Tese (doutorada)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal / Submitted by Sabrina Silva de Macedo (sabrinamacedo@bce.unb.br) on 2012-06-29T14:56:54Z No. of bitstreams: 1 2012_KhesllerPatriciaOlaziaName.pdf: 13141698 bytes, checksum: ad714efcfc78f4d226cd5d82266b2986 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-07-05T18:16:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_KhesllerPatriciaOlaziaName.pdf: 13141698 bytes, checksum: ad714efcfc78f4d226cd5d82266b2986 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-05T18:16:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_KhesllerPatriciaOlaziaName.pdf: 13141698 bytes, checksum: ad714efcfc78f4d226cd5d82266b2986 (MD5) / Dados morfológicos obtidos da análise do aparelho reprodutor interno e dos espermatozóides em invertebrados têm sido cada vez mais utilizados no sentido de fornecer soluções consistentes para uma melhor compreensão da história evolutivados grupos, uma vez que os dados morfológicos tradicionalmente utilizados não têm sido suficientes, no sentido de permitir tal compreensão. A família Calliphoridae é um exemplo do que foi dito anteriormente. Embora o conhecimento sobre essa família seja crucial para que se possa chegar ao entendimento da evolução dentro do grupo Oestroidea, até o presente momento, pouco se conhece sobre a morfologia interna de seus órgãos reprodutores e de seus espermatozóides. A presente tese avaliou a morfologia dos espermatozóides em doze espécies de califorídeos, sendo que oito destas espécies ocorrem no Brasil e três são espécies dos Andes Colombianos.Estruturalmente, o aparelho reprodutor interno masculino em Calliphoridae éformado por um par de testículos, ductos deferentes e glândulas acessórias, uma vesícula seminal e um ducto ejaculatório. A morfologia dos espermatozóides revelou a presença de polimorfismo relacionado ao comprimento dos espermatozóides. Os eventos da espermiogênese nas espécies analisadas são similares e seguem o padrão descrito para outros grupos de insetos, sendo a diferenciação caracterizada pela formação do acrossoma e do ‘nebenkern’, condensação do núcleo,alongamento celular incluindo desenvolvimento do flagelo e perda de citoplasma. A análise ultra estrutural revelou que o espermatozóide é formado por duas regiões -xiida cabeça e do flagelo, sendo a zona intermediária entre essas duas, denominada zona de justaposição “overlap”. As organelas presentes na região da cabeça são aocrossoma e o núcleo, e na região do flagelo o axonema (9+9+2), os derivados mitocondriais e o adjunto do centríolo. Foi observado a presença de polimorfismo relacionado à morfologia nas organelas que formam o espermatozóide. Algumas espécies possuem dois derivados mitocondriais e outras apenas um derivado. Oacrossoma nas três espécies do gênero Lucilia e nas duas espécies de Hemilucilia analisadas é cônico e volumoso, enquanto nas demais espécies é cônico e delgado.A marcação com ácido etanólico fosfotúngstico - EPTA mostrou-se diferente nas diferentes espécies analisadas. Foi avaliado ainda, o perfil de marcação de resíduos de carboidratos nas espermátides e nos espermatozóides das espécies presentes no Brasil, uma vez que tais moléculas são responsáveis, pelo reconhecimento e interação entre os gametas. O mapeamento dos carboidratos de superfície nos espermatozóides nos forneceu dados cito químicos importantes que, aliados aos dados morfológicos já existentes, poderão ser úteis em estudos taxonômicos. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Morphological data obtained from the analysis of the internal reproductive tractand from sperm in invertebrates have been increasingly used to provide consistent solutions to understand more fully the evolutionary history of the groups, because the traditionally used morphological data have not been enough. The Calliphoridae familyis an example of this lack. Although knowledge about this family is crucial tounder standing evolution within the Oestroidea group, until now little is known aboutthe internal morphology of its reproductive organs and its sperm. The current thesisevaluated the sperm morphology in 12 species of Calliphoridae, nine of which occurin Brazil and three in the Colombian Andes. Structurally, the male internalreproductive apparatus in Calliphoridae is formed by a pair of testicles, deferentducts and accessory glands, a seminal vesicle and an ejaculatory duct. Spermmorphology revealed the presence of polymorphism related to their length. In thespecies studied, the spermatogenesis events are similar and follow the patterndescribed for other groups of insects, with differentiation being characterized by theformation of the acrosome and the “nebenkern”, condensation of the nucleus, cellularlengthening including flagellum development, and loss of cytoplasm. Ultrastructuralanalysis revealed that the sperm is made up of two regions – the head and theflagellum, with the intermediate zone between the two being denominated theoverlap. The organelles present in the head region are the acrosome and thenucleus, and in the flagellum there is the axoneme (9+9+2), the mitochondrialderivatives and the