Orientador: Marco Antonio Alvarenga / Banca: Cezinande de Meira / Banca: Rubens Paes de Arruda / Resumo: A técnica de transferência de embrião (TE) foi desenvolvida nos anos 70, e vem sendo cada vez mais difundida. A eficiência de um programa de TE será determinada pelos índices de recuperação embrionária e taxa de prenhez. A receptora de embrião consiste no ponto crítico do programa de TE, e a correta seleção deste elo (fundamental) da cadeia é imprescindível para o sucesso da técnica. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do dia do ciclo da receptora sobre as taxas de prenhez pós transferência de embrião; o efeito do tônus e morfoecogenicidade uterina nas taxas de prenhez de receptoras de embrião; relacionar a concentração plasmática de progesterona em éguas candidatas à receptora de embrião classificadas como marginais e aceitáveis e relacionar as concentrações plasmáticas de progesterona em éguas candidatas à receptora de embrião apresentando diferentes tônus e morfoecogenicidade uterina. Éguas receptoras entre os dias 3 a 8 pós ovulação foram utilizadas. A morfoecogenicidade e tônus uterino no dia da TE foram avaliados. O diagnóstico de prenhez foi realizado no dia 15 do embrião. Utilizou-se o Qui-Quadrado para análise das taxas de prenhez nos dias do ciclo, assim como para as taxas de prenhez e características uterinas. Para avaliação do efeito da concentração de progesterona sobre a classificação foi utilizada ANOVA. A comparação das concentrações plasmáticas de progesterona com as características uterinas foi feita utilizando-se o teste t. As taxas de prenhez não foram afetadas pelo dia do ciclo da receptora. As éguas apresentando morfoecogenicidade 1 e 2 tiveram maiores taxas de prenhez do que as éguas com morfoecogenicidade 3, diferindo estatisticamente (p<0,05). As éguas com morfoecogenicidade uterina 4 apresentaram índices de prenhez inferiores estatisticamente aos 3 outros padrões. / Abstract: Embryo transfer (ET) technique was developed in the seventies and nowadays it is spreading consistently. The efficiency on an ET programme is determined by recovery rate and pregnancy rate. The recipient mare is the most important factor in the ET programme, with special emphasis on its selection. The aim of this study was to evaluate the effect of the recipient's day of cycle on pregnancy rate after transfer, the effect of uterine tone and morphoecogenicity in pregnancy rates, relate plasmatic progesterone concentration in candidate recipient mares that were qualified as acceptable or marginal, and to relate plasmatic progesterone concentration to different uterine tone and morphoecogenicity in candidate recipient mares. Recipient mares were used between day 3 and 8 post ovulation. Morphoecogenicity and uterine tone were evaluated on ET day. Pregnancy diagnosis was performed on day 15 of the embryo. Chi square test was used to analyze pregnancy rates on the different days of cycle, and to relate pregnancy rates and uterine characteristics. In order to evaluate progesterone concentration in recipients that were classified as marginal or acceptable, ANOVA was utilized. To compare progesterone concentration and uterine characteristics, t test was performed. Pregnancy rates were not influenced by recipient's day of cycle on ET day. Mares presenting morphoecogenicities 1 and 2 had higher pregnancy rates than mares presenting morphoecogenicity 3, being statistically different (p<0,05). Mares presenting morphoecogenicity 4 had the lowest pregnancy rate, compared to the others. Uterine tone affected pregnancy rate. Mares with uterine tone 1 had higher pregnancy rates than uterine tone 2 and 3. Mares presenting uterine tone 2 had lower pregnancy rate than uterine tone 1, but higher than uterine tone 3 (p<0,05). Average plasmatic progesterone concentration on day 8 post xvi ovulation was higher than on day 4 post ovulation, with p<0,0002. / Mestre

