ALMEIDA, J. G. L. Constituintes Químicos dos Zoantídeos Palythoa caribaeorum (Duchassaing & Michelotti, 1860) e Protopalythoa Variabilis (Duerden, 1898). 2011. 218 f. Tese (Doutorado em Química) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2011. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2014-11-17T19:21:17Z No. of bitstreams: 1 2011_tese_jglalmeida.pdf: 21887790 bytes, checksum: fa43b8669c440a1a4d888d165e1681f2 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2016-03-22T15:49:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_tese_jglalmeida.pdf: 21887790 bytes, checksum: fa43b8669c440a1a4d888d165e1681f2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-22T15:49:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_tese_jglalmeida.pdf: 21887790 bytes, checksum: fa43b8669c440a1a4d888d165e1681f2 (MD5) Previous issue date: 2011 / This work describes the chemical composition of the marine species Palythoa caribaeorum and Protopalythoa variabilis, both collected at Paracuru beach, state of Ceará. The cromatographic fractionation of the hexane extract from P. caribaeorum resulted in the isolation of four tetracyclic sterols possessing the ergostan skeleton: 24(R)-ergost-5-en-3b-ol (P-1); 5 a,8a-epidioxy-24(R)-ergost-6-en-3b-ol (P-2); 24(R)- ergost-5-en-3b,7a-diol (P-4) and 24(R)-7a-hydroperoxy-ergost-5-en-3b-ol (P-7), a glycerol derivative, 1-O-hexadecylglycerol (P-3) and four ceramides: N- (2S,3R,4E,8E,1,3-dihydroxy-4,8-octadecadienyl)hexadecanamide (P-5); N- (2S,3R,4E,1,3-dihydroxy-4-octadecenyl)hexadecanamide (P-6); N-[2S,3R,4E,8E,1-(2”- methylamino-ethanosulfonyl)-3-hydroxy-4,8-octadecaenyl]hexadecanamide (P-8) and N-[2S,3R,4E,1-(2”-methylaminoethano-sulfonyl)-3-hydroxy-4-octadecenyl]hexadecanamide (P-9). The cromatographic fractionation of the ethanol extract permited the isolation of a steroid, 24(R)-ergost-7-en-3b,5a,6b-triol (P-10) and a nucleoside 2- methyltimidine (P-11). Column chromatography of the hexane extract of P. variabilis led to the isolation of nonyl hexadecanoate (P-12), the sterol 24(R)-B-norergostan-3b- 5b-diol-6b-carboxylic acid (P-13) and the same chemical constituents previously isolated from P. caribaeorum (P-1, P-2, P-3 e P-4) including the four ceramides (P-5, P-6, P-8 e P-9). The citotoxic and antifungal properties of all ceramides were evaluated, nevertheless none of them showed any activity. All compounds were isolated through adsorption column cromatography over silica gel followed by high performance liquid chromatography. The structures of the isolated compounds were elucidated using spectrometric techniques, such as: GC/MS, HRESIMS, IR and NMR (1H, 13C and 15N) through 1D and 2D pulse sequences and, whenever the case, comparison with literature data / Este trabalho descreve a composição química das espécies marinha Palythoa caribaeorum e Protopalythoa variabilis, coletadas no município de Paracuru-CE. O fracionamento cromatográfico do extrato hexânico de P. caribaeorum, resultou no isolamento de quatro esteróides tetracíclico de esqueleto ergostano: 24(R)-ergost-5-en-3-ol (P-1); 5,8-epidioxi-24(R)-ergost-6-en-3-ol (P-2); 24(R)-ergost-5-en-3,7-diol (P-4) e 24(R)-7-hidroperoxi-ergost-5-en-3-ol (P-7), um derivado do glicerol, 1-O-hexadecilglicerol (P-3) e quatro ceramidas: N-(2S,3R,4E,8E,1,3-dihidroxi-4,8-octadecadieno)hexadecanamida (P-5); N-(2S,3R,4E,1,3-dihidroxi-4-octadeceno)-hexadecanamida (P-6), N-[2S,3R,4E,8E,1-(2”-metilamino-etanosulfonila)-3-hidroxi-4,8-octadeca¬dieno]hexadecanamida (P-8) e N-[2S,3R,4E,1-(2”-metilaminoetano-sulfonila)-3-hidroxi-4-octadeceno]hexadecanamida (P-9). Do fracionamento cromatográfico do extrato etanólico, foi possível isolar o esteróide 24(R)-ergost-7-en-3,56-triol (P-10) e o nucleosídeo 2-metil-timidina (P-11). Do estudo químico do extrato hexânico de P. variabilis obteve-se os mesmos constituintes químicos isolados de P. caribaeorum (P-1, P-2, P-3 e P-4) e as quatro ceramidas (P-5, P-6, P-8 e P-9). Além destes compostos foi isolado um éster de cadeia