Made available in DSpace on 2015-09-25T12:21:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Geovani Pereira Guimaraes Parte 1.pdf: 3398630 bytes, checksum: 81b670f436a4a8c1e3b9703c8749dc30 (MD5) Previous issue date: 2013-05-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Fungal infections have become an issue of great impact around the world, and the Candida species and Cryptococcus neoformans are responsible for various clinical manifestations mainly in immunocompromised patients. The antifungal therapy is actually based in a few chemotherapeutic agents that present problems of efficacy and resistance. The thiophene derivatives molecules are related to various biological properties including antifungal activity. The 5CN05 molecule is a thiophene derivative which has in vitro antifungal activity and poor water solubility. Currently, great emphasis has been given to the incorporation of this kind of molecules in colloidal systems such as microemulsions (ME). The present study aimed to incorporate the 5CN05 molecule in a ME as well as perform the physicochemical and rheological characterization of the formulations and evaluate the antifungal activity against Candida species and Cryptococcus neoformans. Were evaluated two methods to incorporate the 5CN05. For morphology characterization of the MEs were used the methods of polarized light microscopy (MLP), differential scanning calorimetry (DSC) and transmission electron microscopy (TEM). The rheological studies evaluated the flow behavior (flow tests) and the viscoelastic behavior (oscillatory tests) of the MEs. The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined using the microdilution method indicated by the Clinical and Laboratory Standards Institute, using amphotericin B as a control. The developed formulation consists of LAS® (35.3%), Plurol Oleique® (17.5%), isopropyl myristate (5.9%) and water (41.2%). Using the techniques of MLP, DSC and TEM was possible to confirm the structure of the ME system as oil in water (O/W) droplets. The incorporation method by ultrasonic homogenization was effective. Rheologically, the ME-5CN05 was characterized as a pseudoplastic non-newtonian fluid, showing viscoelasticity and elastic solid behavior. The evaluated formulations exhibited physicochemical properties that allow its use by the topical route. The 5CN05 showed moderate or weak antifungal activity against Candida species (270-540 μg.mL-1) and good activity against C. neoformans (17 μg.mL-1). The Candida yeasts showed sensitivity to the ME-5CN05 (70-140 μg.mL-1) and C. neoformans showed MIC of 2.2 μg.mL-1. The results of this work show to be promising since it may represent a therapeutic alternative against C. neoformans. / As infecções fúngicas têm se tornado um problema de grande incidência em todo o mundo, sendo as leveduras do gênero Candida e Cryptococcus neoformans responsáveis por diversas manifestações clínicas principalmente em pacientes imunodeprimidos. A terapêutica antifúngica baseia-se atualmente em poucos agentes quimioterápicos que apresentam problemas de eficácia e resistência. Os compostos derivados do tiofeno estão relacionados a várias propriedades biológicas, incluindo atividade antifúngica. A 5CN05 é uma molécula derivada do tiofeno que apresenta atividade antifúngica in vitro e baixa solubilidade. Atualmente, tem-se dado ênfase a incorporação deste tipo de moléculas em sistemas coloidais como as microemulsões (ME). O presente trabalho teve por objetivo incorporar o 5CN05 em ME, bem como realizar caracterização físico-química e reológica das formulações e avaliar a atividade antifúngica contra espécies de Candida e Cryptococcus neoformans. Foram avaliadas duas metodologias de incorporação do 5CN05. Para caraterização da estrutura foram utilizados os métodos de microscopia de luz polarizada (MLP), calorimetria exploratória diferencial (DSC) e microscopia eletrônica de transmissão (MET). Os estudos reológicos avaliaram o comportamento de escoamento (testes de escoamento), e o comportamento viscoelástico (testes oscilatórios) dos sistemas ME. A concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada segundo o método da microdiluição indicado pelo Clinical and Laboratory Standards Institute, usando a anfotericina B como controle. A formulação desenvolvida foi constituída por LAS® (35,3%), Plurol Oleique® (17,5%), miristato de isopropila (5,9%) e água (41,2%). Através das análises de MLP, DSC e MET foi possível confirmar a estruturação do sistema como ME do tipo óleo em água (O/A). O método de incorporação do 5CN05 por homogeneização em ultrassom mostrou-se eficiente. Reologicamente, a ME-5CN05 foi caracterizada como um fluido não-newtoniano pseudoplástico, apresentando viscoelasticidade e comportamento de sólido elástico. As formulações avaliadas apresentaram características fisico-químicas que possibilitam o seu uso pela via tópica. O 5CN05 mostrou moderada ou fraca atividade antifúngica contra espécies de Candida (270-540 μg.mL-1) e boa atividade contra C. neoformans (17 μg.mL-1). As leveduras de Candida apresentaram sensibilidade ao produto ME-5CN05 (70 140 μg.mL-1) e C. neoformans apresentou CIM de 2.2 μg.mL-1. Os resultados do presente trabalho mostram-se promissores uma vez que o mesmo possa vir a representar uma alternativa terapêutica contra C. neoformans.