Orientador : José Luiz Moraes Vasconcelos / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar os fatores que afetam as taxas de concepção (TC) de vacas Holandesas em lactação que receberam IA ou TE. O experimento foi conduzido em uma fazenda localizada em Descalvado, SP, Brasil durante os meses de outubro de 2003 a setembro de 2004. As vacas eram ordenhadas 3 vezes ao dia e alimentadas com ração total devidamente balanceada. Vacas ciclando (n=1025) produzindo 33,37,2kg de leite por dia com 162103,7 de DEL receberam PGF2 e foram divididas aleatoriamente em dois grupos: IA ou TE. As vacas que apresentaram estro 48 a 96h após aplicação de PGF2 receberam IA (n=227) 12h após detecção do estro ou TE (n=160) 6 a 8 dias após. Todas as vacas da TE receberam embriões frescos (grau I ou II) de vacas Holandesas não lactantes produzidos in vivo. Analisou-se a produção de leite média de -7 a 14 dias após o cio. A temperatura corporal foi aferida e amostras de sangue foram coletadas para análise da concentração sérica de P4 por radioimunoensaio. O diagnóstico de gestação foi realizado aos 25 e 39 dias por ultra-sonografia. Morte embrionária tardia (MET) foi considerada quando as vacas gestantes no dia 25 estavam vazias no dia 39. As variáveis taxa de ovulação, TC e MET foram analisadas pelo modelo logístico (GLM) com finalidade de verificar a influência das covariáveis na probabilidade de sucesso. Os modelos foram ajustados no software R. A taxa de ovulação foi de 84,8% (328/387) e foi afetada negativamente pelo número de dias em lactação (p=0,05). Não houve diferenças nas TC do grupo TE em relação à qualidade e estágio do embrião, e assincronia entre doadora e receptora. TC no dia 25, das vacas ovuladas foi 37,9% (74/195) para IA e 59,4% (79/133) para TE (p<0,01). Temperatura corporal no dia 7 (T7) influenciou negativamente (p=0,02) a TC nos dois tratamentos. Para avaliação da P4, foram consideradas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objectives of this study were to evaluate factors that could affect conception rates (CR) of AI or ET in lactating Holstein cows. The trial was conducted at a dairy farm in Descalvado, SP, Brazil from October 2003 to September 2004. Cows were milked 3 times a day and fed with TMR composed by corn silage balanced to meet nutritional requirements for lactating dairy cows. Cycling cows (n=1025) producing 33.37.2 kg milk/d with 162.0103.7 DIM received PGF2 injection and were randomly assigned to received AI or ET. Cows detected in heat between 48 and 96 h after PGF2 injection (n=387) received AI (n=227) 12 h after heat detection or ET (n=160) 6 to 8 days later. All cows from ET received in vivo produced fresh embryos (grade I or II) from non lactating Holstein cows. Milk yield for each cow was recorded -7 to 14 d after estrus. Body temperature was recorded and blood samples were collected on days 7 and 14 to analyze serum P4 concentration by radioimmunoassay. Pregnancy diagnosis was performed by ultrasound on day 25 and 39. Embryonic loss (EL) was considered when cows pregnant on day 25 were not on day 39. The variables ovulation rate, conception rate and embryonic loss were analyzed by logistic model (GLM), to evaluate the influence of covariates on probability of success. The models were adjusted in the public software R. Ovulation rate was 84.8% (328/387) and was only negatively affected (p=0.05) by days in milk. There were no differences in probability of CR when stage and grade of embryo and donor-recipient synchrony were analyzed. CR at day 25 of ovulated cows was 37.9% (74/195) for AI and 59.4% (79/133) for ET (p<0.01). Body temperature at day 7 affected negatively (p=0.02) CR in both treatments. To evaluate P4, only cows with synchrony zero (n=191) were used from both groups and 49.2% (94/191) were pregnant on day 25, 37.5% (39/104) on AI group and 63.2% (55/87; p<0.01)... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Resumo: O objetivo deste estudo foi determinar a importância do local de transferência embrionária (metade superior ou inferior da cavidade endometrial) nas taxas de implantação e gestação. Metodologia: Foram randomizadas 400 transferências embrionárias, guiadas por ultra-sonografia em dois grupos, de acordo com a distância entre a camada de basal de endométrio fúndico e a ponta do cateter de transferência, no ato do procedimento. O Grupo 1 (n200) correspondeu às transferências sendo realizadas a uma distância <50% do comprimento da cavidade endometrial, isto é, na metade superior da cavidade. O