alifática, hexadecanoato de nonila (P-12) e o esteróide ácido 24(R)-B-norergostan-3-5-diol-6-carboxílico (P-13). O potencial citotóxico e antifúngico das ceramidas foi avaliado, entretanto, estas não apresentaram atividade. Os compostos foram isolados através de cromatografia de adsorção em gel de sílica e cromatografia líquida de alta eficiência. As estruturas dos compostos obtidos foram elucidadas utilizando técnicas espectroscópicas e espectrométricas, tais como: espectrometria de massa acoplada a cromatografia gasosa (CG/EM); espectrometria de massa de alta resolução (EMAR); espectroscopia na região do infravermelho (IV) e Ressonância Magnética Nuclear (RMN 1H, 13C e 15N) através de sequências de pulsos uni e bidimensionais e comparação com dados de RMN na literatura.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:07:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3008_1.pdf: 2118312 bytes, checksum: b78da92894d4b94e6a02c39c3fdb694b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Palythoa caribaeorum é um cnidário colonial, abundante no litoral pernambucano. Durante a maré baixa produz um muco que protege contra a dessecação. Embora seja conhecida a composição básica deste muco, nenhuma proteína até hoje foi isolada e caracterizada. Desta forma, este trabalho se propôs a desenvolver uma metodologia de processamento e purificação que permitisse a obtenção de uma amostra com relevante conteúdo protéico, baixa viscosidade e alta solubilidade, a qual fosse possível a sua aplicação em colunas cromatográficas comerciais, além de testar atividade farmacológica. Para isto, amostras foram coletadas nos meses de Março/09, Janeiro e Maio/10 na praia de Porto de Galinhas-PE. Mar/09 e Jan/10 foram submetidas à homogeneização mecânica enquanto Mai/10 passou por uma liquidificação. Após centrifugação, o sobrenadante de Jan/10 (Jan/10B) passou por uma diluição nas proporções 1/6 e 1/12. Mai/10 foi submetido à diluição 1/3 logo após liquidificação. Jan/10B e Jan/101/12 passaram ainda por tratamento químico com uréia 6M e ácido acético 1%, e éter/etanol e clorofórmio/metanol, respectivamente. Por último, alíquotas de Mar/09B, Jan/10B e Mai/101/3, foram submetidas à precipitação protéica com sulfato de amônio. As frações obtidas em todos os procedimentos foram dialisadas. Em seguida, foram realizadas dosagem protéica, atividade hemaglutinante, eletroforeses, cromatografias, além de inibição das atividades hemaglutinante e hemorrágica. Os resultados mostraram que a metodologia mais eficaz na preparação da amostra foi a liquidificação seguida de diluição 1/3 e precipitação protéica em faixas curtas de concentração de sal. A partir da fração F3-Mai/101/3, obtida por esta metodologia, uma lectina de 34 KDa (PcmL- 1) foi parcialmente purificada, através de uma cromatografia de afinidade em coluna Con A Sepharose 4B, seguida de cromatografia de troca aniônica em coluna Resource Q. Além disso, o muco de P. caribaeorum mostrou ser uma fonte importante de lectinas xilose e lactose-específicas, e possíveis inibidores de proteases

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:05:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1779_1.pdf: 876156 bytes, checksum: f3c6cd964187f49184b543389ec67cfd (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / O presente estudo analisa a capacidade da espécie de zoantídeo, Palythoa caribaeorum de acumular metais pesados. Além disso, comparou-se as concentrações dos metais encontrados em colônias distribuídas em setores diferentes de um mesmo recife e em partes diferentes de uma mesma colônia. Somado a isso, verificou-se as relações entre a distribuição do zoantídeo, a morfometria e os metais pesados. O estudo foi realizado no período seco e chuvoso, entre os anos de 2005 e 2006, nos recifes de arenito da praia de Suape, PE, Brasil. Como área controle utilizou-se a praia da Gamela, distante 50km do ponto de estudo. Foram aplicados teste-t e Kruskal-Wallis aos resultados encontrados, utilizando-se como variáveis a