Les héparanes sulfates (HS) sont synthétisés à partir d’un précurseur non sulfaté, formé de la répétition du disaccharide [GlcUA ß1,4 GlcNAc]. Ce précurseur est ensuite modifié par des enzymes de maturation, N-déacétylase/N-sulfotransférases (NDSTs), O-sulfotransférases (OSTs) et C5-épimérase. Ces enzymes, dont l’expression est dépendante du type cellulaire, possèdent des activités et des spécificités de substrat différentes, ce qui confère une grande hétérogénéité structurale aux HS et offre un large éventail de motifs de fixation pour les protéines. Il est clairement établi que les protéoglycanes à chaînes HS régulent la fixation et l'activité de nombreux facteurs inflammatoires. En revanche, peu d'informations sont disponibles sur la nature de leurs motifs HS de fixation. L’objectif de ces travaux a été de relier les variations d'expression des glucosaminyl sulfotransférases à la génération de motifs HS spécialisés dans la fixation des facteurs inflammatoires / Heparan sulfate (HS) are synthesized from a non-sulfated precursor, formed by the repetition of the disaccharide unit [GlcUA ß1,4 GlcNAc]. This precursor is subsequently modified by a set of enzymes of maturation, N-deacetylase/N-sulfotransferases (NDSTs), O-sulfotransferases (OSTs) and C5-epimerase. These enzymes, whose expression is dependent on cell type, exhibit fine differences in activity and substrate specificity, which confer a large structural heterogeneity in HS species and offer a plethora of binding sites for proteins. It is now well established that HS proteoglycans regulate the binding and activity of a number of inflammatory factors. However, little is known about the structural features of HS sequences involved in these interactions. The aim of these works was to correlate the cell-type specific expression of HS biosynthetic enzymes to the generation of specialized HS motifs with binding properties for inflammatory factors.

Les cyclophilines appartiennent à une famille de protéines initialement caractérisées par leur activité peptidyl-prolyl cis/trans isomérase et leur capacité à fixer la cyclosporine A. Les formes sécrétées des cyclophilines A (CyPA) et B (CyPB) induisent la migration de sous-populations leucocytaires, via un mécanisme dépendant de l’interaction avec un récepteur cellulaire commun, le CD147. Des données récentes ont également montré que la CyPA induit la sécrétion de cytokines pro-inflammatoires, telles que le TNF-α, ce qui suggère un rôle des cyclophilines sécrétées dans la régulation de la réponse inflammatoire. Dans ce contexte, l’objectif de mes travaux de thèse a consisté à étudier le rôle de la CyPB dans la modulation des réponses inflammatoires du macrophage. Contrairement à la CyPA, la CyPB n’induit pas la sécrétion de cytokines pro-inflammatoires. A l’inverse, la pré-incubation des cellules en présence de CyPB réduit leur production en réponse au LPS. L’analyse des réponses induites par la CyPB nous a permis de mettre en évidence l’expression de Bcl-3, un régulateur négatif de l’activité du facteur de transcription NF-κB. Nous avons alors montré que la CyPB inhibe la production de TNF-α induite par le LPS en bloquant l’activation transcriptionnelle du gène codant pour cette cytokine. En complément, nous avons mis en évidence un mécanisme de régulation post-transcriptionnelle qui pourrait faire intervenir MKP-1, une phosphatase impliquée dans l’inactivation des MAPKs et dans la déstabilisation de l’ARNm du TNF-α. Dans leur ensemble, ces travaux démontrent que la CyPB pourrait agir comme une protéine régulatrice de la réponse inflammatoire. / Cyclophilins are members of a family of proteins initially characterised for their peptidyl-prolyl cis/trans isomerase activity and their ability to interact with cyclosporine A. Secreted forms of cyclophilin A (CyPA) and B (CyPB) induce the migration of leukocyte subsets by a mechanism dependent on the interaction with a common cellular receptor, CD147. Recently published data have also shown that CyPA induced the expression of pro-inflammatory cytokines, such as TNF-α, suggesting a role for secreted cyclophilins in the regulation of inflammatory responses. In this context, the aim of my thesis was to study the implication of CyPB in the modulation of inflammatory responses of macrophages. Unlike CyPA, CyPB did not induce the secretion of pro-inflammatory cytokines. Conversely, pre-treatment with CyPB reduced the production of cytokines from LPS-stimulated macrophages. Analysis of the responses induced by CyPB has highlighted the expression of Bcl-3, a negative regulator of the transcriptional factor NF-κB. Then, we showed that CyPB inhibited LPS-induced production of TNF-α by blocking the transcriptional activation of the gene coding for this cytokine. In addition, we characterized a mechanism of post-transcriptional regulation that could bring into play MKP-1, a phosphatase involved in down-regulation of MAPKs and destabilization of TNF-α mRNA. Altogether, these findings indicate that CyPB could act as a regulatory protein in the inflammatory responses.