, clorotalonil e tiofanato metílico nas respectivas concentrações de 1, 3 e 100 μg/mL, ocorrendo aumento da proliferação celular e dos níveis de citocinas pró-inflamatórias e caspases. Entretanto, o efeito oxidativo somente foi observado nos macrófagos expostos ao clorotalonil na concentração de 3 μg/mL. Assim, nessas condições de análise, os pesticidas estudados atuam ativando o sistema imune. Os resultados encontrados contribuem para a melhor compreensão dos efeitos imunológicos que a exposição a estes pesticidas pode desencadear.
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