concentração de metais no tecido do P. caribaeorum, no sedimento e na alga Padina gymnospora. Para a morfometria as variáveis foram o diâmetro e a altura dos pólipos. Para o estudo da distribuição e abundância foi proposta uma metodologia de transectos, a Espinha-de-peixe, que conjuga metodologias padrões de ambientes recifais. Os resultados mostraram que o zoantídeo apresenta uma baixa abundância, em relação ao que era esperado, nos recifes estudados, com distribuição concentrada no setor externo do recife na praia da Gamela e no setor interno nos recifes de Suape. Além de sugerir que P. caribaeorum não seria um bom bioacumulador de metais pesados. Contudo, o metal níquel obteve uma maior concentração no zoantídeo do que no sedimento e na alga. Em relação à distribuição e a morfometria do zoantídeo, não foi evidenciada nenhuma influência dos metais. Os resultados das medições morfométricas demostraram uma sazonalidade entre os diâmetros da parte interna e externa e na altura dos pólipos externos e internos, que pode ser explicada pela biologia reprodutiva do animal

Submitted by Nathália Neves (nathalia.neves@ufpe.br) on 2015-03-04T18:40:35Z No. of bitstreams: 2 soraia_lins_definitivo.pdf: 1705893 bytes, checksum: 95a7ad9f3f3ee3312d93718df29bfa28 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-04T18:40:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 soraia_lins_definitivo.pdf: 1705893 bytes, checksum: 95a7ad9f3f3ee3312d93718df29bfa28 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / Palythoa caribaerum é um zoantídeo abundante no litoral pernambucano que produz um muco, popularmente conhecido como “baba-de-boi”, capaz de proteger a colônia da dessecação. Estudos demonstram relevante ação microbiológica, hemaglutinantes e importante ação inibitória da hemorragia induzida por peçonhas de jararacas. Ademais, relatos populares descrevem a sua ação cicatrizante. Desta maneira, este trabalho visa avaliar a ação cicatrizante de extratos orgânicos do muco produzido pelo zoantídeo Palythoa Caribaeorum em ratos Wistar e investigar os componentes destes extratos através de uma abordagem fitoquímica. Para tal proposta o muco foi coletado na Praia de Suape localizada no litoral sul do estado de Pernambuco. As amostras foram concentradas por centrifugações e liofilizadas. Para os estudos fitoquímicos, o liófilo foi submetido à extração em metanol, n-butanol, acetato de etila e água e em seguida analisado por cromatografia em camada delgada. Para os ensaios de cicatrização, o material liofilizado foi submetido à extração a frio em etanol (85%) e em seguida o extrato foi incorporado em formulações semi-sólidas tipo gel de Natrosol®. O tratamento tópico foi realizado diariamente após o procedimento cirúrgico utilizando 0.04g de extrato/1g de gel e as áreas das lesões foram aferidas com um paquímetro digital. Em tempos pré-determinados (3, 7 e 14 dias) os animais foram sacrificados, as áreas das lesões removidas, fixadas e processadas para análises histológicas. Os resultados evidenciaram que a cada 1g/ml de amostra bruta liofilizada, havia uma concentração de proteínas totais de 1,857 ± 0,05 mg/ml no liofilizado, 0,493 ± 0,004 mg/ml no extrato etanólico, 1,074 mg/ml ± 0,013 mg/ml no extrato aquoso metanólico, 0,982 ± 0,027 mg/ml no extrato aquoso final e 0,718 ± 0,026 mg/ml no extrato metanólico. Após estudo fitoquímico foi observada a presença de terpeno no extrato acetato etílico e uma marcante presença de açúcares redutores nos extratos aquosos, metanólico, n-butanólico e etanólico. Os resultados demonstraram negativos para proantocianidinas, flavonoides e ácido gálico. O estudo de reparo tecidual com formulações semi-sólidas contendo extrato etanólico revelou a presença de crosta, aumento da proliferação fibroblástica e vascular, além de evidente reepitelização e colagenização ao longo do tratamento. Assim, o extrato do muco do Palythoa caribaeorum demonstrou ser capaz de auxiliar o reparo tecidual em feridas cutâneas aberta em ratos Wistar.