centriolar adjunct. The presence of polymorphism was observed,xivrelated to the morphology of the organelles that form the sperm. Some speciespossess two mitochondrial derivatives and others only one. The acrosome in thethree species from the genus Lucilia and in the two species of Hemilucilia analyzed isconical and bulky, while in the other species it is conical and slender. Marking withethanolic phosphotungstic acid (EPTA) was seen to be different for the variousspecies analyzed. The profile of carbohydrate residue marking in the spermatids andsperm was also evaluated for the species present in Brazil, because these moleculesare responsible,for recognition and interaction among gametes. Mapping the surfacecarbohydrates in the sperm provided us with important cyto-chemical data which,together with the morphological data that already exist, may be useful in taxonomicstudies.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2008. / Submitted by Jaqueline Oliveira (jaqueoliveiram@gmail.com) on 2008-12-16T15:33:20Z No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_2008_KhesllerPatriciaOlaziaName.pdf: 4643181 bytes, checksum: 7929b5a30eb0eadefed71af0b29adf98 (MD5) / Approved for entry into archive by Georgia Fernandes(georgia@bce.unb.br) on 2009-02-19T15:43:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_2008_KhesllerPatriciaOlaziaName.pdf: 4643181 bytes, checksum: 7929b5a30eb0eadefed71af0b29adf98 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-02-19T15:43:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_2008_KhesllerPatriciaOlaziaName.pdf: 4643181 bytes, checksum: 7929b5a30eb0eadefed71af0b29adf98 (MD5) / Os Diptera constituem uma das quatro maiores ordens de insetos. Chrysomya megacephala (Fabricius), a mosca-das-latrinas do Oriente, pertence à família Calliphoridae e encontra-se associada a questões médico-veterinárias, sanitárias e forenses. O objetivo desse trabalho foi caracterizar os aspectos ultra-estruturais da espermiogênese e do espermatozóide na referida espécie, incluindo a anatomia dos testículos e dos órgãos de armazenamento de espermatozóides nas fêmeas – as espermatecas. Estes dados são particularmente importantes em análises taxonômicas e filogenéticas, uma vez que tais células apresentam estruturas altamente conservadas. Nesta espécie, assim como na maioria dos insetos, a espermiogênese é caracterizada pelos seguintes eventos: formação do acrossoma, alongamento nuclear com condensação da cromatina, formação do flagelo e perda do excesso de citoplasma. No final do processo de espermiogênese, o espermatozóide em C. megacephala apresenta-se longo e delgado, medindo aproximadamente 590μm de comprimento. O espermatozóide é formado por acrossoma, núcleo com cromatina densamente compactada, centríolo, adjunto do centríolo, dois derivados mitocondriais preenchidos por material paracristalino e um axonema contendo: dois microtúbulos centrais, nove duplas periféricas e nove microtúbulos acessórios intercalados por fibras densas. O sistema reprodutor interno de machos e fêmeas possui modificações morfológicas que podem ser constantes em todos os ciclórrafos. O testículo de C. megacephala consiste de um único folículo e a parede do órgão é formada por uma camada de células pigmentadas e uma camada de tecido muscular. A espermateca consiste, externamente, de uma camada de células secretoras e internamente, de uma camada de cutícula que circunda a cavidade do órgão. ________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Diptera constitutes one of the four largest orders of insects. The Oriental latrine-fly Chrysomya megacephala (Fabricius) belongs to the family Calliphoridae and is associated with medic, veterinary, sanitary and forensic issues. The aim of this research was to characterize the utrastructural aspects of the spermiogenesis and spermatozoa of the C. megacephala, including the anatomy of testis and female sperm storage organs – the spermatheca. This data is particularly important in taxonomic and phylogenetic analysis, since in these cells their structure is highly conserved. In this species as with insects in general, the spermiogenesis is characterized by the following events: acrosome formation, nuclear elongation with chromatin condensation, flagellar formation and sheading of excess cytoplasm. At the end of spermiogenesis process, the spermatozoon in C. megacephala is a long and thin cell measuring 590 μm in length. The spermatozoon comprises acrosome, nucleus with compact dense chromatin, centriole, centriolar adjunct, two mitochondrial derivatives with paracrystalline material and axoneme with: two central microtubules, nine peripheral doublets, nine accessory microtubules and dense fibers. The internal reproductive system of the male and female has morphological modifications that may be constant in all Cyclorraphous. The testis of the C. megacephala consists of a unique follicle and the wall of the organ is formed by a layer of pigmented cells and a layer of muscular tissue. The spermatheca consists externally of a secretory cell layer, and internally of a cuticle layer witch surrounds the cavity of the organ.