MENEZES, Adriana Magalhães Andrade de. Estudo de mecanismos envolvidos no efeito do bisfosfonato alendronato dissódico na doença periodontal experimental. 2003. 157 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2003. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-03-02T11:43:21Z No. of bitstreams: 1 2003_dis_amamenezes.pdf: 1685855 bytes, checksum: c66ebddb484fc231e473fb9b2ddf63b3 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-03-05T12:55:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2003_dis_amamenezes.pdf: 1685855 bytes, checksum: c66ebddb484fc231e473fb9b2ddf63b3 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-05T12:55:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2003_dis_amamenezes.pdf: 1685855 bytes, checksum: c66ebddb484fc231e473fb9b2ddf63b3 (MD5) Previous issue date: 2003 / Periodontitis, the major cause of teeth loss in adults, is an inflammatory disease in which occurs alveolar bone resorption and collagen fibers destruction. Bacteria and host factors are necessary to the development of this pathology. Bisphosphonates are a new class of drugs that inhibit bone resorbtion by causing morphological alterations or death of osteoclasts. The objetive of this study is to investigate the effect of the bisphosphonate Dissodic Alendronate (DA) in periodontitis, comparing it with the doxicicline (DX), treatment currently used. Periodontitis was induced by a nylon thread ligature surgically placed around the cervix of the second left maxillary molars of female Wistar rats. Animals were treated with DA (0.25 mg/kg, s.c.) 30 minutes before periodontits induction and daily until sacrifice on 11th day (preventive group). Additionally, saline, DA or DX (5 or 10 mg/kg) were injected s.c. from 5th day and daily up to the 11th day of periodontal disease (curative treatment). The parameters analysed were alveolar bone loss (ABL), histopathologic and microbiological analysis, immunohistochemistry, myeloperoxidase (MPO), neutrophil migration, leukogram measured before and after challenge (6h and 1, 7 and 11 days) and body mass variation. AD, as curative or preventive treatment, reduced this alveolar bone loss similar DX. Histopatologically, the periodontium of animals treated with DA showed preservation of alveolar bone, cementum and collagen fibers of periodontal ligament, and reduced neutrophilic and mononuclear cell infiltrate. This effect on neutrophilic infiltrate was confirmed by MPO and in model of peritonitis induced by carrageenan. In imunohistochemistry, there was marked reduction of immunostaining for TNF in the group treated with DA compared to the saline group. In microbiologic analysis, DA inhibited the growth of bacteria involved in periodontitis. DA increased body mass compared to saline group. These results support clinical testing of bisphosphonates in the treatment of periodontal disease. / A periodontite, a principal causa de perda de dentes em adultos, é uma doença inflamatória onde ocorre perda do osso alveolar e destruição das fibras do ligamento periodontal. Tanto as bactérias periodontopatogênicas como os fatores provenientes do hospedeiro são necessários para o desenvolvimento e progressão desta patologia. Os bisfosfonatos constituem uma nova classe de drogas, os quais inibem a reabsorção do osso causando alterações morfológicas ou apoptose nos osteoclastos. O objetivo do presente estudo foi investigar os mecanismos envolvidos no efeito de um bisfosfonato Alendronato Dissódico (AD) na doença periodontal experimental (DPE), comparando seus efeitos com a doxiciclina, tratamento já estabelecido. A DPE foi induzida passando-se fio de náilon 3.0 em torno do segundo molar superior esquerdo de ratos Wistar fêmeas, permanecendo durante 11d. AD (0,25mg/kg, s.c.) foi administrado 30 minutos antes e diariamente (tratamento preventivo) ou AD (0,25mg/kg, s.c.), DX (5 ou 10 mg/kg) ou salina (0,2ml) foram injetados a partir do 5° dia da indução da DPE (tratamento curativo). Os parâmetros avaliados foram: índice de perda óssea (IPO), análise histopatológica e microbiológica, imunohistoquímica, migração de neutrófilos, mieloperoxidase (MPO), leucogramas realizados antes e após a cirurgia (6h e 1, 7 e 11 dias) e variação da massa corpórea. No IPO, AD reduziu consideravelmente a reabsorção óssea tanto de forma preventiva como curativa sendo comparável à doxiciclina. Na análise histopatológica, o periodonto dos animais tratados com AD mostrou preservação do osso alveolar, cemento e das fibras colágenas, além de redução do infiltrado neutrofílico gengival de 6h. Esta inibição da migração neutrofílica foi confirmada através da MPO e em modelo de peritonite abdominal e o leucograma mostrou uma redução da neutrofilia. A imunohistoquímica mostrou que o AD diminuiu a marcação para TNF em 6h e 11d. No microbiológico, AD inibiu qualitativamente o crescimento de bactérias características da DP, tais como pigmentados e Fusobacterium nucleatum. AD promoveu um aumento na massa corpórea em relação ao grupo salina. Esses resultados mostram que o AD possui importante atividade na DPE, sugerindo a relevância de testes clínicos dos bisfosfonatos no tratamento da doença periodontal.

