Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2014-09-24T21:11:51Z No. of bitstreams: 2 Souza, Fabrício Ribeiro de - Dissertação - 2013.pdf: 1564907 bytes, checksum: 3eb82393d3125b0bd24821af947f63b8 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-09-25T10:36:07Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Souza, Fabrício Ribeiro de - Dissertação - 2013.pdf: 1564907 bytes, checksum: 3eb82393d3125b0bd24821af947f63b8 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-25T10:36:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Souza, Fabrício Ribeiro de - Dissertação - 2013.pdf: 1564907 bytes, checksum: 3eb82393d3125b0bd24821af947f63b8 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-08-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This report describes the fabrication of a minimally instrumented polyestertoner device (PTD) to perform by the first time, clinical diagnostics with colorimetric detection and microfluidic transport by capillary action. A conventional digital camera, a cellphone camera, an optical microscope, and a scanner mode from a multifunction printer were evaluated for using as colorimetric detector. In order to study the analytical performance it was used a platform containing nine detection zones directly printed on a polyester film. It has been observed that all electronic devices studied could be applied as colorimetric detector. However, the scanner exhibited the best performance on the control of two problems often observed in the images acquisition, which are related to the ambient light and focus. Due to the best results, the analytical feasibility of the scanner was evaluated for the determination of Fe2+ in drugs samples by using the 1,10-phenanthroline method. The data were compared to results achieved by a reference spectrophotometric method. Based on a statistical analysis, it was not been found significance differences (P=0,05). Afterwards, the scanner was chosen to monitor the colorimetric response of clinical assays regarded to the detection of glucose, total protein, cholesterol, and triglycerides on a PTD. The proposed device exhibited good inter and intra-device reproducibility (relative standard deviation values lower than 6%). A semi-quantitative analysis of glucose, total protein, and cholesterol in an artificial serum sample provided results similar to the data provide by the supplier. The shelf life of PTDs was evaluated in a period of five days, using the glucose assay at three different temperature: 10 ºC, 25 ºC e 40 ºC. The shelf life was estimated to be c.a. three days, taking into account that in this period there was a lost of 50% in the mean color intensity. Lastly, it was observed that the addition of a disaccharide (trehalose) ensures the enzymatic stability at the different temperatures during five consecutive days. The cost of a PTD has been estimated to be ca. R$ 0.40 taking into account the fabrication process. / O presente trabalho descreve a construção de dispositivos em poliéster-toner (DPTs) minimamente instrumentados para conduzir, pela primeira vez, diagnósticos clínicos utilizando detecção colorimétrica e transporte microfluídico com ação capilar. Uma câmera digital convencional, uma câmera de celular, um microscópio óptico e o modo scanner de uma impressora multifuncional foram avaliados como detectores colorimétricos. No estudo do desempenho analítico utilizou-se uma plataforma com nove zonas de detecção impressas diretamente em uma folha de poliéster. Todos os dispositivos eletrônicos avaliados podem ser aplicados como detector colorimétrico. Entretanto, o scanner demonstrou facilidade no controle dos dois problemas que dificultam a aquisição das imagens: quantidade de luz do ambiente e foco. Frente a essa facilidade, realizou-se um estudo comparando o desempenho analítico do scanner em relação a um espectrofotômetro, utilizando a determinação de Fe2+ pelo método da 1,10- fenantrolina. Cálculos estatísticos foram realizados e não foram observadas diferenças significativas entre o desempenho analítico dos equipamentos (P=0,05). Após, a avaliação do desempenho analítico, o scanner foi escolhido para monitorar a resposta colorimétrica dos ensaios clínicos de glicose, proteínas totais, colesterol e triglicerídeos, usando os DPTs. O dispositivo proposto apresentou boa repetibilidade inter e intra-dispositivos com desvio padrão relativo abaixo de 6%. Uma análise semi-quantitativa para glicose, proteínas totais e colesterol foi conduzida