Grupo II (n=200) correspondeu às transferências realizadas a uma distância 50% do comprimento da cavidade endometrial, isto é, na metade inferior da cavidade. Os dados foram avaliados pelos testes t de Student, Mann-Whitney e exato de Fisher. Resultados: As características gerais da população estudada e das transferências tiveram distribuição igualitária (p>0,05) entre Grupos l e II. Não houve diferença estatística entre os grupos com relação às taxas de implantação embrionária (Grupo 1: 16,0%; Grupo II: 16,4% p=0,86) e gestação (Grupo 1: 35,0%; Grupo II: 29,5% p=0,28). Conclusão: As taxas de implantação e gestação são similares, quando os embriões são colocados na metade superior ou inferior da cavidade endometrial. / Abstract: The objective of the present study was to determine the importance of the site of embryo transfer (upper or lower haif endometrial cavity) on implantation and clinical pregnancy rates. Methods: A total of 400 transfers guided by ultrasound were randomly assigned to two groups according to the distance between the basal layer of fundal endometrium and the catheter tip at the time of embryo placement. Group 1 (n=200) consísted of transfers corresponding to a distance of <50% of the endometrial cavity length, i.e. transfer in upper haif of the cavity; and group li (n=200) consisted of transfers corresponding to a distance of 50% of the endometrial cavity Iength, ie. transfer in lower haif of cavity. The Student's t-test, Mann-Whitney test and Fishers exact test were used where appropriate. Results: The general characteristics of the study population and the main transfer cycle characteristics had an equal distribution (p>0.05) between groups 1 and II. No significant difference in implantation (Group 1: 16.0%; Group II: 16.4% p=0.86) or pregnancy rates (Group 1: 35.0%; Group II: 29.5% p=0.28) was observed between groups 1 and II. Conclusion: The implantation or pregnancy rates were similar whether the embryos were deposited in the upper or lower half of the endometrial cavity. / Orientador: José Gonçalves Franco Júnior / Coorientador: Anaglória Pontes / Banca: Marilza Vieira Cunha Rudge / Banca: Eliana Milanesi Rubio / Banca: João Batista Alcântara Oliveira / Banca: Mário Cavagna / Doutor

Orientador: José Antônio Dell'Aqua Júnior / Banca: / Resumo: O presente estudo objetivou verificar a utilização do acetato de deslorelina indução de dupla ovulação em éguas. No experimento 1 as foram utilizados 16 ciclos de 8 éguas, que foram tratadas com 100 μg de acetato de deslorelina (IM) a cada 12 horas ou solução salina, partir do D8 do ciclo estral até no mínimo dois folículos atingirem 33 mm quando foi induzida a ovulação com 2500 UI de hCG. A inseminação artificial foi realizada 24 horas após a indução com 1x109 de espermatozóides viáveis e a colheita dos embriões foi realizada no oitavo dia após a primeira ovulação detectada. No experimento 2 foram utilizados 112 ciclos de 56 éguas, neste experimento o protocolo com o acetato de deslorelina foi iniciado somente quando foi detectado um folículo com diâmetro de 25 mm e pelo menos um segundo folículo com diâmetro ≥ 21 ±1 mm nesse momento foi efetuada a aplicação de 100 μg de acetato de deslorelina (IM) a cada 12 horas ou solução salina e os demais procedimentos foram semelhantes aos descritos no protocolo do experimento 1. Para as análises estatísticas das variáveis estudadas foram utilizados os testes "t de Student" e teste Exato de Fisher. No experimento 1 apenas duas éguas do grupo tratado com acetato de deslorelina responderam com dupla ovulação. Já no experimento 2 a porcentagem de animais que responderam com dupla ovulação foi de 82% e a recuperação embrionária por ciclo foi de 1,12 x 0,57 no grupo tratado com acetato de deslorelina e no grupo controle, respectivamente (p<0,05). O acetato de deslorelina é eficiente na indução de duplas ovulações em éguas desde que o protocolo seja iniciado com no mínimo dois folículos entre 20 e 25 mm de diâmetro nos ovários e permite uma recuperação embrionária de um embrião por lavado uterino em média / Abstract: This study aimed to verify whether deslorelin acetate could induce double ovulation in equine mares. In Experiment 1, we studied 16 estrous