Introdução: Gengivite descamativa (GD) se refere a uma manifestação clínica associada com diversas doenças mucocutâneas. Suas causas mais comuns são penfigóide das membranas mucosas (PMM), pênfigo vulgar (PV) e líquen plano oral (LP). A diagnose específica é melhor estabelecida através de avaliação histopatológica e de imunofluorescência. Objetivos: Examinar casos de gengivite descamativa utilizando microscopia confocal a laser e comparar os achados com aqueles encontrados na gengiva normal. Além disso, comparar os achados de microscopia confocal da gengivite descamativa com os da histopatologia convencional das lesões biopsiadas a fim de estabelecer critérios para este método diagnóstico não invasivo. Método: Doentes com manifestações clínicas de gengivite descamativa foram incluídos, totalizando quarenta e três casos. A microscopia confocal foi realizada na gengiva de um indivíduo saudável e nas lesões gengivais. Todas as lesões sem exame histopatológico prévio foram biopsiadas a fim de permitir uma correlação entre a microscopia confocal e a histopatologia. Resultados: O exame de microscopia confocal das lesões suspeitas de penfigóide das membranas mucosas revelou uma separação ao nível da junção dermo-epidérmica, preenchida por pequenas estruturas brilhantes, interpretadas como hemáceas. Os aspectos histopatológicos e de imunofluorescência confirmaram o diagnose. Para os casos de pênfigo vulgar, os achados da microscopia confocal foram de fenda intraepitelial com células arredondadas interpretadas como queratinócitos acantolíticos. Hiperqueratose e espongiose, associadas com infiltrado inflamatório, caracterizado por células pequenas e brilhantes permeando a estrutura intraepitelial de queratinócitos conhecida como favo de mel foram vistos no líquen plano. Estruturas arredondadas pouco brilhantes, interpretadas como queratinócitos necróticos, e estruturas estelares também pouco brilhantes, interpretadas como melanófagos, foram encontrados na derme. Conclusões: Propõe-se o uso da microscopia confocal como uma ferramenta adicional no diagnose e avaliação da gengivite descamativa / Background: Desquamative gingivitis refers to a clinical manifestation associated with several mucocutaneous disorders. The most common are mucous membrane pemphigoid, pemphigus vulgaris and lichen planus. Their specific diagnosis is better established by histopathological and immunofluorescence evaluation. Objective: To examine cases of desquamative gingivitis using reflectance confocal microscopy and compare the findings with those of normal gingiva. Moreover, confocal microscopy findings in desquamative gingivitis were compared to conventional histopathology of the biopsied lesions, in order to establish criteria for this non-invasive diagnostic technique. Methods: Patients with clinical manifestations of desquamative gingivitis were included, totalizing forty-three cases. Reflectance confocal microscopy was performed the gingival of a healthy person and on gingival lesions. All lesions were biopsied in order to perform a reflectance confocal microscopy- histopathologic correlation. Results: Reflectance confocal microscopy exam of the gingival lesions suspected of mucous membrane pemphigoid revealed a separation at the level of dermal-epidermal junction, filled with small bright structures interpreted as blood cells. Histopathological and immunofluorescence aspects confirmed the diagnosis. For pemphigus vulgaris, reflectance confocal microscopy aspects were of intraepithelial cleft with round detached cells interpreted as acantholytic keratinocytes, similar to the histopathological features. Hyperkeratosis and spongiosis associated with infiltration of inflammatory cells, recognized as small bright cells intermingling the honeycomb keratinocyte epithelial structure, were seen in lichen planus. Mild bright round structures interpreted as necrotic keratinocytes and mild bright stellate structures, interpreted as melanophages in the dermis were also seen. These features were present in histopathology, confirming the diagnosis of lichen planus. Conclusion: We propose the use of reflectance confocal microscopy as an additional tool in diagnosis and evaluation of desquamative gingivitis