utilizando uma amostra de soro humano artificial. Os níveis de concentração encontrados estavam de acordo com os dados fornecidos pelo fabricante. O tempo de meia-vida dos DPTs foi avaliado ao longo de cinco dias, utilizando o ensaio para glicose em diferentes temperaturas: 10 ºC, 25 ºC e 40 ºC. A meia-vida dos DPTs foi estimado em três dias, considerando que nesse período houve um decréscimo de 50% na intensidade média de pixels, da cor desenvolvida. Observou-se que a adição de um dissacarídeo (trealose) assegurou a estabilidade enzimática em diferentes temperaturas ao longo de cinco dias consecutivos. O custo total de um DPT, considerando o processo de fabricação, foi estimado em R$ 0,40.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-07-04T11:50:13Z No. of bitstreams: 2 Tese - Karoliny Almeida Oliveira - 2017.pdf: 20054165 bytes, checksum: a9c846097d699d587dbf63736056a5a3 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-07-04T12:33:06Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Karoliny Almeida Oliveira - 2017.pdf: 20054165 bytes, checksum: a9c846097d699d587dbf63736056a5a3 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-04T12:33:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Karoliny Almeida Oliveira - 2017.pdf: 20054165 bytes, checksum: a9c846097d699d587dbf63736056a5a3 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-12-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This thesis describes the development of colorimetric sensors in polymeric materials for the biomarkers detection for clinical diagnostics. The devices were manufactured with 96 microzones from the direct printing technology, using transparency film. The printed microplates were used to detect dengue, glucose and total proteins. Dengue detection in patient serum samples was performed with the capture and indirect ELISA assay for the detection of immunoglobulin M and immunoglobulin G, respectively. After the acquisition of the images with a cellular camera, a color histogram analysis and the principal component analysis (PCA) were performed. The results of these analyzes allowed to easily differentiate the groups of serum samples from patients who were infected and non-infected with the dengue virus. In order to promote carboxyl groups on the surface of the polyester film, this was modified by two methodologies: alkaline hydrolysis and adsorption of a polymer. The glucose assay was performed on the films modified by both methodologies and detected by a cellular camera, and the detection limits found were 0.70 mM and 0.93 mM for the polymer and hydrolyzed film, respectively. In addition, the biuret assay was performed on the microplates for the analysis of total proteins in canine serum samples using a bench scanner as the detection system. The limit of detection was 9.7 μM for the analytical curve ranging from 0 to 200 μM albumin. / Essa tese descreve o desenvolvimento de sensores colorimétricos em materiais poliméricos para detecção de biomarcadores para diagnósticos clínicos. Os dispositivos foram fabricados com 96 zonas a partir da tecnologia de impressão direta, utilizando filme de transparência. As microplacas impressas foram utilizadas para realizar a detecção de dengue, glicose e proteínas totais. A detecção de dengue em amostras de soros de pacientes foi realizada com o ensaio imunoenzimático (ELISA) captura e indireto para a detecção da imunoglobulina M e imunoglobulina G, respectivamente. Após a aquisição das imagens com uma câmera de celular foi realizada uma análise por histogramas de cores e pela ferramenta multivariada de análise de componentes principais (PCA). Os resultados dessas análises permitiram diferenciar facilmente os grupos de amostras de soro de pacientes contaminados e não contaminados com o vírus da dengue. A fim de promover grupos carboxílicos na superfície do filme de poliéster, este foi modificado por duas metodologias: hidrólise alcalina e adsorção de um polímero. O ensaio de glicose foi realizado nos filmes modificados por ambas as metodologias e detectados por uma câmera de celular, e os limites de detecção encontrados foram 0,70 mM e 0,93 mM, para o filme com polímero e hidrolisado, respectivamente. Além disso, foi realizado nas microplacas o ensaio do biureto para a análise de proteínas totais em amostras de soro canino utilizando como sistema de detecção um scanner de bancada. O limite de detecção encontrado foi igual a 9,7 µM através da curva analítica variando de 0 a 200 µM de albumina.