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2233780 bytes, checksum: 36fd18af67f2bd8e2c76af844131f20c (MD5) Previous issue date: 2012-08-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Heterocyclic compounds are the biggest sources of synthetic drugs and have grown exponentially with important applications in the pharmaceutical industry. Amongst the heterocyclic compounds, it has been highlighted the thiophenes category and its derivatives, which call attention for presenting important pharmacological actions, especially analgesic and the anti-inflammatory ones. The present study aims to investigate the Antinociceptive, anti-inflammatory activity and acute pre-clinical from tiophenic derivative 6CN10. The behavioral pharmacological screening of treated animals (250, 500 and 1000 mg/kg) showed changes, such as analgesia and ambulation reduction. There was no death of animals or the presence of toxic signs. From the pharmacological screening was determined the use of three doses (25, 50 and 100 mg/kg) for other studies. In the Rota rod and open field tests, there were no changes in the motor coordination of animals, discarding the possibility of a myorelaxant effect. Through models of nociception inducers, such as the abdominal constriction induced by acetic acid, formalin and hot plate, it was noticed a dose-dependent Antinociceptive activity of 6CN10. Such effect did not show itself to be associated to the opioid via of central analgesia, once this derivative did not produce any significant effect in the hot plate test, and because it has not been blocked by naloxone, an pattern antagonist opioid. The 6CN10 inhibited significantly the time of paw licking in both phases of the formalin test, especially at the inflammatory phase, being needed an analysis of the anti-inflammatory activity of the derivative. For this purpose, it was used the model of induced peritonitis by carrageenan, where there was inhibition of neutrophil migration to the intra-peritoneal cavity of treated animals, demonstrating the anti-inflammatory activity of 6CN10. In the acute toxicological study after treatment with the dosage of 1000 mg/kg 6CN10, it was observed a reduction in the food intake and in the body weight in females. The examined hematological parameters remained unaffected. The treatment was able to raise levels of ALT and AST, in both sexes, corroborating with histopathological findings that showed evidence of Hepatotoxicity. The kidneys, heart and lungs showed no histological particularities. Therefore, the results presented in this study showed a promising effect of 6CN10 as an analgesic and anti-inflammatory substance, however its security should be better investigated. / Os compostos heterocíclicos são as maiores fontes de fármacos sintéticos e têm crescido exponencialmente apresentando importantes aplicações na indústria farmacêutica. Entre os compostos heterocíclicos destacamos a classes dos tiofenos e seus derivados, que despertam grande interesse por apresentarem ações farmacológicas importantes, sobretudo, analgésica e antiinflamatória. O presente estudo se propôs a investigar a atividade antinociceptiva, antiinflamatória e a toxicidade pré-clínica aguda do derivado tiofênico 6CN10. A triagem farmacológica comportamental dos animais tratados (250, 500 e 1000 mg/kg) demonstrou alterações, tais como, analgesia e redução da ambulação. Não houve morte dos animais, nem presença de sinais tóxicos. A partir da triagem farmacológica determinou-se a utilização de três doses (25, 50 e 100 mg/kg) para os demais estudos. Nos testes de rota rod e campo aberto, não foram observadas alterações na coordenação motora dos animais, descartando a possibilidade de um efeito miorelaxante. Por meio de modelos indutores de nocicepção, como os testes das contorções abdominais induzidas por ácido acético, da formalina e da placa quente, foi observado uma atividade antinociceptiva dose-dependente de 6CN10. Tal efeito não demonstrou associar-se à via opióide de analgesia central, uma vez que este derivado não produziu efeito significativo no teste da placa quente, e por não ter sido bloqueado pela naloxona, um antagonista opióide padrão. 6CN10 inibiu significativamente o tempo de lambedura da pata em ambas as fases do teste formalina, sobretudo na fase inflamatória, se fazendo necessário uma análise da atividade antiinflamatória do derivado. Para este fim, utilizou-se o modelo de peritonite induzida pela carragenina, onde houve inibição da migração de neutrófilos para a cavidade intraperitoneal dos animais tratados, demonstrando a atividade antiinflamatória do 6CN10. No estudo toxicológico agudo após tratamento com a dose de 1000 mg/kg de 6CN10, foi observado redução da ingestão de alimentos e peso corpóreo nas fêmeas tratadas. Os parâmetros hematológicos analisados permaneceram inalterados. O tratamento foi capaz de elevar os níveis de ALT e AST, em ambos os sexos, corroborando com os achados histopatológicos que mostraram indícios de hepatotoxicidade. Os rins, coração e pulmões não apresentaram particularidades histológicas. Portanto, os resultados apresentados neste estudo evidenciaram um efeito promissor de 6CN10 como substância analgésica e antiinflamatória, contudo a sua segurança deve ser melhor investigada.