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-06-18T22:46:41Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Marllyn Marques da Siva.pdf: 1125204 bytes, checksum: 8adc21c7a6bdd24a47ad79cddb6ac06a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-18T22:46:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Marllyn Marques da Siva.pdf: 1125204 bytes, checksum: 8adc21c7a6bdd24a47ad79cddb6ac06a (MD5) Previous issue date: 2016-03-28 / FACEPE / O ecossistema marinho é capaz de proporcionar uma enorme diversidade de biomoléculas com potencial terapêutico. Neste ambiente altamente competitivo, os organismos precisam de barreiras químicas para se proteger reduzindo ou evitando contaminação por microrganismos. O Palythoa caribaeorum é um zoantídeo (Cnidário) que produz um muco, conhecido popularmente como baba de boi, cuja principal função é proteger a colônia contra dessecação e patógenos. O muco ainda é pouco conhecido quanto as suas propriedades físico-químicas e biológicas. Esse fato vem despertando o interesse por estudos que desvendem suas propriedades biológicas, bem como identifique a sua composição. Diante do exposto, o presente estudo teve como objetivo avaliar as propriedades biológicas do muco e determinar seu perfil proteomico. Para tal, as atividades biológicas foram testadas contra as linhagens de células S-180, Hela, MCF7, fibroblastos e J774 (macrófagos) através do método MTT. Ainda, a citotoxicidade do muco também foi avaliada em hemácias humanas e a sua capacidade antioxidante testada. O perfil proteomico foi determinado pela eletroforese 2-DE seguido da espectrometria de massa (MALDITOF). Os resultados demonstraram que o muco não exibiu ação citotóxica contra as células testadas, mas o extrato proteico apresentou viabilidade abaixo de 50 % nas linhagens de MCF-7 e S-180. A linhagem celular J774 tratada com o extrato proteico apresentou IC50 de 6,9 μg/mL. Entretanto, no tratamento de fibroblastos com o extrato proteico (6,25 μg/mL) foi visualizado crescimento celular. Na avaliação antimicrobiana o extrato proteico apresentou CMI de 250 μg/mL para Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus e Staphylococcus epidermidis. O muco não apresentou atividade hemolítica e foi capaz de reduzir em 50 % do radical ABTS. O estudo proteomico pela eletroforese 2-DE, mostrou a presença de 76 spots, dos quais 14 foram identificados pela MALDI-TOF. São estas, “glutamyltRNA synthetase”, “Hypothetical protein PFICI_09699” e “Hypothetical protein NECAME_18605”, “Proteasome subunit aloha type-1”, “PAS domain S-box protein, parcial”, “Uroporphyrinogen-III synthase”, “Beta-2-microglobulin”, “Zinc metalloproteinase-disintegrin-like”, “mitochondrial import inner membrane tranlocase subunit Tim 10”, “deoxynucleoside triphosphate triphosphohydrolase SAMHD1-LIKE isoform X2”, “Zinc Finger Protein 654”, “Deleted in malignant brain tumors 1 proteinlike”, LIN-52. “Killer protein”. Desse modo, conclui-se que o extrato proteico apresentou proteínas com potencial ação antibiótica, cicatrizante e antitumoral. Portanto, o muco produzido pelo P. caribaeorum se apresenta como uma fonte rica em matéria-prima para isolamento de moléculas com importante potencial biotecnológico e farmacêutico. / The marine ecosystem is capable of providing a diversity of biomolecules that can be used for the treatment of diseases. In this highly competitive environment, organizations need chemical barriers to protect reducing or avoiding contamination by microorganisms. The Palythoa caribaeorum is a zoanthid (Cnidarian) that produces mucus, popularly known as baba ox, has main function to protect the colony against desiccation and against pathogens. Mucus is still unknown as their physicochemical and biological properties. Its features proposes a relevant study its biological properties as well as the isolation of substances. The purpose of this study was to evaluate the antimicrobial and cytotoxic activity of mucus and its protein extract against tumor cell lines such as S-180, Hela, MCF7, Fibroblasts and J774 (macrophages) using the MTT method. The cytotoxicity of mucus was also evaluated in human red blood cells and also for antioxidant capacity. Mucus showed no cytotoxic activity against the tested cells, but the protein extract showed viability below 50% in lines MCF-7 and S-180. The J774 strain treated with the protein extract showed IC50 of 6.9 µg/mL. For fibroblast cells or mucus or the protein extract showed cytotoxicity, noting that the protein extract showed an increase of cells in 6.25 µg / ml. The protein extract showed MIC of 250 µg/mL for Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis. Mucus showed no hemolytic activity and was able to reduce by 50% the ABTS radical. The proteomic study by 2-DE electrophoresis showed the presence of spots 76, 14 of which were identified by MALDI-TOF. These, “glutamyl-tRNA synthetase”, “Hypothetical protein PFICI_09699” and “Hypothetical protein NECAME_18605”, “Proteasome subunit aloha type-1”, “PAS domain S-box protein, parcial”, “Uroporphyrinogen-III synthase”, “Beta-2-microglobulin”, “Zinc metalloproteinasedisintegrin-like”, “mitochondrial import inner membrane tranlocase subunit Tim 10”, “deoxynucleoside triphosphate triphosphohydrolase SAMHD1-LIKE isoform X2”, “Zinc Finger Protein 654”, “Deleted in malignant brain tumors 1 protein-like”, LIN-52. “Killer protein”. Thus, it is concluded that the protein extract showed proteins with potential antibiotic action, healing and antitumor. Therefore, the mucus produced by P. caribaeorum presents itself as a rich source of raw material for isolation of molecules with important potential biotech and pharmaceutical.

