A cutia Dasyprocta leporina é um roedor pertencente à sub-ordem histricomorfa, e é encontrada em todo território nacional. Os roedores da sub-ordem histricomorfa apresentam uma placenta dotada de uma estrutura peculiar, a subplacenta. Nesta pesquisa estudou-se em 9 (nove) placentas de cutias, nas três fases de gestação (inicial, média e final). Este estudo consistiu da análise morfológica placentária, pelas microscopias de luz e eletrônica, em conjunto com as técnicas de citoquímica, imunohistoquímica, e microvascularização. A subplacenta da cutia encontra-se localizada no ápice da placenta corioalantoidiana, separada desta por um tecido mesenquimal. Insere-se na parede uterina em íntimo contato com o tecido materno. Histologicamente a subplacenta consistiu de estruturas lamelares, cujos eixos são formados por tecido mesenquimal fetal. Sobre estes apoiam-se arranjos epiteliais de cito e sinciciotrofoblasto. Na região de interface da subplacenta e da decídua, foram encontradas populações de células trofoblásticas gigantes multinucleadas, citoqueratina positivas. A vimentina apresentou intensa reação positiva junto ao revestimento endotelial dos vasos do tipo arterial, e no interior do tecido mesenquimal do eixo central das lamelas da subplacenta. A reação de PCNA apresentou reatividade positiva no citotrofoblasto das lamelas da subplacenta, e em algumas células do sincício, principalmente no terço médio de gestação. A análise ultra-estrutural da subplacenta mostrou duas populações de células trofoblásticas distintas na parede das lamelas: o cito e o sinciciotrofoblasto. A vascularização da subplacenta analisada pela perfusão de látex colorido, e por Mercox, ao microscópio eletrônico de varredura, demonstrou a ausência de vasos de origem materna, e irrigação oriunda da artéria fetal. Esta após capilarização dirigia-se para os lóbulos da placenta principal, cuja disposição lembrava uma circulação do tipo portal. / The agouti Dasyprocta leporina is a rodent belongs to the suborder hystricomorph, and may be found in all national territory. The hystricomorph has one specific structure on the placenta, the subplacenta. In this research 9 (nine) placentae of agouti were studied, in three different gestation age (early, middle and late). The study consisted of placental morphologic analysis by light and electron microscopy, associated with cytochemical, immunohystochemistry and microvascularization techniques. The subplacenta of agouti is localized on the apical part of the chorioallantoic placenta, separated by a mesenchyme and inserted on the uterus wall. Histologically the subplacenta consisted of lamear structures where the axis was formed by mesenchyme. On this structure the epithelial formation of the cytotrophoblast and syncytiotrophoblast was found. In the region between suplacenta and decidua the multinucleate giant trophoblast cells were observed, cytokeratin immunostaining. The endothelial cells on the arterial vessels showed intense positive reaction to vimentin and also the mesenchyme from axis of the lamelae. The cytotrophoblast on the lamelae and some cells of the syncytiotrophoblast showed PCNA positive reaction, principally in middle part of gestation. The ultra-structure analysis of the subplacenta showed two cells populations on the lamelae: the cytotrophoblast and syncytiotrophoblast. The vascularization analyzed by scanning electron microscopy of the Mercox and by colored latex perfusion demonstrated only fetal vessels on the subplacenta originated from fetal artery. The fetal artery, after branched in a net of capillaries, run to lobules of the principal placental, and this behavior suggest a type of portal circulation.

