Orientador: Mary Luci de Souza Queiroz / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T21:16:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dieamant_GustavodeCampos_D.pdf: 11544856 bytes, checksum: 05f884d1804a10bd91e58e71c4df4681 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O envelhecimento cutâneo é resultado de dois processos independentes, clinica e biologicamente distintos, que afetam a pele simultaneamente. Ao primeiro, conhecido como "relógio biológico", damos o nome de envelhecimento intrínseco, o qual afeta a pele na mesma proporção em que órgãos internos são afetados, como por exemplo, a lenta e irreversível degeneração tecidual. O segundo, denominado fotoenvelhecimento, é resultado da exposição da pele a agentes agressores ambientais, primeiramente radiação ultravioleta (RUV). Sobre o impacto da RUV, especialmente RUVA e RUVB, a pele passa por inúmeras alterações, incluindo hiperpigmentação, fotodano, alterações histológicas e imunológicas. Tendo em vista a complexidade do fotoenvelhecimento, podemos dividir este trabalho em duas partes, onde avaliamos em uma primeira etapa os efeitos da RUV sobre a resposta neuroimuno-endocrinológica da pele através da mensuração de parâmetros específicos em culturas de fibroblastos e queratinocitos humanos. Após a realização dos experimentos propostos para a primeira parte deste trabalho, passamos a considerar para a segunda etapa, a possível ação in vitro e in vivo do extrato de Rhodiola rosea (ERR) em associação com o dipeptídeo Lcarnosina (LC) sobre a reversão ou controle dos efeitos deletérios da RUV sobre a pele. Nossos resultados demonstram que durante a foto-exposição, culturas celulares in vitro apresentaram importantes alterações nos parâmetros avaliados, especialmente após a exposição crônica, dentre elas: redução na produção de IL-1a, TNF-a e IFN-g, redução nos níveis de b-endorfina e encefalina, aumento na atividade de metaloproteinases (MMPs), inibição na atividade do inibidor tecidual de metaloproteinase 1 (TIMP-1), redução nos níveis de colágeno e elastina e redução na atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT). No perfil de resposta das células tratadas com ERR, pudemos observar uma importante função adaptógena do extrato, onde na maioria dos parâmetros, constatamos uma modulação da resposta celular de forma dose dependente. Os resultados obtidos com L-carnosina foram importantes, especialmente no que diz respeito aos níveis de colágeno, elastina e atividade das enzimas antioxidantes. Quando o perfil de resposta da associação entre ambos (ARRLC) é observado, pode-se perceber que, em alguns parâmetros, não houve uma potencialização dos efeitos. No entanto, dada a complexidade da resposta neuro-imuno-endocrinológica da pele relacionada ao fotoenvelhecimento, pode-se concluir que a utilização de compostos com mecanismos de ação distintos é imprescindível, uma vez que diferentes processos metabólicos levam ao dano tecidual e à aparência estética comprometida da pele fotoenvelhecida. Para a realização dos estudos clínicos, uma emulsão placebo ou emulsão contendo 1% de ARRLC foi utilizada pelas voluntárias em dois estudos independentes, sendo que o primeiro foi realizado durante 28 dias para avaliação dos parâmetros subjetivos - conforto da pele, redução da sensação de desconforto após Stinging-Test (ST) e melhora do ressecamento da pele. O segundo estudo foi realizado durante 56 dias, onde avaliou-se em D1, D28 e D56, a melhora do relevo cutâneo e a redução da perda de água transepidérmica. Os resultados obtidos demonstram que aproximadamente 90% das voluntárias reportaram uma melhora do conforto da pele e 75% reportaram redução do ressecamento. Além disso, a utilização da emulsão contendo 1% de ARRLC apresentou uma redução de aproximadamente 36% na sensação de desconforto após ST. Além disso, o tratamento com a emulsão contendo 1% de ARRLC resultou em redução considerável da perda de água transepidérmica e na melhora do relevo cutâneo. Estes resultados clínicos, associados aos resultados obtidos in vitro, nos encorajam a sugerir o uso de ARRLC como alternativa terapêutica no tratamento tópico do fotoenvelhecimento. / Abstract: Cutaneous ageing is a complex biological phenomenon consisting of two components; intrinsic ageing, which is largely genetically determined and extrinsic ageing caused by environmental exposure, primarily UV light. Under the impact of ultraviolet radiation (UVR), skin undergoes several changes, including enhanced pigmentation, photodamage and immunosuppression. Because photoaging culminates in important alterations in skin function and appearance, we can separate this work in two different phases. In the first phase, we evaluated the effects of ultraviolet radiation (UVR) on skin neuro-immuneendocrinological response through the measurement of specific parameters in fibroblasts and keratinocytes human cell cultures. After the conclusion of experiments proposed for the first phase of this work, the possible in vitro and in vivo effects of Rhodiola rosea extract (ERR) in combination to di-peptide Lcarnosine (LC) in the control of deleterious effects of UVR exposure on the skin were evaluated. Our results demonstrated that during the UVR, the cell cultures promoted crucial alterations in the parameters evaluated, mainly after chronic exposure. The alterations observed were: the reduction in the production of IL-1a, TNF-a, IFN-g, b-endorphin and enkephalin, reduction in the levels of matrix metalloproteinase tissue inhibitor-1, increase of metalloproteinase activity, reduction of collagen and elastin production and inhibition of the antioxidant enzymes superoxide dismutase and catalase. In the cell groups that received ERR, we observed an important adaptogenic function of the extract, because in the majority of the parameters, it was able to modulate the cell response in a dose-dependent manner. The results obtained in the LC treated groups, we could also observe important effects, mainly in collagen and elastin synthesis and in the antioxidant enzymes activities. When we consider the response obtained with the association of both ERR and LC (ARRLC), we could see that it is not able to enhance the effects obtained with ERR or LC separately. Therefore, due to the complexity of the neuro-immune-endocrinological response during the photoaging, we can conclude that the use of compounds with different mechanisms of action is crucial, because distinct metabolic process lead to tissue damage and terrible appearance of photodamaged skin. For the clinical trials, a placebo emulsion or a emulsion containing 1% of ARRLC were used by the volunteers in two independent studies, in which the first one was performed during 28 days for evaluation of subjective parameters, including skin comfort, reduction of skin dryness sensation and reduction of skin discomfort sensation after Stinging-Test (ST). The second study was performed during 56-days and the evaluations were carried out on D1, D28 and D56. The parameters evaluated were the improvement of cutaneous relief and the reduction of transepidermal water loss. The obtained results demonstrated that approximately 90% of the volunteers perceived an increase in skin comfort and 75% reported reduction of skin dryness sensation. In addition, the emulsion containing 1% of ARRLC was able to reduce in approximately 36% the sensation of discomfort after ST. These clinical results and the in vitro findings, encourage us to suggest the use of ARRLC as alternative ingredient in the topical treatment of skin photoaging. / Doutorado / Doutor em Farmacologia