Submitted by Vasti Diniz (vastijpa@hotmail.com) on 2017-09-06T13:04:06Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1188137 bytes, checksum: 010a2962d49aa738285e5f27b77c15b3 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-06T13:04:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1188137 bytes, checksum: 010a2962d49aa738285e5f27b77c15b3 (MD5) Previous issue date: 2015-08-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The microbial communities play a fundamental role in the health of coral and their changes can lead to the onset of disease. Many diseases affect coral reefs in several parts of the world, however, little is known about the pathogenic agents and the factors that trigger the pathological process. In coastal reefs of Carapibus Beach of Conde (Paraiba state, Brazil), a tissue necrosis affects the zoanthid Palythoa caribaeorum. This study aimed to compare the diversity of culturable bacteria in the samples of healthy and necrotic tissue from the P. caribaeorum colony collected from the Carapibus reefs. The present work aimed also to analyze the production of proteolytic enzymes by isolated bacteria. The density of total heterotrophic bacteria in the necrotic tissue was higher than in healthy tissue of P. caribaeorum. Phylogenetic analysis of isolated bacteria based on the partial 16S rRNA gene sequences revealed that the majority of bacterial strains belonged to the Bacilli class of Firmicutes phylum (65.2%), followed by the Gamma Proteobacteria class (34.7%) of Proteobacteria phylum. The genus Bacillus was dominant among the strains of healthy tissue of P. caribaeroum, while among the bacteria of necrotic tissue the Bacillus and Vibrio were the most abundant. The higher number of strains belonged to the Vibrio genus were found in necrotic tissue (42.1%) in comparison with healthy tissue (9.6%). Among bacteria from healthy tissue were found also Staphylococcus sp. isolate and from necrotic tissue Marinobacter spp. and Alteromonas spp. isolates. Among the isolates from healthy tissue only Bacillus spp. showed proteolytic activity, while proteolytic isolates from necrotic tissue belonged to the genera: Bacillus, Vibrio, Alteromonas and Marinobacter. The data suggest that bacteria of the genus Vibrio and proteolytic bacteria may play a role in the development of tissue necrosis of zoanthid studied. / As comunidades microbianas desempenham um papel fundamental na saúde do coral, e suas alterações podem levar ao aparecimento de doenças. Muitas doenças afetam os corais dos recifes em várias partes do mundo, entretanto pouco se sabe sobre os agentes patogênicos e os fatores que desencadeiam o processo patológico. Nos recifes costeiros da praia de Carapibus, Conde (Paraiba, Brasil), uma doença necrosante afeta o zoantideo Palythoa caribaeorum. Em virtude disso, neste trabalho objetivou-se comparar a diversidade de bactérias cultiváveis nas amostras do tecido sadio e necrosado coletadas da colônia de P. caribaeorum dos recifes de Carapibus. Objetivou-se também analisar a produção de enzimas proteolíticas por bactérias isoladas. A densidade de bactérias heterotróficas totais no tecido necrosado foi maior que no tecido sadio. A análise filogenética dos isolados bacterianos realizada na base das sequencias parciais do gene RNAr 16S revelou que o maior número de isolados de bactérias pertenceram a classe Bacilli do filo Firmicutes (65,2%), seguida pela classe Gama-Proteobacteria (34,7%) do filo Proteobacteria. O gênero Bacillus foi predominante entre os isolados do tecido sadio de P. caribaeroum, enquanto entre as bactérias do tecido necrosado os gêneros Bacillus e Vibrio foram dominantes. Um número maior de isolados pertencentes ao gênero Vibrio foi encontrado no tecido necrosado (42,1%) em relação ao tecido sadio (9,6%) de P. caribaeorum. Foram encontradas também as bactérias Staphylococcus sp. no tecido sadio, Marinobacter spp. e Alteromonas spp. no tecido necrosado. Dentre os isolados do tecido sadio de P. caribaeorum, apenas o gênero Bacillus apresentou a atividade proteolítica, enquanto os isolados proteolíticos do tecido necrosado pertenceram aos gêneros: Bacillus, Vibrio, Alteromonas e Marinobacter. Os dados obtidos sugerem que as bactérias do gênero Vibrio e as bactérias proteolíticas podem desempenhar um papel no desenvolvimento da doença necrosante do zoantídeo estudado.

