Introdução Os complexos An. oswaldoi e An. albitarsis são formados por espécies morfologicamente semelhantes e, algumas delas, são importantes vetores de plasmódios que causam a malária humana. A separação das espécies de cada complexo é problemática devido ao polimorfismo e sobreposição dos caracteres morfológicos utilizados em chaves de identificação, que muitas vezes só é alcançada com o uso de marcadores moleculares. No entanto, a identificação correta das espécies se faz necessária para a avaliação adequada da importância epidemiológica das mesmas. Infelizmente, são poucos os estudos que objetivam a caracterização morfológica dos membros do complexo An. oswaldoi e An. albitarsis. Objetivos Caracterizar morfologicamente e molecularmente o An. oswaldoi s.s.; caracterizar morfologicamente cinco espécies do complexo An. albitarsis; estabelecer caracteres morfológicos que permitam a separação entre as espécies do complexo An. albitarsis; solucionar problema de nomenclatura de An. marajoara. Métodos - Foram utilizados espécimes disponíveis nos acervos da Coleção Entomológica do Departamento de Epidemiologia da Faculdade de Saúde Pública (FSP/USP), do Museu Nacional do Rio de Janeiro e do Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Brasil e do National Museum of Natural History (NMNH), EUA. Foram descritas e ilustradas as fêmeas adultas, genitálias masculinas, larvas de quarto estadio e pupas de seis espécies de Nyssorhynchus, e a larva de primeiro estadio de An. albitarsis s.s. Foram utilizados 40 caracteres de fêmeas adultas das cinco espécies do complexo An. albitarsis. Nas análises morfométricas foram empregadas técnicas de análises estatísticas multivariadas. Resultados Os adultos machos e fêmeas, larvas de quarto estadio e pupas de An. oswaldoi s.s., An. albitarsis s.s., An. marajoara e An.deaneorum foram redescritos, e descritos aqueles de An. albitarsis B e An. albitarsis E. Os resultados das análises multivariadas dos caracteres morfométricos demonstraram que é possível separar as cinco espécies do complexo An. albitarsis. Para promover a estabilidade do nome An. marajoara, a lâmina da genitália masculina que acompanha o holótipo foi invalidada. Conclusões Foi possível caracterizar An. oswaldoi s.s. através de marcadores morfológicos e moleculares. Os resultados das análises morfométricas demonstraram que é possível separar as cinco espécies do complexo An. albitarsis e que os espécimes de An. marajoara podem pertencer a duas espécies distintas. / Introduction The Anopheles oswaldoi and An. albitarsis complexes contain morphologically cryptic species, including some important vectors of human malaria. Species diagnosis within each complex is problematic due to polymorphisms and overlapping morphological characters in identification keys and many times must employ molecular biology methods. Although correct identification is necessary to evaluate the respective epidemiological importance of each species, there exist few studies that have characterized the morphological characters of the An. oswaldoi and An. albitarsis complexes. Objectives Morphologically and molecularly characterize An. oswaldoi s.s.; morphologically characterize five species of the An. albitarsis complex; establish morphological characters that separate species of the An. albitarsis complex; resolve nomenclature problems within An. marajoara. Methods- Specimens used originated from the entomological collections of the Departamento de Epidemiologia of the Faculdade de Saúde Pública (Universidade de São Paulo), from the Museu Nacional do Rio de Janeiro and from Instituto Oswaldo Cruz (Rio de Janeiro) in Brazil and of the National Museum of Natural History (USA). The adult females, male genitalia, fourthinstar larvae and pupae from six species of Nyssorhynchus and the firstinstar larva of An. albitarsis s.s. were described and illustrated. Forty adult female characters were identified form five species of the An. albitarsis complex. Multivariate statistics were used in the morphometric analyses. Results Adult males and females, fourth-instar larvae and pupae of An.oswaldoi s.s., An. albitarsis s.s., An. marajoara and An. deaneorum were redescribed. Those of An. albitarsis B and An. albitarsis E were described.Results from multivariate analyses of morphological characters separated the five species of the An. albitarsis complex. To promote the nomenclature stability of An. marajoara, the male-genitalia slide associated with the holotype was invalidated. Conclusions It was possible to characterize An. oswaldoi s.s. using both morphological characters and molecular markers. Results from morphometric analyses showed that it is possible a morphological distinction among all five species, and that the specimens of An. marajoara may belong to two distinct species.

