Submitted by Vasti Diniz (vastijpa@hotmail.com) on 2017-09-05T14:55:06Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 6265632 bytes, checksum: b400bacf85cbecabd2bc0a3fd0a7f19c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-05T14:55:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 6265632 bytes, checksum: b400bacf85cbecabd2bc0a3fd0a7f19c (MD5) Previous issue date: 2017-04-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Snakebite or snakebite is the chart of poisoning from the inoculation of toxins through the snake inoculation apparatus. The objective of this study was to evaluate and in vitro the cytotoxic, oxidative and homeostasis effects (on erythrocytes, hemoglobins and human plasma, respectively) caused by the presence of the crude venoms of Bothrops jararacussu and Bothrops moojeni snakes. The protein profile of each venom was characterized by reverse phase chromatography and SDS-PAGE. The venom compositions of both species showed similar protein profiles. The amounts of the crude venoms from B. jararacussu and B. moojeni induced significant indirect hemolysis in the presence of fatty acid and fatty acid plus calcium chloride. The crude venom of B. jararacussu presented a higher cytotoxic potential. The venoms of B. jararacussu and B. moojeni, showed no anti-hemolytic effect. The venom of B. jararacussu presented a haemagglutinating effect in the analyzed amounts of 100 and 1000μg and did not present an oxidizing effect. The B. moojeni venom presented an oxidizing effect only in the amount of 1000μg. Venoms of both species showed no anti-oxidant effect. The crude venom of B. moojeni had a higher coagulant potential compared to B. jararacussu venom and all plasma clots formed were turbid, rigid and stable. The clot formation time was inversely proportional to the amount of venom evaluated. Therefore, the information obtained from the comparisons of the biological effects caused by the venoms, showed that B. jararacussu showed indirect hemolytic activity, hemagglutinating and coagulant, and B. moojeni presented indirect hemolytic activity, oxidant and coagulant. / Acidente ofídico ou ofidismo é o quadro de envenenamento decorrente da inoculação de toxinas através do aparelho inoculador de serpentes. O objetivo desse estudo foi avaliar e comparar, in vitro, os efeitos citotóxico, oxidativo e na homeostase (sobre eritrócitos, hemoglobinas e plasma humano, respectivamente), causados pela presença das peçonhas brutas das serpentes Bothrops jararacussu e Bothrops moojeni. O perfil proteico de cada peçonha foi caraterizado por cromatografia de fase reversa e SDS-PAGE. As composições das peçonhas de ambas as espécies mostraram perfis proteicos similares. As quantidades das peçonhas brutas de B. jararacussu e B. moojeni induziram hemólise indireta significativa na presença de ácido graxo e de ácido graxo mais cloreto de cálcio. A peçonha bruta de B. jararacussu apresentou maior potencial citotóxico. As peçonhas de B. jararacussu e B. moojeni, não exibiram efeito anti-hemolítico. A peçonha de B. jararacussu apresentou efeito hemaglutinante nas quantidades analisadas de 100 e 1000μg e não apresentou efeito oxidante. A peçonha de B. moojeni apresentou efeito oxidante somente na quantidade de 1000μg. As peçonhas de ambas as espécies não mostraram efeito anti-oxidante. A peçonha de B. moojeni apresentou maior potencial coagulante em relação a peçonha de B. jararacussu e todos coágulos plasmáticos formados eram turvos, rígidos e estáveis. O tempo para formação dos coágulos foi inversamente proporcional à quantidade de peçonha avaliada. Portanto, as informações obtidas das comparações dos efeitos biológicos provocados pelas peçonhas, mostraram que B. jararacussu apresentou atividade hemolítica indireta, hemaglutinante e coagulante, e B. moojeni apresentou atividade hemolítica indireta, oxidante e coagulante.

Submitted by Vasti Diniz (vastijpa@hotmail.com) on 2017-09-04T12:47:50Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3356476 bytes, checksum: 04bc24e3e4cfbdf2557866eb0f6e7739 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-04T12:47:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3356476 bytes, checksum: 04bc24e3e4cfbdf2557866eb0f6e7739 (MD5) Previous issue date: 2017-04-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Snake venoms are complex mixtures of components that act upon the disturbance of various physiological mechanisms. The composition and biological activities of the venom may vary in snakes according to age, sex and geographic region. The present work aimed to evaluate the protein composition and biological activities triggered, in vitro, by male and female venoms of the Bothrops leucurus snake. The protein profile was obtained by high performance liquid chromatography (HPLC) and one-dimensional electrophoresis under denaturing conditions (SDS-PAGE). The biological effects evaluated were oxidative stress, antioxidant, coagulant and hemolytic (direct and indirect) activities. A chromatographic and electrophoretic analysis presented similarities between the protein profiles of males and females venoms. The evaluated venoms did not present hemolytic effect (direct or indirect) on erythrocytes. Significant erythrocyte haemagglutination was observed, it was caused by all the measurements of the venoms evaluated. B. leucurus venoms did not present oxidative effect on hemoglobin. In the presence of both venoms studied, were observed a reduction of the oxidative effect on hemoglobin caused by phenylhydrazine; suggesting the presence of antioxidant components in the composition of the venoms. The evaluation of coagulating effect of B. leucurus venoms were performed on citrated human plasma and clotting times were shorter in the presence of female venom and, both venoms presented clot formation time inversely proportional to the quantities evaluated. However, both protein profile and hemolytic (direct and indirect), oxidant and antioxidant effects observed in B. leucurus venom were similar for male and female venoms. Otherwise, the sexual variation linked to the coagulant effect may justify the differences in type and/or intensity of symptoms observed in ophidian accidents. / As peçonhas ofídicas são complexas misturas de componentes que atuam na perturbação de diversos mecanismos fisiológicos. A composição e atividades biológicas das peçonhas podem variar entre serpentes da mesma espécie de acordo com fatores como idade, sexo e região geográfica. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a composição proteica e atividades biológicas desencadeadas, in vitro, pelas peçonhas de machos e fêmeas da serpente Bothrops leucurus. O perfil proteico foi obtido por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e eletroforese unidimensional em condições desnaturantes (SDS-PAGE). Os efeitos biológicos avaliados foram o estresse oxidativo, atividades antioxidante, coagulante e hemolíticas direta e indireta. A análise cromatográfica e eletroforética apresentaram semelhanças entre os perfis proteicos das peçonhas de machos e fêmeas. As peçonhas avaliadas não apresentaram efeito hemolítico (direto ou indireto) sobre eritrócitos. Foi observada uma expressiva hemaglutinação eritrocitária causada por todas as quantidades das peçonhas avaliadas. As peçonhas de machos e fêmeas de B. leucurus não apresentaram efeito oxidativo sobre hemoglobinas. Na presença de ambas as peçonhas estudadas, observou-se redução do efeito oxidativo sobre hemoglobinas provocado pela fenilhidrazina, sugerindo a presença de componentes antioxidantes na composição das peçonhas. A avaliação do efeito coagulante das peçonhas de B. leucurus foi realizada sobre o plasma humano citratado e os tempos de obtenção dos coágulos foram menores na presença da peçonha de fêmeas e, ambas as peçonhas apresentaram o tempo de formação dos coágulos inversamente proporcional às quantidades avaliadas. Contudo, tanto o perfil proteico como os efeitos hemolíticos (direto e indireto), oxidantes e antioxidantes observados nas peçonhas de machos e fêmeas de B. leucurus foram semelhantes. No entanto, a variação sexual obtida pela análise do efeito coagulante pode justificar as diferenças no tipo e/ou intensidade dos sintomas observados nos acidentes ofídicos.