nÃo hà / Este trabalho descreve a composiÃÃo quÃmica das espÃcies marinha Palythoa caribaeorum e Protopalythoa variabilis, coletadas no municÃpio de Paracuru-CE. O fracionamento cromatogrÃfico do extrato hexÃnico de P. caribaeorum, resultou no isolamento de quatro esterÃides tetracÃclico de esqueleto ergostano: 24(R)-ergost-5-en-3-ol (P-1); 5,8-epidioxi-24(R)-ergost-6-en-3-ol (P-2); 24(R)-ergost-5-en-3,7-diol (P-4) e 24(R)-7-hidroperoxi-ergost-5-en-3-ol (P-7), um derivado do glicerol, 1-O-hexadecilglicerol (P-3) e quatro ceramidas: N-(2S,3R,4E,8E,1,3-dihidroxi-4,8-octadecadieno)hexadecanamida (P-5); N-(2S,3R,4E,1,3-dihidroxi-4-octadeceno)-hexadecanamida (P-6), N-[2S,3R,4E,8E,1-(2â-metilamino-etanosulfonila)-3-hidroxi-4,8-octadecaÂdieno]hexadecanamida (P-8) e N-[2S,3R,4E,1-(2â-metilaminoetano-sulfonila)-3-hidroxi-4-octadeceno]hexadecanamida (P-9). Do fracionamento cromatogrÃfico do extrato etanÃlico, foi possÃvel isolar o esterÃide 24(R)-ergost-7-en-3,56-triol (P-10) e o nucleosÃdeo 2-metil-timidina (P-11). Do estudo quÃmico do extrato hexÃnico de P. variabilis obteve-se os mesmos constituintes quÃmicos isolados de P. caribaeorum (P-1, P-2, P-3 e P-4) e as quatro ceramidas (P-5, P-6, P-8 e P-9). AlÃm destes compostos foi isolado um Ãster de cadeia alifÃtica, hexadecanoato de nonila (P-12) e o esterÃide Ãcido 24(R)-B-norergostan-3-5-diol-6-carboxÃlico (P-13). O potencial citotÃxico e antifÃngico das ceramidas foi avaliado, entretanto, estas nÃo apresentaram atividade. Os compostos foram isolados atravÃs de cromatografia de adsorÃÃo em gel de sÃlica e cromatografia lÃquida de alta eficiÃncia. As estruturas dos compostos obtidos foram elucidadas utilizando tÃcnicas espectroscÃpicas e espectromÃtricas, tais como: espectrometria de massa acoplada a cromatografia gasosa (CG/EM); espectrometria de massa de alta resoluÃÃo (EMAR); espectroscopia na regiÃo do infravermelho (IV) e RessonÃncia MagnÃtica Nuclear (RMN 1H, 13C e 15N) atravÃs de sequÃncias de pulsos uni e bidimensionais e comparaÃÃo com dados de RMN na literatura. / This work describes the chemical composition of the marine species Palythoa caribaeorum and Protopalythoa variabilis, both collected at Paracuru beach, state of CearÃ. The cromatographic fractionation of the hexane extract from P. caribaeorum resulted in the isolation of four tetracyclic sterols possessing the ergostan skeleton: 24(R)-ergost-5-en-3b-ol (P-1); 5 a,8a-epidioxy-24(R)-ergost-6-en-3b-ol (P-2); 24(R)- ergost-5-en-3b,7a-diol (P-4) and 24(R)-7a-hydroperoxy-ergost-5-en-3b-ol (P-7), a glycerol derivative, 1-O-hexadecylglycerol (P-3) and four ceramides: N- (2S,3R,4E,8E,1,3-dihydroxy-4,8-octadecadienyl)hexadecanamide (P-5); N- (2S,3R,4E,1,3-dihydroxy-4-octadecenyl)hexadecanamide (P-6); N-[2S,3R,4E,8E,1-(2â- methylamino-ethanosulfonyl)-3-hydroxy-4,8-octadecaenyl]hexadecanamide (P-8) and N-[2S,3R,4E,1-(2â-methylaminoethano-sulfonyl)-3-hydroxy-4-octadecenyl]hexadecanamide (P-9). The cromatographic fractionation of the ethanol extract permited the isolation of a steroid, 24(R)-ergost-7-en-3b,5a,6b-triol (P-10) and a nucleoside 2- methyltimidine (P-11). Column chromatography of the hexane extract of P. variabilis led to the isolation of nonyl hexadecanoate (P-12), the sterol 24(R)-B-norergostan-3b- 5b-diol-6b-carboxylic acid (P-13) and the same chemical constituents previously