A cutia Dasyprocta leporina é um roedor pertencente à sub-ordem histricomorfa, e é encontrada em todo território nacional. Os roedores da sub-ordem histricomorfa apresentam uma placenta dotada de uma estrutura peculiar, a subplacenta. Nesta pesquisa estudou-se em 9 (nove) placentas de cutias, nas três fases de gestação (inicial, média e final). Este estudo consistiu da análise morfológica placentária, pelas microscopias de luz e eletrônica, em conjunto com as técnicas de citoquímica, imunohistoquímica, e microvascularização. A subplacenta da cutia encontra-se localizada no ápice da placenta corioalantoidiana, separada desta por um tecido mesenquimal. Insere-se na parede uterina em íntimo contato com o tecido materno. Histologicamente a subplacenta consistiu de estruturas lamelares, cujos eixos são formados por tecido mesenquimal fetal. Sobre estes apoiam-se arranjos epiteliais de cito e sinciciotrofoblasto. Na região de interface da subplacenta e da decídua, foram encontradas populações de células trofoblásticas gigantes multinucleadas, citoqueratina positivas. A vimentina apresentou intensa reação positiva junto ao revestimento endotelial dos vasos do tipo arterial, e no interior do tecido mesenquimal do eixo central das lamelas da subplacenta. A reação de PCNA apresentou reatividade positiva no citotrofoblasto das lamelas da subplacenta, e em algumas células do sincício, principalmente no terço médio de gestação. A análise ultra-estrutural da subplacenta mostrou duas populações de células trofoblásticas distintas na parede das lamelas: o cito e o sinciciotrofoblasto. A vascularização da subplacenta analisada pela perfusão de látex colorido, e por Mercox, ao microscópio eletrônico de varredura, demonstrou a ausência de vasos de origem materna, e irrigação oriunda da artéria fetal. Esta após capilarização dirigia-se para os lóbulos da placenta principal, cuja disposição lembrava uma circulação do tipo portal. / The agouti Dasyprocta leporina is a rodent belongs to the suborder hystricomorph, and may be found in all national territory. The hystricomorph has one specific structure on the placenta, the subplacenta. In this research 9 (nine) placentae of agouti were studied, in three different gestation age (early, middle and late). The study consisted of placental morphologic analysis by light and electron microscopy, associated with cytochemical, immunohystochemistry and microvascularization techniques. The subplacenta of agouti is localized on the apical part of the chorioallantoic placenta, separated by a mesenchyme and inserted on the uterus wall. Histologically the subplacenta consisted of lamear structures where the axis was formed by mesenchyme. On this structure the epithelial formation of the cytotrophoblast and syncytiotrophoblast was found. In the region between suplacenta and decidua the multinucleate giant trophoblast cells were observed, cytokeratin immunostaining. The endothelial cells on the arterial vessels showed intense positive reaction to vimentin and also the mesenchyme from axis of the lamelae. The cytotrophoblast on the lamelae and some cells of the syncytiotrophoblast showed PCNA positive reaction, principally in middle part of gestation. The ultra-structure analysis of the subplacenta showed two cells populations on the lamelae: the cytotrophoblast and syncytiotrophoblast. The vascularization analyzed by scanning electron microscopy of the Mercox and by colored latex perfusion demonstrated only fetal vessels on the subplacenta originated from fetal artery. The fetal artery, after branched in a net of capillaries, run to lobules of the principal placental, and this behavior suggest a type of portal circulation.