Introdução Os complexos An. oswaldoi e An. albitarsis são formados por espécies morfologicamente semelhantes e, algumas delas, são importantes vetores de plasmódios que causam a malária humana. A separação das espécies de cada complexo é problemática devido ao polimorfismo e sobreposição dos caracteres morfológicos utilizados em chaves de identificação, que muitas vezes só é alcançada com o uso de marcadores moleculares. No entanto, a identificação correta das espécies se faz necessária para a avaliação adequada da importância epidemiológica das mesmas. Infelizmente, são poucos os estudos que objetivam a caracterização morfológica dos membros do complexo An. oswaldoi e An. albitarsis. Objetivos Caracterizar morfologicamente e molecularmente o An. oswaldoi s.s.; caracterizar morfologicamente cinco espécies do complexo An. albitarsis; estabelecer caracteres morfológicos que permitam a separação entre as espécies do complexo An. albitarsis; solucionar problema de nomenclatura de An. marajoara. Métodos - Foram utilizados espécimes disponíveis nos acervos da Coleção Entomológica do Departamento de Epidemiologia da Faculdade de Saúde Pública (FSP/USP), do Museu Nacional do Rio de Janeiro e do Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Brasil e do National Museum of Natural History (NMNH), EUA. Foram descritas e ilustradas as fêmeas adultas, genitálias masculinas, larvas de quarto estadio e pupas de seis espécies de Nyssorhynchus, e a larva de primeiro estadio de An. albitarsis s.s. Foram utilizados 40 caracteres de fêmeas adultas das cinco espécies do complexo An. albitarsis. Nas análises morfométricas foram empregadas técnicas de análises estatísticas multivariadas. Resultados Os adultos machos e fêmeas, larvas de quarto estadio e pupas de An. oswaldoi s.s., An. albitarsis s.s., An. marajoara e An.deaneorum foram redescritos, e descritos aqueles de An. albitarsis B e An. albitarsis E. Os resultados das análises multivariadas dos caracteres morfométricos demonstraram que é possível separar as cinco espécies do complexo An. albitarsis. Para promover a estabilidade do nome An. marajoara, a lâmina da genitália masculina que acompanha o holótipo foi invalidada. Conclusões Foi possível caracterizar An. oswaldoi s.s. através de marcadores morfológicos e moleculares. Os resultados das análises morfométricas demonstraram que é possível separar as cinco espécies do complexo An. albitarsis e que os espécimes de An. marajoara podem pertencer a duas espécies distintas. / Introduction The Anopheles oswaldoi and An. albitarsis complexes contain morphologically cryptic species, including some important vectors of human malaria. Species diagnosis within each complex is problematic due to polymorphisms and overlapping morphological characters in identification keys and many times must employ molecular biology methods. Although correct identification is necessary to evaluate the respective epidemiological importance of each species, there exist few studies that have characterized the morphological characters of the An. oswaldoi and An. albitarsis complexes. Objectives Morphologically and molecularly characterize An. oswaldoi s.s.; morphologically characterize five species of the An. albitarsis complex; establish morphological characters that separate species of the An. albitarsis complex; resolve nomenclature problems within An. marajoara. Methods- Specimens used originated from the entomological collections of the Departamento de Epidemiologia of the Faculdade de Saúde Pública (Universidade de São Paulo), from the Museu Nacional do Rio de Janeiro and from Instituto Oswaldo Cruz (Rio de Janeiro) in Brazil and of the National Museum of Natural History (USA). The adult females, male genitalia, fourthinstar larvae and pupae from six species of Nyssorhynchus and the firstinstar larva of An. albitarsis s.s. were described and illustrated. Forty adult female characters were identified form five species of the An. albitarsis complex. Multivariate statistics were used in the morphometric analyses. Results Adult males and females, fourth-instar larvae and pupae of An.oswaldoi s.s., An. albitarsis s.s., An. marajoara and An. deaneorum were redescribed. Those of An. albitarsis B and An. albitarsis E were described.Results from multivariate analyses of morphological characters separated the five species of the An. albitarsis complex. To promote the nomenclature stability of An. marajoara, the male-genitalia slide associated with the holotype was invalidated. Conclusions It was possible to characterize An. oswaldoi s.s. using both morphological characters and molecular markers. Results from morphometric analyses showed that it is possible a morphological distinction among all five species, and that the specimens of An. marajoara may belong to two distinct species.