cycles in eight mares treated with 100 μg of deslorelin acetate or saline intramuscularly (IM) every 12 hours from D8 of the estrous cycle until at least two follicles reached 33 mm. At this time, ovulation was induced with 2500 IU of hCG. Artificial insemination was performed using 1 x 109 viable sperm 24 hours after induction, and embryos were collected on the eighth day after ovulation was first detected. In Experiment 2, we studied 112 cycles in 56 mares. In this experiment, the deslorelin acetate protocol was initiated only after a follicle with a diameter of 25 mm and at least one second follicle with a diameter ≥ 21 ± 1 mm was detected, at which time 100 mg deslorelin acetate or saline was administered IM every 12 hours. The other procedures were similar to those described in Experiment 1. The variables studied were analyzed using Student's t-test and Fisher's exact test. In the first experiment, only two mares in the group treated with deslorelin acetate responded with double ovulation. In the second experiment, 82% of animals per cycle responded with double ovulation, and the embryo recovery per cycle was 1.12 and 0.57 in the group treated with deslorelin acetate and the control group, respectively (p < 0.05). Deslorelin acetate is effective in inducing double ovulation in mares when the protocol is initiated when at least two follicles are between 20 and 25 mm in diameter. On average, it allows for the recovery of one embryo by uterine lavage / Mestre

Orientador: Samir Issa Samara / Banca: Sandra Possebon Gatti / Banca: Walt Yamasaki / Resumo: O herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1), agente etiológico da rinotraqueite infecciosa bovina (IBR)/Vulvovaginite Pustular Bovina (IPV), tem grande importância como agente causador de problemas reprodutivos em vacas por determinar baixas taxas de concepção ou parição, acarretando consideráveis perdas econômicas para o produtor. Assim, o presente estudo conduzido em rebanhos de três fazendas (A, B e C) onde se processa a transferência de embriões (TE) no município de Prata no Estado de Minas Gerais teve como objetivo verificar as condições sorológicas de 209 animais antes do processamento biotécnico, determinar a resposta imune de esquema vacinal pré-definido e analisar a relação entre títulos médios geométricos (TMG) de anticorpos antes e depois da vacinação com os parâmetros reprodutivos de fêmeas receptoras de embriões vacinadas contra o BoHV-1. O título dos anticorpos para BoHV-1 foi determinado por meio do teste de virusneutralização (VN), conforme protocolo definido pelo Organização Mundial de Saúde Animal (OIE) e o quadro reprodutivo foi caracterizado por meio do exame de ultrassonografia transretal. Com isso, verificou-se que as prevalências de 39,7% (27/68) na fazenda A, 27,5% (11/40) na fazenda B e 36,6% (37/101) na fazenda C não foram estatisticamente diferentes; essa situação epidemiológica definiu o aumento de títulos de anticorpos para o BoHV-1 em 72,7% (152/209) dos animais pela vacinação com dose única; o maior sucesso de prenhez (75%) na 1ª TE foi observada nos animais que eram positivos e atingiram títulos acima de 256 após a vacinação; mesmo assim, no contexto estatístico, os índices gerais de gestação não tiveram influência significativa em decorrência da vacinação com dose única / Abstract: The bovine herpesvirus type 1 (BoVH-1), which causes infectious bovine rhinotracheitis (IBR) / infectious pustular vulvovaginitis (IPV), has major importance as an agent that causes reproductive problems by determining low conception or calving rates causing significant economical losses for the producer. The present study, was carried out in the cattle of three farms (A, B and C), where the embryos transfer is processed (ET), at Prata municipality in Minas Gerais State, aiming to verify the serological conditions of 209 animals before biotechnical processing, to determine immune response to a pre defined vaccination schedule and to analyze the relationship between geometric mean titers (TMG) of antibodies before and after vaccination with the reproductive parameters in embryo recipient heifers vaccinated against BoHV-1. The antibodies titers of BoHV-1 were determined by the virusneutralization test (VN), according to the protocol established by the World Organization for Animal Health (OIE) and the reproductive performance was characterized by transrectal ultrasonography examination. Thus, it was verified that the prevalence rates of 39.7% (27/68) in farm A, 27.5% (11/40) in farm B and 36.6% (37/101) in farm C had no statistical difference; this epidemiological situation defined the increase of antibody titers for BoHV-1 in 72.7% (152/209) of the animals by vaccination with a single dose; the greater success of pregnancy (75%) in the first ET was observed in animals that were positive and reached titers higher than 256 after vaccination; in the statistical context, the single dose vaccination had no significative influence in the overall rates of pregnancy / Mestre

Orientador: Ciro Moraes Barros / Banca: Roberto Sartori / Banca: Ronaldo Luiz Ereno / Resumo:O protocolo denominado P-36 tem sido amplamente utilizado para induzir ovulação múltipla, por permitir a inseminação artificial em tempo fixo (IATF) e facilitar o manejo de doadoras de embriões. Estudos recentes com o P-36, mostram que a substituição das últimas duas doses de FSH por eCG melhora a produção de embriões. Entretanto, aplicações sucessivas de eCG podem induzir a formação de anticorpos e diminuir a produção de embriões bovinos. Objetiva-se com o presente trabalho verificar a eficiência do Protocolo P- 36/eCG em vacas da raça Angus e testar a possibilidade de substituir a eCG pelo LH, no último dia do tratamento superestimulatório. No primeiro experimento, 22 vacas Angus foram distribuídas em 4 grupos: LH60 (controle) LH6ü/eCG, LH60/LH e LH60/FSH+LH. Cada doadora foi superovulada 3 vezes, de forma que um mesmo animal recebeu 3 dos 4 tratamentos, totalizando 17 vacas nos dois primeiros grupos e 16 nos demais, em um delineamento experimental de blocos incompletos. Em dia aleatório do ciclo estral (DO), as doadoras receberam um dispositivo intravaginal contendo 1,0 g de progesterona (DIV) e benzoato de estradiol (3 mg, via 1M). No grupo controle, os animais foram superestimulados com pFSH (via 1M, dose total = 200 mg) duas vezes ao dia em doses decrescentes do 04 ao 07, enquanto que no grupo LH60leCG e LH60/LH as duas últimas doses de FSH foram substituídas por eCG (totalizando 400 UI via 1M) ou pLH (totalizando 2 mg, via 1M), respectivamente. Finalmente, as vacas do grupo LH60/FSH+LH receberam duas doses de 1,0 mg de pLH juntamente com as duas últimas doses de pFSH. Todas as vacas foram tratadas com d-c1oprostenol (150 mg, via 1M) no dia 6, e o DIV foi removido 36 h após a administração da PGF2a. No dia 8, a ovulação foi induzida com 12,5 mg de pLH (via 1M,) e os animais foram IATF 12 e 24 h após a aplicação de pLH. No segundo experimento, ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The protocol called P-36 has been broad/y used to induce multiple ovulations, due to the fact that it allows fixed-time artificial insemination (FTAI), and facilitates embryo donors handling. Recent studies with P-36 protocol, have shownthat replacement of the last two doses of FSH by eCG improves embryo yield. However, after consecutive use, eCG may induce antibody and decrease bovine embryo production. The objective of the present study is to verify the efficiency of protocol P-36/eCG in Angus breed, and to test the replacement of eCG by LH in the last day of superestimulatory treatment. In experiment 1, 22 Angus cows were randomly allotted to 4 groups: LH60 (Control), LH60/eCG, LH60/LH and LH60/FSH+LH. Each donor was superovulated 3 times, in such a way that each animal received 3 of 4 treatments, totaling 17 cows in the first two groups and 16 in the others (incomplete block design). At a random stage of the estrous cycle (DO), the embryo donors received an intravaginal device (lVO) containing 1.0 9 of progesterone and estradiol benzoate (3.0 mg, i.m.). In the control group the animais were superestimulated with pFSH (i.m., total dose = 200 mg) twice a day in decreasing doses from 04 to 7, whereas in groups LH60/eCG and LH60/LH the last two doses of FSH were replaced by eCG (i.m, total dose = 400 lU) or LH (i.m., total dose = 2.0 mg), respectively. Finally, the cows trom