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Instrumental ortopédico de conformação complexa: avaliação do processamento, formação de biofilme e suas implicações / Orthopedic instruments of complex conformation: evaluation of the processing, formation of biofilm and its implicationsLopes, Lillian Kelly de Oliveira 20 December 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-12-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Outro / INTRODUCTION: Depth gauge and flexible drill bite cutter are orthopedic surgical
instruments of complex conformation and they are into loanered instrumentation box to
different healthcare facilites. The challenge is to ensure that appropriatly cleaning was
done to prevent the formation of biofilm in these instruments´models. There are no
experimental or clinical studies analyzing the impact of different cleaning protocols on
formation of biofilm on surfaces those two surgical instruments. OBJECTIVES: To
validate and to evaluate laboratory method to formation of biofilms in stainless steel. To
evaluate microbial load and to determine formation of biofilms after laboratory
contamination and processing for several cycles in surgical instruments of complex
conformation used in surgeries of orthopedic implants. METHOD: Experimental study
was developed from November/2014 to March/2016, at the Laboratory of Macquarie
University, Sydney (AU). Method´s validation: new forceps halsted hemostatic mosquito
were contaminated within contaminant solution containing S. aureus (ATCC 25923) and
sterilized in saturated steam. Forceps were divided into three groups according to
cleaning: 1) rinsing, 2) manual cleaning and 3) manual cleaning followed by automated
cleaning. After 6th, 13th and 20th three forceps from each protocol were analised for
microbial load and protein amount (Bicinchoninic Acid Assay) and visual analysis by
scanning electronic microscopy. The same method was used on new flexible drill bite
cutters and depth gauges, and analised after 10th and 20th reprocessing. RESULTS:
Method´s validation: forceps submitted to protocols 1 (positive control of cleaning) and 2
showed coccus in biofilms and forceps sumitted to protocol 3 showed organics residues
after 20 reprocessing. No microbial load or residual protein was found. Complex
instruments: flexible drill bite cutters submitted to rinsing presented high amount of
protein with increase of 1699μg of protein from 10th to 20th reprocessing (P = 0.03).
Depth gauge submitted protocol 1 presented high amount of protein, however there was
no statistically significant difference from 10th to 20th processing (P = 0.60). All
instruments submitted to manual and/or automated cleaning did not present residual
protein. It was possible to identify residue and biofilm into lumen of surgical instruments
after 20 reprocessing. CONCLUSION: Experimental techniques to formation and
evaluation of biofilm in surgical instruments manufactures in stainless steel were
validated and 20 inappropriated cleaning processing were enough to buildup biofilm.
Biofilm was formed within lumens of flexible drill bite cutter and depth gauge, after 20
processing despite the instruments were submitted to “gold standard” cleaning, also
accumulation of protein on flexible drill bite cutters. Depth gauge lumen allowed
accumulation of waste using manual cleaning followed by automation cleaning and
manual cleaning allowed buildup residue on its external surface. Manual cleaning
allowed accumulation residue on deep gauge. It was not possible to recover viable S.
aureus in biofilm on instrumental surface, but it indicates that design of instruments
evaluated is not safe to processing. It is presumed have risk ratio for aseptic loss of
prostheses and infection related to healthcare, since they are instruments of difficult
cleaning control and circulate in numerous healthcare facilites using different cleaning
protocols. / INTRODUÇÃO: O medidor de profundidade e a fresa flexível são instrumentos
cirúrgicos ortopédicos de conformação complexa e integram as caixas cirúrgicas
fornecidas por distribuidores aos diferentes serviços de saúde. O desafio é garantir
limpeza adequada, impedindo a formação de biofilmes nesses modelos de
instrumental. Não existem estudos experimentais ou clínicos analisando o impacto de
diferentes protocolos de limpeza na formação de biofilme nas superfícies desses
modelos de instrumental. OBJETIVOS: Validar método laboratorial de formação de
biofilme e análise em instrumento de aço inoxidável, avaliar a carga microbiana e
determinar a formação de biofilme após contaminação laboratorial e processamento
por múltiplos ciclos em instrumental cirúrgico de conformação complexa utilizado em
cirurgias ortopédicas com implantes. MÉTODO: Estudo experimental realizado de
novembro/2014 a março/2016, no laboratório da Universidade Macquarie, Sydney (AU).
Validação do método: pinças halsted mosquito novas foram contaminadas em solução
contendo S. aureus (ATCC 25923) e esterilizadas em vapor saturado sob pressão. As
pinças foram separadas em três grupos segundo a limpeza: 1) enxágue, 2) limpeza
manual e 3) limpeza manual seguida de automatizada. Após os 6°, 13° e 20°
processamentos, três pinças de cada protocolo foram submetidas à análise de carga
microbiana, proteína (Bicinchoninic Acid Assay) e análise visual por microscopia
eletrônica de varredura. A mesma metodologia foi seguida no experimento com a fresa
flexível e medidor de profundidade novos, sendo as análises realizadas após os 10° e
20° processamentos. RESULTADOS: Validação do método: Pinças submetidas aos
protocolos 1 (controle positivo da limpeza) e 2 apresentaram biofilmes, e a pinça
submetida ao protocolo 3 apresentou resíduo após 20 processamentos e não foram
identificados micro-organismos nem proteína. Experimento com instrumental de
conformação complexa: fresa flexível submetida ao protocolo 1 apresentou elevada
quantidade de proteína com aumento de 1699µg de proteína do 10° para o 20°
processamento (P=0,03). Medidor de profundidade submetido ao mesmo protocolo
também apresentou elevada quantidade de proteína, não sendo significante a diferença
entre o 10° e o 20° processamento (P=0,60). Todo instrumental submetido à limpeza
manual e/ou automatizada não apresentou resíduo de proteína. Foi possível identificar
resíduo nos três grupos de limpeza após 20 processamentos. CONCLUSÃO: Técnicas,
para formação e avaliação de biofilme em instrumental cirúrgico fabricado em aço
inoxidável, foram validadas, e 20 processamentos inadequados formam biofilmes.
Houve formação de biofilmes nos lúmens da fresa flexível e no medidor de
profundidade após 20 processamentos, mesmo utilizando o padrão ouro da limpeza,
bem como acúmulo de proteína na fresa flexível ao longo dos processamentos. O
lúmen do medidor de profundidade desmontável permitiu acúmulo de resíduos, mesmo
usando limpeza manual seguida de automatizada. Limpeza manual permitiu o acúmulo
de resíduos no medidor de profundidade. Não foi possível recuperar S. aureus viáveis
no biofilme aderido à superfície de instrumental, porém sinaliza que o design do
instrumental avaliado não é seguro para o processamento. Presume-se relação de
risco para perda asséptica de próteses e infecção relacionada à assistência à saúde,
pois são instrumental de difícil controle da limpeza e circulam em inúmeros serviços de
saúdes com diferentes protocolos de limpeza.
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