Orientadores: Edi Lucia Sartorato / Tese (doutorado)- Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-10T14:22:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alexandrino_Fabiana_D.pdf: 3413562 bytes, checksum: 987174a32d5b26e2305d4da118d13b6d (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Nos organismos superiores, a comunicação entre as células ocorre através de proteínas denominadas conexinas, implicadas na comunicação intercelular (gap junction), as quais permitem a transferência direta de pequenas moléculas e íons. Na pele desempenham um papel crucial na sinalização e diferenciação epidérmica. Na cóclea as gap junctions existem entre as células de suporte das células ciliadas, formando um caminho para a reciclagem dos íons K+, envolvidos na transdução da audição. A multiplicidade de funções exercidas pelas gap junctions é refletida pela variedade de fenótipos causados por mutações em genes de conexinas. A combinação da perda auditiva, distúrbio congênito da diferenciação celular das camadas da epiderme, e envolvimento de tecidos ectodérmicos, reflete o papel crucial das conexinas na diferenciação epitelial e na transdução auditiva. Dessa forma, frente a um indivíduo com distúrbios de queratinização associada ou não a perda auditiva propõe-se à investigação molecular de conexinas que se expressam na cóclea e epiderme, como as conexinas 26, 30, 31, 43, 30.3 e 31.1. Assim sendo, o presente trabalho tem como objetivo a análise molecular dos genes GJB2 (Cx26), GJB6 (Cx30), GJB3 (Cx31), GJA1 (Cx43), GJB4 (Cx30.3) e GJB5 (Cx31.1), bem como a triagem das deleções ?(GJB6-D13S1830) e ?(GJB6-D13S1854) no gene GJB6 e da mutação mitocondrial A7445G no gene tRNASer(UCN). As metodologias empregadas para avaliação molecular dos pacientes foram o seqüenciamento automático dos produtos de PCR dos genes conexinas, PCR multiplex para detecção das deleções e análise de restrição do produto de PCR do DNA mitocondrial. Nos resultados foram observados dois casos com mutações autossômicas dominantes no gene GJB2 e um paciente com herança digênica, com mutações nos genes GJB2 e GJB3. Outras alterações foram observadas nos demais pacientes, algumas descritas como polimorfismos freqüentes na população normal, ou ainda outras alterações com funções desconhecidas / Abstract: The connexins are family proteins whose major function is as part of the gap junctions of cell-to-cell channels. They are expressed in several tissues including brain, skin, and cochlea. Mutations in connexins genes play a major role in nonsyndromic deafness, but have been also described in individuals with variable dermatological features. In recent years, many genes responsible for hereditary skin diseases have been discovered. These genes may encode different proteins that participate in the terminal differentiation of the epidermis. Therefore alteration or absence of these proteins causes a keratinization disorder. It has been demonstrated that distinct germline mutations within six connexin (Cx) genes GJB2 (Cx26), GJB6 (Cx30), GJB3 (Cx31), GJA1 (Cx43), GJB4 (Cx30.3), and GJB5 (Cx31.1), may cause sensorineural hearing loss and various skin disease phenotypes. The objectives are to screen for mutations in the connexin genes, the ?(GJB6-D13S1830) e ?(GJB6-D13S1854) deletions in GJB6 gene and mitochondrial mutation A7445G in tRNASer(UCN) gene. For mutation analysis, the single coding regions of the connexin genes were sequenced from PCR products. The deltions of the GJB6 gene were amplified the breakpoint junction of the ?(GJB6-D13S1830) e ?(GJB6-D13S1854) by PCR and the mitochondrial mutation A7445G were performed using PCR were digested with specific restriction enzymes (Xba I). We report two autosomal dominant mutations different in GJB2 gene and digenic inheritance with mutations in GJB2 and GJB3 genes. The mutations in the connexin genes in individuals with deafness and different skin disorders illustrating the heterogeneity genetic and clinical of the condition / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas