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Clonagem molecular de genes de Palythoa caribaeorum (Duchassaing & Michelotti, 1860) relacionados à imunidade inataMELO, Liany Figueredo de Andrade 31 January 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Na ausência de um sistema imune adaptativo propriamente dito, os cnidários se
valem de uma série de mecanismos bioquímicos e celulares que coletivamente
compreendem sistemas da imunidade inata e são utilizados para o reconhecimento
de micro-organismos, tanto parasitas quanto simbiontes. O objetivo do presente
trabalho foi investigar se precursores gênicos relacionados a três polipeptídios
envolvidos na resposta inata (CTL: lectina do tipo C, MBL: lectina ligante de manose
e C3: componente 3 do sistema complemento) seriam expressos em Palythoa
caribaeorum. Tendo como base dados moleculares descritos na literatura para os
cnidários Nematostella vectensis, Pocillopora damicornis, Acropora millepora e
Swiftia exserta, foram utilizadas duas estratégias metodológicas distintas para
responder tal proposição: (1) síntese direta de cDNA a partir do RNAm e
amplificação dos homólogos por RT-PCR e (2) construção de uma biblioteca de
cDNA para propagação e resgate dos precursores completos (full length cDNAs). Ao
todo, foram obtidos 11 produtos de RT-PCR (cDNAs amplificados), dos quais um se
refere a um segmento similar a um domínio do receptor de imunoglobulinas das
células NK (KIR), encontrado em gorilas. A presença de um domínio semelhante a
KIR em P. caribaeorum sugeriria a existência de formas alternativas de imunidade
antecipatória em cnidários. Tão importante quanto esse achado foi a obtenção de
amplicons de CTL. Dessa forma, os níveis de expressão de transcritos de CTL foram
comparados entre colônias sadias e doentes (em processo de branqueamento) de P.
caribaeorum. Os resultados para o ensaio de expressão diferencial mostraram que a
CTL teve uma expressão aumentada entre 63,2 e 65,5% nas colônias branqueadas,
o que sugere um possível papel na resposta ao branqueamento, uma vez que essas
moléculas participam do processo de reconhecimento celular. Esse resultado pode
ser interpretado de duas formas: o aumento na transcrição de CTL após o
branqueamento seria uma tentativa de proteção imediata contra patógenos ou
estaria envolvido no recrutamento de novos simbiontes. Como um todo, o estudo de
moléculas polipeptídicas da imunidade de cnidários é de importância considerável.
Não somente fornece dados sobre a ancestralidade e evolução das reações imunes,
mas também serve de base para uma série de aplicações de caráter científico e
biotecnológico, que vão desde o monitoramento e conservação de espécies
marinhas até estudos voltados ao tratamento e cura de doenças que acometem
vertebrados superiores
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