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-02-17T22:37:29Z No. of bitstreams: 1 ThiberioDeSouzaCastelo_TESE.pdf: 2616733 bytes, checksum: 7ec74d06a9aa91a8661ccee8c3a034fe (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-02-19T22:29:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ThiberioDeSouzaCastelo_TESE.pdf: 2616733 bytes, checksum: 7ec74d06a9aa91a8661ccee8c3a034fe (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-19T22:29:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ThiberioDeSouzaCastelo_TESE.pdf: 2616733 bytes, checksum: 7ec74d06a9aa91a8661ccee8c3a034fe (MD5) Previous issue date: 2015-02-26 / O objetivo foi estabelecer protocolos para obten??o e conserva??o de espermatozoides de cutias (Dasyprocta leporina) criadas em cativeiros no semi-?rido brasileiro, visando sua explora??o sustent?vel. Para tanto tr?s experimentos foram realizados. No primeiro, foi avaliada a influ?ncia da intera??o entre dois tipos de sonda (ondas senoidais e quadr?ticas) e dois protocolos de estimula??o (cont?nuo e seriado) sobre a efici?ncia da colheita de s?men de cutias por eletroejacula??o. A intera??o mais eficiente na obten??o de ejaculados com espermatozoides foi a que utilizou eletrodos em aneis associado com est?mulos em s?rie (4/7; 57%, P<0,05). No segundo, foi realizada a compara??o da a??o crioprotetora de diferentes subst?ncias (glicerol, etilenoglicol, dimetilsulf?xido, dimetilformamida) na criopreserva??o de espermatozoides epididim?rios. Relativo a isso, os maiores valores de motilidade (39,5?4,6%), vigor (2,9?0,2) e integridade de membrana (30,6?4,5%) foram obtidos nas amostras criopreservadas com glicerol quando comparada as amostras contendo etilenoglicol e dimetilformamida, contudo, sem diferen?a (P>0,05) quando comparada as criopreservadas com dimetilsulfoxido. Finalmente, foi analisado o efeito dos m?todos de obten??o de espermatozoides (eletroejacula??o vs colheita epididim?ria) sobre a qualidade dos espermatoz?ides criopreservados. Como resultado as amostras obtidas por lavagem epididm?ria apresentaram motilidade de 25,0?10,9% e vigor 2,4?0,8 e as obtidas por eletroejacula??o obtiveram 31,2?14,2% de motilidade e 2,2?0,7 de vigor, por?m sem diferen?as significativas (P>0,05), denotando a possibilidade de aplicar diretamente, com sucesso, o protocolo de criopreserva??o de espermatozoides epididimarios de cutias (Dasyprocta leporina) para ejaculados da mesma esp?cie. Na presente tese, foram alcan?ados avan?os significativos na obten??o e processamento de espermatozoides de cutias, possibilitando a forma??o de bancos de germoplasmas a partir de amostras oriundas tanto dos epid?dimos quanto por eletroejacula??o. / The general objective of this thesis was to stablish protocols to obtain and conserve agouti (Dasyprocta leporina) sperm bred in captivity in the Brazilian semi-arid, aiming its sustainable production. The thesis was divided in three experiments. In the first one, we studied the influence of the interaction between two probes (quadratics and sine waves) and two stimulation protocols (continuous and in series) on the agouti sperm collection by electroejaculation efficiency. The most efficient interaction on this obtainment was the one with probes with rings associated with stimuli in series (4/7; 57%, P<0.05). In the second experiment we compared the cryoprotectant effects of different substances (glycerol, ethyleneglycol, dimethylsulfoxide, dimethylformamide) on epididymis sperm cryopreservation. The highest values on motility (39.5?4.6%), vigor (2.9?0.2) and membrane integrity (30.6?4.5%) were observed on the samples cryopreserved using glycerol when compared to those with ethyleneglycol and dimethylformamide, but there was no difference (P>0.05) when compared to the samples cryopreserved with dimethylsulfoxide. At last, we studied the effects of the methods to obtain sperm (electroejaculation vs epididymal collection) on post thawing sperm quality. The samples obtained by epididymal retrograde flushing showed values for motility of 25.0?10.9% and vigor 2.4?0.8, and those obtained by electroejaculation had 31.2?14.2% of motility and vigor of 2.2?0.7, however, without statistical difference (P>0.05), which shows the possibility to successfully use the epididymal sperm cryopreservation protocol on agouti ejaculated sperm. In conclusion, significant advances on obtainment and processing of agouti sperm were made, allowing the establishment of germplasm banks from sperm samples obtained from the epididymis or by electroejaculation.