A Diabetes mellitus do tipo I (IDDM), doença metabólica caracterizada pela deficiência na produção de insulina, causa profundas alterações sistêmicas, incluindo a cavidade bucal. A doença periodontal, que se apresenta mais agressiva em pacientes diabéticos, até mesmo na infância, tem como agentes etiológicos microrganismos denominados periodontopatógenos, dentre eles o Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A. actinomycetemcomitans), anteriormente chamado Actinobacillus actinomycetemcomitans, que em associação às alterações na resposta imune e inflamatória decorrentes da diabetes, poderá causar maior reabsorção do osso alveolar precocemente em crianças. A identificação precoce destes agressores poderá ser extremamente útil para a instituição de medidas preventivas e terapêuticas que possam inibir ou minimizar os efeitos nocivos da IDDM e suas conseqüências para a cavidade bucal. Para este fim, métodos moleculares de investigação estão sendo cada vez mais utilizados, destacando-se a Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (Real-Time PCR) com alta especificidade e sensibilidade para detectar e quantificar microrganismos, mesmo em pequeno número e em meios, até então, pouco explorados como a saliva. Por fim, a utilização de um antimicrobiano seguro, que possa ser aplicado topicamente por meio da escovação dentária, como o metronidazol 25% na forma de gel, poderia reduzir ou eliminar o A. actinomycetemcomitans evitando a progressão da doença periodontal. Assim, este estudo foi realizado para observar a presença do A. actinomycetemcomitans antes e após o uso do gel de metronidazol 25% uma vez ao dia, em substituição a uma das escovações diárias. Avaliou também a influência deste protocolo de tratamento nos índices de placa, gengival e profundidade de sondagem em 32 crianças, na faixa etária de 3 a 12 anos de idade, divididas em dois grupos: diabéticos tipo I (D) e não diabéticos (ND). Para avaliação da presença do A. actinomycetemcomitans foi utilizado o método da Real-Time PCR. Os resultados obtidos sugerem que o gel de metronidazol 25%, aplicado segundo o protocolo estabelecido neste trabalho foi efetivo para a redução dos índices de placa, gengival e do A. actinomycetemcomitans, no entanto, pareceu não atuar sobre a profundidade de sondagem. Os dados obtidos sugerem que, ainda que a ocorrência da bactéria nos indivíduos avaliados tenha sido baixa e a diferença entre o grupo diabéticos e não diabéticos tenha restringido-se apenas à profundidade de sondagem, o gel estudado demonstrou ser promissor na prevenção da doença periodontal em crianças diabéticas, havendo necessidade da realização de mais estudos clínicos randomizados. / Type I Diabetes mellitus (IDDM) is a metabolic disease characterized by deficiency on the insulin production, causing great systemic alterations, including at the oral cavity. Periodontal disease is more aggressive in diabetic patients, even during the childhood, and presents as etiological microorganisms the Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A. actinomycetemcomitans), formerly Actinobacillus actinomycetemcomitans. This microorganisms in association to alterations in the immune and inflammatory answers caused by diabetes, can promote a larger and early alveolar bone resorption even in children. So, the early identification of these aggressors could be extremely useful for the institution of preventive and therapeutic measures in order to inhibit or minimize the noxious effects of IDDM and their consequences in the oral cavity. Aiming this early identification, molecular biology methods of investigation are being used more frequently, pointing out the Real Time Polymerase Chain Reaction (Real-Time PCR), which presents high specificity and sensibility to detect and to quantify microorganisms, even in small number and in different media little explored like saliva. The use of a safe topical antibiotic, such as metronidazole 25% gel, which used in association with dental brushing, could reduce or eliminate A. actinomycetemcomitans, avoiding the progression of the periodontal disease. This study evaluated the presence of A. actinomycetemcomitans before and after the use of metronidazole 25% gel once a day, in substitution to one of the daily teeth brushing. It also evaluated the influence of this treatment protocol on the plaque, gingival and probing depth indexes. Thirty-two children, aging from 3 to 12 years were included in this study and they were divided into two groups: type I diabetic (D) and no diabetic (ND). Real-Time PCR methods were used to evaluate the presence of A. actinomycetemcomitans. The obtained data suggest that metronidazole 25% gel, applied according to the established protocol in this study, effectively reduced plaque and gingival indexes and the number of A. actinomycetemcomitans. However, no influence was observed regarding the probing depth. The obtained data suggest that, although the number of bacteria has been small and the difference between the D and ND groups was not observed only regarding probing depth, the studied antibiotic gel demonstrated to be promising in preventing periodontal disease in diabetic children. More randomized clinical trials are necessary for a final conclusion.