group LH60/FSH+LH received two doses of 1.0 mg of LH simultaneously with the last two doses of FSH. Ali animais were treated with dc1oprostenol (150 mg, i.m.) on day 6, and the IVD was removed 36 h after PGF2a administration. Ovulation was induced with 12.5 mg of pLH (i.m.), on day 8, and the animais were FTAI 12 and 24 h after pLH. In experiment 2, 17 cows were randomly allocated in 3 groups: LH48, LH60 and LH48/FSH+LH. The difference between the first and the second experiment is that in groups LH48 and LH48/FSH+LH ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Paulo Henrique Franceschini / Banca: Antônio Cláudio Tedesco / Banca: Francisco Guilherme Leite / Resumo: Os objetivos do estudo foram: avaliar o efeito antioxidante do Trolox® 1) no meio de manutenção de embriões sobre as taxas de concepção (25 e 46 dias) e a perda gestacional de receptoras bovinas Holandesas repetidoras de serviço, em dois períodos (abril-junho/setembro-novembro) e 2) no meio de transporte de oócitos bovinos aspirados de ovários de abatedouro sobre as taxas de clivagem, blastocisto e eclosão in vitro. No Experimento 1, doadoras de embriões foram superovuladas e submetidas à lavagem uterina. Os embriões colhidos foram divididos em dois grupos, deixados em meio com ou sem antioxidante, por 2 a 6h. No Experimento 2, folículos foram aspirados e os complexos cumulus-oócito grau I e II foram divididos em quatro grupos: Controle 8h, Antioxidante 8h, Controle 20h e Antioxidante 20h. Então, foram mantidos em uma transportadora de oócitos (37ºC) por 8 ou 20 horas. Após a maturação, fecundação e cultivo in vitro, as taxas de clivagem (D3), blastocisto (D6, 7 e 9) e eclosão (D11) foram avaliadas. Alíquotas de 200 μL do meio de transporte foram retiradas em cada momento experimental (0, 8 e 20h) para realização dos testes de capacidade antioxidante total (CAT). No Experimento 1, não houve efeito de tratamento sobre as variáveis avaliadas. Foi verificado efeito de período experimental (P=0,001), categoria da doadora (P<0,05), qualidade embrionária (P=0,049) e intervalo Divisão dos Grupos-Inovulação (P<0,0001). No Experimento 2, não houve efeito de tratamento sobre as taxas analisadas. No entanto, houve redução das taxas de clivagem e blastocisto (D7 e 9) nos grupos 20 horas. Ainda, no D6 foram obtidas taxas de blastocisto semelhantes nos grupos Antioxidante 8 e 20h. A análise da CAT evidenciou que o Trolox® auxiliou o combate às ROS. / Abstract: The objectives of the present study were to evaluate the effect of the addition of an antioxidant (Trolox®) 1) to a holding media for bovine in vivo produced embryos, on conception rates 25 and 46 days of pregnancy and pregnancy loss, in Holstein bovine recipients at 4th or more service, during two periods of the year (April-June/September-November) and 2) to a transport media for bovine oocytes aspirated from slaughter house ovaries, on in vitro cleavage, blastocyst and hatching rates. In Experiment 1, donor cows were superovulated and submitted to uterine flushings. The recovered embryos were divided into two groups, kept in holding media with or without antioxidant, for 2-6h. In Experiment 2, follicles were aspirated and cumulus-oocyte complexes grade I and II were divided into four groups: Control 8h, Antioxidant 8h, Control 20h and Antioxidant 20h. Oocytes were kept in a transportable machine (37ºC) for 8 or 20 hours. After in vitro maturation, fertilization and culture, cleavage (D3), blastocyst (D6, 7 and 9) and hatching rates (D11) were evaluated. Samples (200 μL) of the transport media were collected in each experimental moment (0, 8 e 20h) for total antioxidant capacity assay (TACA). In Experiment 1, no effect of treatment was observed. Effects of experimental period (P=0.001), donor category (P<0.05), embryo quality (P=0.049) and interval Group division-embryo transfer (P<0.0001) were detected. In Experiment 2, no effect of treatment was found on the analyzed rates. However, reduction on cleavage and blastocyst (D7 e 9) rates was detected on Groups 20h. Also, on D6 similar blastocyst rates were observed in Groups Antioxidant 8 and 20h. The analysis of TACA evidenced that Trolox® collaborated with the combat against the ROS. / Mestre