Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-05-22T12:28:36Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Laurine Lacerda Pigosso - 2012.pdf: 3120628 bytes, checksum: 05c24b721e04453fce0116ba2470c24a (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-05-22T12:33:01Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Laurine Lacerda Pigosso - 2012.pdf: 3120628 bytes, checksum: 05c24b721e04453fce0116ba2470c24a (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-22T12:33:01Z (GMT). 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We compared the proteomic profiles of Pb01 (01-like), Pb2 (PS2), Pb339 (S1) and PbEPM83 (PS3) using 2D electrophoresis and mass spectrometry. The proteins/isoforms were selected based on the staining intensity of the spots as determined by image analysis. The proteins/isoforms were in-gel digested and identified by peptide mass fingerprinting and ion fragmentation. A total of 714 spots were detected, of which 343 were analyzed. From these spots, 301 represented differentially expressed proteins/isoforms among the four analyzed isolates, as determined by ANOVA. After applying the FDR correction, a total of 267 spots were determined to be differentially expressed. From the total, 193 proteins/isoforms were identified by PMF and confirmed by ion fragmentation. Comparing the expression profiles of the isolates, the proteins/isoforms that were related to glycolysis/gluconeogenesis and to alcohol fermentation were more abundant in Pb01 than in other representatives of the genus Paracoccidioides, indicating a higher use of anaerobic pathways for energy production. Those enzymes related to the oxidative stress response were more abundant in Pb01, Pb2 and Pb339, indicating a better response to ROS in these members of the Paracoccidioides complex. The enzymes of the pentose phosphate pathway were abundant in Pb2. Antigenic proteins, such as GP43 and a 27-kDa antigenic protein, were less abundant in Pb01 and Pb2. The proteomic profile indicates metabolic differences among the analyzed members of the Paracoccidioides genus. / O gênero Paracoccidioides compreende um complexo de espécies filogenéticas do fungo patogênico dimórfico, agente etiológico da paracoccidioidomicose (PCM), uma doença restrita à América Latina e de relevância acentuada em suas áreas endêmicas, devido à sua alta frequência e gravidade. Os membros do gênero Paracoccidioides são distribuídos em espécies filogenéticas distintas (S1, PS2, PS3 e 01-like) que diferem potencialmente nas suas características bioquímicas e moleculares. Neste trabalho, foi realizada a caracterização proteômica de diferentes membros do gênero Paracoccidioides. Foram comparados os perfis proteômicos de Pb01 (01-like), Pb2 (PS2), Pb339 (S1) e PbEPM83 (PS3) utilizando eletroforese 2D e espectrometria de massa. As proteínas / isoformas foram selecionados com base na intensidade de coloração dos spots conforme determinado por análise de imagem. As proteínas / isoformas foram excisadas do gel, digeridas e identificadas por PMF (Peptide mass fingerprinting) e fragmentação iônica. Um total de 714 spots foi detectado, 343 foram analisados. A partir destes spots, 301 apresentaram-se diferencialmente expressos entre os quatro isolados analisados, determinado por ANOVA. Depois de aplicar a correção FDR, um total de 267 spots foram diferencialmente expressos. Do total, 193 / isoformas proteínas foram identificadas por PMF e confirmadas por fragmentação iônica. Comparando-se os perfis de expressão dos isolados, as proteínas / isoformas que foram relacionados para a glicólise / gliconeogênese e fermentação alcoólica foram mais abundantes em Pb01 do que em outros representantes do gênero Paracoccidioides, indicando uma maior utilização das vias anaeróbias para a produção de energia. Enzimas relacionadas com a resposta ao estresse oxidativo foram mais abundantes em Pb01, Pb2 e Pb339, indicando uma melhor resposta às ROS nestes membros do complexo Paracoccidioides. As enzimas da via das pentoses foram abundantes em Pb2. Proteínas antigênicas, tal como GP43 e uma proteína antigênica de 27 kDa, foram menos abundantes em Pb01 e Pb2. O perfil proteômico indica diferenças metabólicas entre os membros analisados do gênero Paracoccidioides.