isolated from P. caribaeorum (P-1, P-2, P-3 e P-4) including the four ceramides (P-5, P-6, P-8 e P-9). The citotoxic and antifungal properties of all ceramides were evaluated, nevertheless none of them showed any activity. All compounds were isolated through adsorption column cromatography over silica gel followed by high performance liquid chromatography. The structures of the isolated compounds were elucidated using spectrometric techniques, such as: GC/MS, HRESIMS, IR and NMR (1H, 13C and 15N) through 1D and 2D pulse sequences and, whenever the case, comparison with literature data

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:07:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5620_1.pdf: 8916043 bytes, checksum: 669ed68c15dd8910790b9473691f2d57 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Na ausência de um sistema imune adaptativo propriamente dito, os cnidários se valem de uma série de mecanismos bioquímicos e celulares que coletivamente compreendem sistemas da imunidade inata e são utilizados para o reconhecimento de micro-organismos, tanto parasitas quanto simbiontes. O objetivo do presente trabalho foi investigar se precursores gênicos relacionados a três polipeptídios envolvidos na resposta inata (CTL: lectina do tipo C, MBL: lectina ligante de manose e C3: componente 3 do sistema complemento) seriam expressos em Palythoa caribaeorum. Tendo como base dados moleculares descritos na literatura para os cnidários Nematostella vectensis, Pocillopora damicornis, Acropora millepora e Swiftia exserta, foram utilizadas duas estratégias metodológicas distintas para responder tal proposição: (1) síntese direta de cDNA a partir do RNAm e amplificação dos homólogos por RT-PCR e (2) construção de uma biblioteca de cDNA para propagação e resgate dos precursores completos (full length cDNAs). Ao todo, foram obtidos 11 produtos de RT-PCR (cDNAs amplificados), dos quais um se refere a um segmento similar a um domínio do receptor de imunoglobulinas das células NK (KIR), encontrado em gorilas. A presença de um domínio semelhante a KIR em P. caribaeorum sugeriria a existência de formas alternativas de imunidade antecipatória em cnidários. Tão importante quanto esse achado foi a obtenção de amplicons de CTL. Dessa forma, os níveis de expressão de transcritos de CTL foram comparados entre colônias sadias e doentes (em processo de branqueamento) de P. caribaeorum. Os resultados para o ensaio de expressão diferencial mostraram que a CTL teve uma expressão aumentada entre 63,2 e 65,5% nas colônias branqueadas, o que sugere um possível papel na resposta ao branqueamento, uma vez que essas moléculas participam do processo de reconhecimento celular. Esse resultado pode ser interpretado de duas formas: o aumento na transcrição de CTL após o branqueamento seria uma tentativa de proteção imediata contra patógenos ou estaria envolvido no recrutamento de novos simbiontes. Como um todo, o estudo de moléculas polipeptídicas da imunidade de cnidários é de importância considerável. Não somente fornece dados sobre a ancestralidade e evolução das reações imunes, mas também serve de base para uma série de aplicações de caráter científico e biotecnológico, que vão desde o monitoramento e conservação de espécies marinhas até estudos voltados ao tratamento e cura de doenças que acometem vertebrados superiores