Introdução: Gengivite descamativa (GD) se refere a uma manifestação clínica associada com diversas doenças mucocutâneas. Suas causas mais comuns são penfigóide das membranas mucosas (PMM), pênfigo vulgar (PV) e líquen plano oral (LP). A diagnose específica é melhor estabelecida através de avaliação histopatológica e de imunofluorescência. Objetivos: Examinar casos de gengivite descamativa utilizando microscopia confocal a laser e comparar os achados com aqueles encontrados na gengiva normal. Além disso, comparar os achados de microscopia confocal da gengivite descamativa com os da histopatologia convencional das lesões biopsiadas a fim de estabelecer critérios para este método diagnóstico não invasivo. Método: Doentes com manifestações clínicas de gengivite descamativa foram incluídos, totalizando quarenta e três casos. A microscopia confocal foi realizada na gengiva de um indivíduo saudável e nas lesões gengivais. Todas as lesões sem exame histopatológico prévio foram biopsiadas a fim de permitir uma correlação entre a microscopia confocal e a histopatologia. Resultados: O exame de microscopia confocal das lesões suspeitas de penfigóide das membranas mucosas revelou uma separação ao nível da junção dermo-epidérmica, preenchida por pequenas estruturas brilhantes, interpretadas como hemáceas. Os aspectos histopatológicos e de imunofluorescência confirmaram o diagnose. Para os casos de pênfigo vulgar, os achados da microscopia confocal foram de fenda intraepitelial com células arredondadas interpretadas como queratinócitos acantolíticos. Hiperqueratose e espongiose, associadas com infiltrado inflamatório, caracterizado por células pequenas e brilhantes permeando a estrutura intraepitelial de queratinócitos conhecida como favo de mel foram vistos no líquen plano. Estruturas arredondadas pouco brilhantes, interpretadas como queratinócitos necróticos, e estruturas estelares também pouco brilhantes, interpretadas como melanófagos, foram encontrados na derme. Conclusões: Propõe-se o uso da microscopia confocal como uma ferramenta adicional no diagnose e avaliação da gengivite descamativa / Background: Desquamative gingivitis refers to a clinical manifestation associated with several mucocutaneous disorders. The most common are mucous membrane pemphigoid, pemphigus vulgaris and lichen planus. Their specific diagnosis is better established by histopathological and immunofluorescence evaluation. Objective: To examine cases of desquamative gingivitis using reflectance confocal microscopy and compare the findings with those of normal gingiva. Moreover, confocal microscopy findings in desquamative gingivitis were compared to conventional histopathology of the biopsied lesions, in order to establish criteria for this non-invasive diagnostic technique. Methods: Patients with clinical manifestations of desquamative gingivitis were included, totalizing forty-three cases. Reflectance confocal microscopy was performed the gingival of a healthy person and on gingival lesions. All lesions were biopsied in order to perform a reflectance confocal microscopy- histopathologic correlation. Results: Reflectance confocal microscopy exam of the gingival lesions suspected of mucous membrane pemphigoid revealed a separation at the level of dermal-epidermal junction, filled with small bright structures interpreted as blood cells. Histopathological and immunofluorescence aspects confirmed the diagnosis. For pemphigus vulgaris, reflectance confocal microscopy aspects were of intraepithelial cleft with round detached cells interpreted as acantholytic keratinocytes, similar to the histopathological features. Hyperkeratosis and spongiosis associated with infiltration of inflammatory cells, recognized as small bright cells intermingling the honeycomb keratinocyte epithelial structure, were seen in lichen planus. Mild bright round structures interpreted as necrotic keratinocytes and mild bright stellate structures, interpreted as melanophages in the dermis were also seen. These features were present in histopathology, confirming the diagnosis of lichen planus. Conclusion: We propose the use of reflectance confocal microscopy as an additional tool in diagnosis and evaluation of desquamative gingivitis

