Orientador: Ana Liz Garcia Alves / Coorientador: Marcos Jun Watanabe / Banca: Carlos Alberto Hussni / Banca: Carlos Eduardo Ambrósio / Banca: Elenice Deffune / Banca: Thais Sodré de Lima Machado / Resumo: As diferentes formas de terapia celular, como as células-tronco mesenquimais (CTM) associadas ao plasma rico em plaquetas (PRP), têm sido amplamente utilizadas no tratamento de lesões condrais e da osteoartrite, apresentando resultados interessantes. Atualmente, a literatura já traz uma série de competências positivas inerentes às CTM e ao PRP. O emprego da terapia celular em associações com outros tipos de tratamento, como as microfraturas, possibilitou que os pesquisadores aproximassem-se de resultados muito próximos ao ideal. Sendo assim, este estudo teve como objetivo comparar a resposta clínica e a inflamação articular, a morfologia e a composição do tecido de reparação de lesões condrais experimentalmente induzidas em equinos, tratadas com microfraturas e CTM em gel de PRP de forma isolada ou com a associação desses tratamentos. Para isso, 12 equinos foram submetidos a uma primeira cirurgia artroscópica, considerada tempo zero do experimento (T0), onde foi induzida uma lesão condral de 15 mm de diâmetro na tróclea medial femoral de ambos os membros pélvicos. As 24 articulações femoropatelares desses animais foram divididas em quatro grupos. O defeito condral foi submetido ao tratamento conforme o grupo: GA: recebeu o tratamento apenas com microfraturas. GB recebeu o tratamento com microfraturas associadas ao implante de CTMs em arcabouço de PRP em gel. GC recebeu o tratamento apenas com o implante de CTM em gel de PRP, e o GD foi o grupo controle do experimento, sem a aplicação de tratamentos. As CTMs foram extraídas do tecido adiposo e o PRP em gel foi obtido por protocolo de dupla centrifugação seguido da adição de trombina liofilizada bovina para a formação do gel. As articulações foram acompanhadas até os cinco meses (T150) através de exames clínicos e laboratoriais. Em T150 foi realizada nova artroscopia para avaliação macroscópica e coleta de amostras do tecido de reparação para... / Abstract: Several methods of cell therapy, such as mesenchymal stem cells (MSC) associated with platelet rich plasma (PRP), have been commonly used in the treatment of chondral articular defects and osteoarthritis, with satisfactory outcomes. Nowadays, the literature already shows an amount of positive features inherent to the MSC and the PRP. The use of cell therapy in association with other kinds of treatment, such as microfractures, allowed the researchers come closer to the ideal results. Thus, this study aimed to compare the clinical response and joint inflammation, the morphology and the structure of repair tissue from chondral defects experimentally induced in horses which were treated with microfractures, MSC, PRP alone or in combination of treatments. For this purpose, a first arthroscopic surgery was performed in 12 horses, which was considered time zero of the experiment (T0). A chondral defect of 15 mm diameter was created on medial femoral trochlea of both hindlimbs. The 24 patellofemoral joints of these animals were divided into four groups. The chondral defect was treated according to the group: GA: received treatment only with microfractures. GB received treatment with microfractures associated with MSC in PRP-gel scaffold. CG received treatment only with MSC in PRP-gel, and the GD was the control group, without treatments. MSCs were obtained from adipose tissue and PRP gel was obtained through double centrifugation method, followed by adding lyophilized bovine thrombin to achieve the gel consistency. The joints were followed during five months (T150) by clinical and laboratory assessment. At T150 there was performed a new arthroscopy aiming the macroscopic evaluation and repair tissue samples collection for histopathological, immunohistochemistry and qPCR analysis. We observed that the use of CTM in PRP-gel in the treatment of experimental chondral defects can modify the IL-1 and PGE2 concentrations in the synovial fluid. There ... / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005Bitstream added on 2014-06-13T20:27:19Z : No. of bitstreams: 1 barreira_apb_dr_botfmvz.pdf: 3081642 bytes, checksum: 31a0f6fc8ca00d6226b303ef5a047356 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A lesão do tendão do músculo flexor digital superficial (TFDS) é uma importante causa de claudicação em eqüinos, com prevalência de 13 a 30%, de acordo com a atividade eqüestre. Sua instalação pode comprometer a carreira do potro com recidivas ou causar o afastamento das corridas. Além disto, determina longos períodos de recuperação, com prejuízo à função tendínea. Os tratamentos propostos são diversos, mas efeitos como melhora da qualidade ou rapidez da cicatrização não são confirmados por estudos controlados. A terapia intralesional com fatores de crescimento (TGF-ß e IGF- 1), assim como a terapia com choques extracorpóreos vêm mostrando resultados promissores. Recentemente, os avanços médicos têm demonstrado crescente interesse na utilização das células-tronco em terapia de doenças degenerativas e também em cicatrização lenta ou ineficaz. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos do implante autólogo de células mesenquimais de medula óssea na cicatrização tendínea, comparando tendões tratados com tendões do grupo controle. Foi induzida lesão do TFDS de ambos os membros anteriores de seis eqüinos, seguida por implante autólogo em apenas um membro de cada animal. Os animais foram avaliados por parâmetros clínicos e ultra-sonográficos e após biópsia realizada ao 48o dia do experimento, foram verificadas características histopatológicas e imunoistoquímicas. Resultados como aumento do infiltrado inflamatório celular, abundância da matriz, diminuição da necrose, discreto aumento no índice de proliferação celular (Ki- 67, clone MIB1) e menor imunomarcação do TGF-ß1 caracterizam a aceleração do reparo tendíneo no grupo tratado. Estudos aprofundados devem ser desenvolvidos com o objetivo de definir a influência do tratamento em fase posterior do reparo. Conclui-se, então,... / The superficial digital flexor tendonitis (SDFT) is an important cause of lameness in horses with incidence from 13 to 30% depending of the exercise modality. This injury can occur in yearlings and compromise its carrier by reinjury or even the impossibility of return to athletic life. Although long periods of rest are necessary to tendon repair, there is an elasticity loss in the tendon. As current treatment regimes have only marginal effects there is interest in researching therapies that influence the quality or the duration of tendon repair. Intralesional therapy with growth factors (TGFß1 e IGF-1) and radial shock wave therapy have been presenting promising results. Recently, medical interest has been directed to the stem cells therapy of degenerative diseases and cases of deficient healing process. This study aims to evaluate the influence of autologous mesenchymal stem cells from bone marrow in tendon healing, comparing treated and none treated tendons. Induced collagen lesions were in both forelimbs TFDS from six horses, followed by autologous implant in one forelimb from each animal. The horses were evaluated by clinical, ultrasonographic, histophatologic and imunohistochemistry parameters. Tendon biopsies were done at day 48. Results such as high inflammation cells infiltration and synthesis of extracellular matrix, few necrosis areas, discrete increase in cellular proliferation (Ki-67) and low immunoreactivity to TGFß1 found in treatment group suggested the acceleration of tendon repair in this group. Further studies should be developed in order to verify the influence of this treatment on later phase of tendon repair. Overall, after analysis of results, we conclude that cellular therapy with mesenchymal stem cells have accelerate tendon repair at 48 days after treatment.