<p>Predmet ovog istraživanja su vrste iz<em>&nbsp; Merodon&nbsp; aureus,&nbsp; M.&nbsp; nanus&nbsp; i&nbsp; M. ruficornis&nbsp; </em>grupe i&nbsp;<em> M.&nbsp; avidus&nbsp; </em>kompleksa sa područja Palearktika. Usled izuzetne morfolo&scaron;ke sličnosti pomenutih vrsta, kori&scaron;ćene su tri različite metode u cilju utvrđivanja&nbsp; prisustva skrivenih taksona i definisanja granica vrsta. Komparativnom geometerijsko-morfometrijskom analizom su obuhvaćene vrste iz&nbsp;<em> M.&nbsp; aureus&nbsp; i&nbsp; M.&nbsp;</em> <em>nanus&nbsp; </em>grupe i&nbsp;<em> M.&nbsp; avidus</em>&nbsp; kompleksa. Interspecijska varijabilnost&nbsp;<em> M.&nbsp; aureus</em>&nbsp; grupe i&nbsp;<em> M.&nbsp; avidus&nbsp;</em> kompleksa je analizirana sa dva geometrijsko-morfometrijska pristupa: analiza oblika krila -&nbsp; zasnovana na specifičnim tačkama (<em>landmarks</em>) i analiza oblika genitalnog aparata mužjaka&nbsp; -&nbsp; zasnovana na pomoćnim tačkama (<em>semilandmarks</em>).<br />Sredinske ni&scaron;e su kvantifikovane i poređene &ldquo;<em>Point base</em>&rdquo; metodom i njome su obuhvaćene sve istraživane vrste. Uslovljenost razlika u obliku krila i surstila analiziranih vrsta geografskom distribucijom i klimatskim faktorima je testirana upotrebom Mantel testa. Dobijeni rezultati analize oblika krila i genitalnog aparata mužjaka ukazuju na veliki potencijal geometrijske morfometrije u detekovanju morfolo&scaron;ke&nbsp; varijabilnosti, odnosno kriptičnih vrsta kod sirfida. Na osnovu oblika krila i genitalnog aparata mužjaka, unutar svih istraţivanih grupa vrsta prepoznato je 45 nezavisnih evolucionih jedinica (<em>M.</em>&nbsp;<em>aureus</em>&nbsp;grupa - 36;&nbsp; <em>M.</em> <em>nanus</em>&nbsp;grupa - 5,&nbsp; <em>M. avidus&nbsp;</em> kompleks&nbsp; -&nbsp; 4). Sve kriptične vrste iz 12 analiziranih kompleksa vrsta su uspe&scaron;no razdvojene, sa visokim procentom korektne klasifikacije jedinki. Rezultati ukazuju na veću moć diskriminacije oblika genitalnog aparata mužjaka u odnosu na krila. Razlike u obliku krila se odnose prvenstveno na promene u apikalnom delu<br />krila &scaron;to utiče na promene u dužini i &scaron;irini ovog dela, dok su razlike u obliku genitalnog aparata mužjaka najvećim delom koncentrisane u posteriornom delu posteriornog lobusa surstila, delu genitalnog aparata mužjaka koja igra ključnu ulogu u pridržavanju ženki tokom kopulacije. Razlike u obliku krila nisu posledica geografske udaljenosti, kao ni razlika u ekolo&scaron;kim ni&scaron;ama vrsta. Uticaj abiotičkih parametara na razlike u obliku genitalnog aparata mužjaka nije zabeležen ni kod jedne od analiziranih vrsta, dok je uticaj geografske distribucije na razlike u obliku surstila zabeležen samo u jednom slučaju, kod&nbsp; <em>M. luteomaculatus</em>&nbsp;kompleksa vrsta. Ovi rezultati ukazuju da je<br />izolacija putem distance imala glavnu&nbsp; ulogu u diverzifikaciji oblika genitalnog aparata mužjaka kod vrsta ovog kompleksa.</p><p>Rezultati su pokazali da se klimatski profili svih analiziranih parova vrsta razlikuju u makar jednoj sredinskoj ni&scaron;i (PC osi), osim para vrsta&nbsp; <em>M. rojoi - M. puniceus&nbsp;</em> i&nbsp; <em>M.&nbsp; loewi&nbsp; -&nbsp; M. ovaloides</em>. Faktori koji najvi&scaron;e doprinose&nbsp;divergenciji klimatskih profila analiziranih vrsta predstavljaju esktreme tj. limitirajuće faktore poput niskih vrednosti padavina i temperature i fluktuacija temperaure tokom godine. Za razliku od &scaron;iroko rasprostranjenih vrsta, endemske vrste imaju uzak opseg nadmorskih visina na kojima se javljaju i uglavnom su vezane za planinska stani&scaron;ta. Takođe, imaju niske vrednosti standardne devijacije za većinu izdvojenih PC osa &scaron;to ukazuje na njihovu striktnu klimatsku adaptibilnost. Prema rezultatima analize distribucije i specijskog diverziteta, Balkansko poluostrvo odlikuje najveći&nbsp;divezitet analiziranih vrsta. On predstavlja centar biodiverziteta za&nbsp;<em>M. aureus</em> grupu, a zajedno sa severnim delom Apeninskog poluostrva za <em>M. ruficornis</em> grupu, dok je najveći diverzitet vrsta <em>M. nanus</em>&nbsp;grupe zabeležen na jugozapadu i severoistoku Anadolije. Analize klimatskih profila i specijskog diverziteta zajedno sa rezultatima geometrijske morfometrije ukazuju da je geolo&scaron;ka istorija, tj. kontrakcije areala tokom glacijacija i interglacijacija, značajno uticala na diverzifikaciju istraživanih grupa u refugijumima zapadnog Palearktika.