Os ecossistemas de ilhas, continentais ou oceânicas, são considerados os mais sensíveis à perturbação humana. A maioria das ilhas costeiras do Brasil sofreu fortes alterações na fauna e flora silvestre. A Ilha Anchieta (Ubatuba, SP) é uma Área Protegida com um longo histórico de perturbação, tendo sido amplamente desmatada no passado e sofrido a introdução de animais. Sabe-se que a fauna possui um papel chave na composição e estrutura da comunidade vegetal, favorecendo algumas espécies e prejudicando outras. Sendo assim, a perda ou alteração dos processos de interações entre animais e plantas afetam na estrutura e composição de espécies. Este estudo analisa as interações antagônicas entre planta e animais como possíveis fatores limitantes no processo de regeneração natural em três ambientes com distintos estágios sucessionais presentes na Ilha Anchieta: campo aberto (CA) e florestas ombrófilas rala (FOR) e densa (FOD). Para isso foram testados nos três ambientes os processos pós-dispersão de sementes: a predação de sementes pós-dispersas, a germinação do banco de sementes e a herbivoria. A predação de sementes apresentou forte efeito espacial (FOD>FOR>CA) e sazonal, com maiores proporções de predação de sementes no período de escassez de alimento (estação seca). Quantitativamente o banco de sementes não representa um fator limitante, porém foi composto por uma baixa diversidade de espécies lenhosas. A capacidade de germinação do banco de sementes do solo foi similar entre os ambientes florestais apresentando menor emersão de plântulas no campo aberto, provavelmente associado ao intenso escoamento superficial no local. Adicionalmente, a mortalidade de juvenis transplantados foi de 72,27%, sendo superior nas parcelas abertas aos vertebrados para todas as espécies em todos os ambientes, demonstrando um forte efeito negativo dos herbívoros vertebrados na comunidade vegetal. Sendo assim, foram detectados distintos gargalos atuando simultaneamente na regeneração natural nos três ambientes da Ilha Anchieta, sendo necessário o estabelecimento de práticas de manejo visando minimizar os efeitos abióticos no campo aberto e floresta ombrófila rala, favorecendo as interações mutualísticas e inibindo a atividade de animais antagônicos nas florestas ombrófilas rala e densa, acelerando assim o processo de regeneração natural na Ilha Anchieta. Considerar simultaneamente os obstáculos no processo de regeneração nos auxiliará a traçar práticas de restauração e recuperação de áreas degradadas mais efetivas e viáveis economicamente. / Island ecosystems, either continental or oceanic, are considered the most sensible to anthropogenic influences. Most Brazilian coastal islands have their original fauna and flora composition altered. The Anchieta Island (southeast Brazil) is a Protected Area that suffered deforestation and introduction of alien species. It is known that the fauna plays a key role in composing and structuring the vegetal community, favoring some species and harming others. Thus, the loss or change of animal-plant interactions affects the framework and composition of species. We simultaneously analyzed the antagonistic animal-plant interactions as possible limiting factors in the natural regeneration on tree successional stages of the Anchieta Island: the old fields (OF), the early secondary forest (ESF) and old growth forest (OGF). Therefore, in each habitat we are evaluating post-dispersal seed predation processes: post-dispersal seed predation, soil seed bank, and the herbivory. We found spatial (OGF>ESF>OF) and temporal effects on seed predation, with highest rates on dry season. Quantitatively, soil seed bank did not represent a limiting factor; but qualitatively, it was composed by few woody species. Our data pointed to the absence of a viable soil seed bank in the OF, probably due to an intense runoff. The forested habitats presented similar soil bank. Moreover, the total mortality of saplings was 72.27%, being higher on the unfenced treatment for all species and in all habitats, showing a very strong negative effect of vertebrate herbivores on the vegetal community. Therefore, we are detecting distinct bottlenecks acting simultaneously in the natural regeneration process in all of the successional stages of the Anchieta Island. Our results showed that management actions are required, aiming to both minimize the abiotic effects on the old fields and in the early secondary forest and to favor the mutual interactions and inhibit the activity of antagonic animals in the old growth and early secondary forests, accelerating, this way, the natural regeneration process of the Anchieta Island. Considering simultaneously the obstacles in the regeneration process will help to define restoration and recuperation procedures of degraded areas more effective and affordable.