A Diabetes mellitus do tipo I (IDDM), doença metabólica caracterizada pela deficiência na produção de insulina, causa profundas alterações sistêmicas, incluindo a cavidade bucal. A doença periodontal, que se apresenta mais agressiva em pacientes diabéticos, até mesmo na infância, tem como agentes etiológicos microrganismos denominados periodontopatógenos, dentre eles o Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A. actinomycetemcomitans), anteriormente chamado Actinobacillus actinomycetemcomitans, que em associação às alterações na resposta imune e inflamatória decorrentes da diabetes, poderá causar maior reabsorção do osso alveolar precocemente em crianças. A identificação precoce destes agressores poderá ser extremamente útil para a instituição de medidas preventivas e terapêuticas que possam inibir ou minimizar os efeitos nocivos da IDDM e suas conseqüências para a cavidade bucal. Para este fim, métodos moleculares de investigação estão sendo cada vez mais utilizados, destacando-se a Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (Real-Time PCR) com alta especificidade e sensibilidade para detectar e quantificar microrganismos, mesmo em pequeno número e em meios, até então, pouco explorados como a saliva. Por fim, a utilização de um antimicrobiano seguro, que possa ser aplicado topicamente por meio da escovação dentária, como o metronidazol 25% na forma de gel, poderia reduzir ou eliminar o A. actinomycetemcomitans evitando a progressão da doença periodontal. Assim, este estudo foi realizado para observar a presença do A. actinomycetemcomitans antes e após o uso do gel de metronidazol 25% uma vez ao dia, em substituição a uma das escovações diárias. Avaliou também a influência deste protocolo de tratamento nos índices de placa, gengival e profundidade de sondagem em 32 crianças, na faixa etária de 3 a 12 anos de idade, divididas em dois grupos: diabéticos tipo I (D) e não diabéticos (ND). Para avaliação da presença do A. actinomycetemcomitans foi utilizado o método da Real-Time PCR. Os resultados obtidos sugerem que o gel de metronidazol 25%, aplicado segundo o protocolo estabelecido neste trabalho foi efetivo para a redução dos índices de placa, gengival e do A. actinomycetemcomitans, no entanto, pareceu não atuar sobre a profundidade de sondagem. Os dados obtidos sugerem que, ainda que a ocorrência da bactéria nos indivíduos avaliados tenha sido baixa e a diferença entre o grupo diabéticos e não diabéticos tenha restringido-se apenas à profundidade de sondagem, o gel estudado demonstrou ser promissor na prevenção da doença periodontal em crianças diabéticas, havendo necessidade da realização de mais estudos clínicos randomizados. / Type I Diabetes mellitus (IDDM) is a metabolic disease characterized by deficiency on the insulin production, causing great systemic alterations, including at the oral cavity. Periodontal disease is more aggressive in diabetic patients, even during the childhood, and presents as etiological microorganisms the Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A. actinomycetemcomitans), formerly Actinobacillus actinomycetemcomitans. This microorganisms in association to alterations in the immune and inflammatory answers caused by diabetes, can promote a larger and early alveolar bone resorption even in children. So, the early identification of these aggressors could be extremely useful for the institution of preventive and therapeutic measures in order to inhibit or minimize the noxious effects of IDDM and their consequences in the oral cavity. Aiming this early identification, molecular biology methods of investigation are being used more frequently, pointing out the Real Time Polymerase Chain Reaction (Real-Time PCR), which presents high specificity and sensibility to detect and to quantify microorganisms, even in small number and in different media little explored like saliva. The use of a safe topical antibiotic, such as metronidazole 25% gel, which used in association with dental brushing, could reduce or eliminate A. actinomycetemcomitans, avoiding the progression of the periodontal disease. This study evaluated the presence of A. actinomycetemcomitans before and after the use of metronidazole 25% gel once a day, in substitution to one of the daily teeth brushing. It also evaluated the influence of this treatment protocol on the plaque, gingival and probing depth indexes. Thirty-two children, aging from 3 to 12 years were included in this study and they were divided into two groups: type I diabetic (D) and no diabetic (ND). Real-Time PCR methods were used to evaluate the presence of A. actinomycetemcomitans. The obtained data suggest that metronidazole 25% gel, applied according to the established protocol in this study, effectively reduced plaque and gingival indexes and the number of A. actinomycetemcomitans. However, no influence was observed regarding the probing depth. The obtained data suggest that, although the number of bacteria has been small and the difference between the D and ND groups was not observed only regarding probing depth, the studied antibiotic gel demonstrated to be promising in preventing periodontal disease in diabetic children. More randomized clinical trials are necessary for a final conclusion.