</p> / <p>The objects of this study are species from <em>Merodon aureus</em>, <em>M. nanus</em>&nbsp;and <em>M.&nbsp; ruficornis</em> groups, and <em>M. avidus</em> complex in Palaearctic. These species are characterised by great morphological&nbsp; similarity, and three different approaches were used to detect cryptic species and establish species boundaries. Species from <em>M. aureus</em>&nbsp;and <em>M.&nbsp; nanus</em>&nbsp;groups, and <em>M. avidus</em> complex were analysed using geometric morphometry. Interspecific variability of <em>M. aureus</em> group and <em>M. avidus</em> complex were studied using two approaches: landmark based wing shape analysis and semilandmark analysis of male genitalia.&nbsp; Ecological niche analysis were conducted for all analyzed species.&nbsp; Correlation between Squared Mahalanobis&nbsp; distances of both wing and surstylus, and geographic and environmental distances were addressed using&nbsp; the two tailed Mantel test. Geometric morphometric results indicate that wing and especially surstylus shape, have meaningful interspecific discriminatory power. Based&nbsp; on these characters 45 evolutionary independent units are recognized (<em>M. aureus</em>&nbsp;group - 36; <em>M. nanus</em>&nbsp;group - 5, <em>M. avidus</em> complex - 4). All cryptic species from 12 analysed species complexes were successfully distinguished with high overall&nbsp; classification success. Results showed that geometric morphometry of surstylus had a higher classification rate than wing geometric morphometry. The main wing shape differences are connected with apical part of the wing which influences his length and width. The main differences in surstylus shape are connected to the posterior margin of the posterior part of the surstylus lobe, involved in gripping the female during copulation. Mantel tests revealed that geographic and environmental distances exhibited no association with wing and&nbsp; surstylus shape distance among investigated species, except in <em>M. luteomaculatus</em>&nbsp; complex. In this complex, Mantel test results suggested that isolation by distance had a major role in the diversification of male genitalia.</p><p>Ecological niche analysis contributed to the species delimitation. These results demonstrated that among all related species, with the exception of species pairs <em>M. rojoi - M. puniceus</em> and <em>M. loewi - M. ovaloides</em>, overall or partial divergence in environmental&nbsp; space is present. Distribution patterns of all analyzed species are mainly affected by the limiting effects such as low temperature and precipitation values,&nbsp; as well as the temperature fluctuation during the year.</p><p>Endemics and species with a narrow range had smaller altitudinal ranges and were mainly connected with mountainous areas. Additionally, low standard deviation values for endemic species reflect their narrow geographic distribution and very strict climatic adaptations, whereas large values for widely distributed species reflect their broad adaptability.</p><p>According to the results of distribution and species diversity analysis, the Balkan Peninsula is characterized with highest diversity. It is a centre of biodiversity for&nbsp;<em>M. aureus</em> group, together with the northern part of the Apennine peninsula for <em>M. ruficorn</em>&nbsp;is group, while the largest species diversity of <em>M. nanus</em>&nbsp;group is recorded in the southwest and northeast Anadolia.</p><p>Distribution and species diversity analyses, together with&nbsp; the results of geometric morphometry indicate that geological history, i.e. range contraction during glaciations and interglaciations had a significant impact on the diversification of the studied groups in refuges in the Western Palaearctic.</p>