Os ecossistemas de ilhas, continentais ou oceânicas, são considerados os mais sensíveis à perturbação humana. A maioria das ilhas costeiras do Brasil sofreu fortes alterações na fauna e flora silvestre. A Ilha Anchieta (Ubatuba, SP) é uma Área Protegida com um longo histórico de perturbação, tendo sido amplamente desmatada no passado e sofrido a introdução de animais. Sabe-se que a fauna possui um papel chave na composição e estrutura da comunidade vegetal, favorecendo algumas espécies e prejudicando outras. Sendo assim, a perda ou alteração dos processos de interações entre animais e plantas afetam na estrutura e composição de espécies. Este estudo analisa as interações antagônicas entre planta e animais como possíveis fatores limitantes no processo de regeneração natural em três ambientes com distintos estágios sucessionais presentes na Ilha Anchieta: campo aberto (CA) e florestas ombrófilas rala (FOR) e densa (FOD). Para isso foram testados nos três ambientes os processos pós-dispersão de sementes: a predação de sementes pós-dispersas, a germinação do banco de sementes e a herbivoria. A predação de sementes apresentou forte efeito espacial (FOD>FOR>CA) e sazonal, com maiores proporções de predação de sementes no período de escassez de alimento (estação seca). Quantitativamente o banco de sementes não representa um fator limitante, porém foi composto por uma baixa diversidade de espécies lenhosas. A capacidade de germinação do banco de sementes do solo foi similar entre os ambientes florestais apresentando menor emersão de plântulas no campo aberto, provavelmente associado ao intenso escoamento superficial no local. Adicionalmente, a mortalidade de juvenis transplantados foi de 72,27%, sendo superior nas parcelas abertas aos vertebrados para todas as espécies em todos os ambientes, demonstrando um forte efeito negativo dos herbívoros vertebrados na comunidade vegetal. Sendo assim, foram detectados distintos gargalos atuando simultaneamente na regeneração natural nos três ambientes da Ilha Anchieta, sendo necessário o estabelecimento de práticas de manejo visando minimizar os efeitos abióticos no campo aberto e floresta ombrófila rala, favorecendo as interações mutualísticas e inibindo a atividade de animais antagônicos nas florestas ombrófilas rala e densa, acelerando assim o processo de regeneração natural na Ilha Anchieta. Considerar simultaneamente os obstáculos no processo de regeneração nos auxiliará a traçar práticas de restauração e recuperação de áreas degradadas mais efetivas e viáveis economicamente. / Island ecosystems, either continental or oceanic, are considered the most sensible to anthropogenic influences. Most Brazilian coastal islands have their original fauna and flora composition altered. The Anchieta Island (southeast Brazil) is a Protected Area that suffered deforestation and introduction of alien species. It is known that the fauna plays a key role in composing and structuring the vegetal community, favoring some species and harming others. Thus, the loss or change of animal-plant interactions affects the framework and composition of species. We simultaneously analyzed the antagonistic animal-plant interactions as possible limiting factors in the natural regeneration on tree successional stages of the Anchieta Island: the old fields (OF), the early secondary forest (ESF) and old growth forest (OGF). Therefore, in each habitat we are evaluating post-dispersal seed predation processes: post-dispersal seed predation, soil seed bank, and the herbivory. We found spatial (OGF>ESF>OF) and temporal effects on seed predation, with highest rates on dry season. Quantitatively, soil seed bank did not represent a limiting factor; but qualitatively, it was composed by few woody species. Our data pointed to the absence of a viable soil seed bank in the OF, probably due to an intense runoff. The forested habitats presented similar soil bank. Moreover, the total mortality of saplings was 72.27%, being higher on the unfenced treatment for all species and in all habitats, showing a very strong negative effect of vertebrate herbivores on the vegetal community. Therefore, we are detecting distinct bottlenecks acting simultaneously in the natural regeneration process in all of the successional stages of the Anchieta Island. Our results showed that management actions are required, aiming to both minimize the abiotic effects on the old fields and in the early secondary forest and to favor the mutual interactions and inhibit the activity of antagonic animals in the old growth and early secondary forests, accelerating, this way, the natural regeneration process of the Anchieta Island. Considering simultaneously the obstacles in the regeneration process will help to define restoration and recuperation procedures of degraded areas more effective and affordable.